臨床標本的微生物檢驗方式研究

徐衛珍

臨床標本的微生物檢驗方式研究

徐衛珍

目的 對臨床標本的微生物檢驗方式進行總結分析。方法 以靖州縣人民醫院在2013年搜集的180株臨床分離標本為例，其均為酵母樣真菌，采用Rosco擴散法對其耐藥性實施檢測。結果 其中在以上各酵母樣真菌檢測其陽性率中，最高的為白色念珠菌為42.78%，其耐藥性最高的為克霉唑。結論 在臨床標本微生物檢驗中，其所采用的方法均為標本分離、菌種檢定以及最后的藥敏試驗。

微生物；臨床標本；檢驗方式

一般對臨床標本的微生物檢驗方法程序即標本分離,菌種鑒定,藥敏試驗。特采取酵母樣真菌來進行微生物的檢驗方法。近來年在臨床和院內感染一般廣泛使用廣譜抗生素,皮質類固醇激素,免疫劑等藥物[1],而酵母樣真菌對臨床危重患者感染概率明顯上升,抗真菌藥物治療的準確和有效已經顯得尤為重要。所以本文抽取了2013年臨床分離的180株真菌采用Rosco紙片法來進行試驗,現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇靖州縣人民醫院2013年臨床分離標本180株,送檢標本中有著住院患者的不同檢測標本。如,糞便,痰,血液等。患者都是以慢性感染疾病為主。

1.2 方法 在沙保弱瓊脂培養基將細菌分離,用API20 CAUX鑒定到種[2]。藥敏測試采用6種株菌：兩性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素和克霉唑都來自丹麥Rosco公司。采用Rosco紙片法,在生理鹽水中放入單個菌落,將菌懸液調整到0.5左右,在改良的Shadomy平板上將菌懸液涂抹均與,等平板上的水分都曬干后,再將Rosco藥敏紙片貼上,這時不要將平板翻轉,直接把Rosco的藥敏紙片放入35°培養箱孵育18～20h。

1.3 鑒定標準 藥敏標準參照相關規定測試標準[3]。

1.4 統計學方法 采用統計學軟件包SPSS20.0分析處理本研究的所有數據及資料,計量資料用構成比表示,組間比較采用χ2檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 在臨床送檢的180株標本中,白色念珠菌檢出率最高42.78%,克柔念珠菌5.56%,熱帶念珠菌20.56%,星形念珠菌14.44%,光滑念珠菌7.22%,近平滑念珠菌6.67%,其他念珠菌2.78%,其之間檢出率比較差異具有統計學意義（P＜0.05,見表1）。

表1 180株念珠菌分布構成

2.2 酵母樣真菌藥敏實驗（見表2）。

2.3 氟康唑,對49株臨床分離酵母樣真菌進行藥敏實驗用Rosco紙片法,符合率為88.9%,敏感性為82%。

3 討論

臨床標本微生物檢驗陽性率低,使得醫生對疾病的診斷和治療水平也在降低。其主要原因如下：隨著近年來醫院臨床檢驗技術的發展,臨床檢驗的自動化使得臨床療效降低,其中臨床標本微生物的陽性率降低。臨床中標本微生物檢驗也大都是運用微機、微量化、自動化以及分子生物學的方式來進行檢驗工作的,同時檢驗的結果也將成為疾病的臨床診斷和治療的重要依據和方法。對臨床中標本微生物檢驗結果的陽性率研究中,微生物檢查結果在臨床治療中具有重要的意義。微生物標本檢查可以使醫生準確診斷出患者的疾病,并且醫生還可以根據微生物檢驗結果來及時的制定相應的治療對策,并結合患者臨床的癥狀變化,合理的使用抗菌藥物,減少因為抗菌藥物使用不當而造成患者病情的加重,從而為患者制定合理的治療方案,提高患者的疾病治愈率,因此可以說臨床標本微生物檢驗在患者疾病治療中,具有重要意義。

酵母樣真菌外觀似酵母型菌落,但在菌落表面除有生芽細胞外還有伸長的生芽細胞所形成的假菌絲伸入培養基內,如念珠菌。對它常規的鑒定方法有三種：(1)首先種玉米培養基和沙保若氏,觀察菌落特點在沙保若氏,觀察生長特點在玉米培養基上。(2)鑒定常見的4種酵母樣真菌在培植科瑪嘉上,根據顯色不同來鑒定。(3)鑒別常見的酵母樣真菌使用簡單的發酵試驗。而在臨床上,酵母樣真菌對引起全身性多臟器,多系統感染,嚴重會引發死亡[4]。醫院感染一般都是由真菌引起,它最大的表現就在于感染率增多。不再局限感染的菌種,耐藥性也有不同程度的提高。根據國內外的報告,白色念珠菌感染情況已經有所下降,較往常相比,有所提高的則是熱帶念珠菌和近平滑念珠菌等[5]。

酵母樣真菌由于不同特性,它的耐藥性也有所不同,對49株臨床分離酵母樣真菌進行藥敏實驗其中氟康唑用Rosco紙片法,符合率為88.9%,敏感性為82%。很高的耐藥性也存在于其他酵母樣真菌中。不同的抗真菌藥物在臨床上有不同的耐藥性,為了使抗真菌藥物運用更加合理,特采用了Rosco紙片法,它的經濟,便于觀察,結果重復性好[6]。不需特殊的培訓是Rosco紙片法檢驗方法最大的優點。它適用各個微生物實驗室。

綜上所述：在臨床中對微生物標本進行陽性率檢驗,不僅能提高臨床中對患者的診斷率,還可以將此信息作為診斷的依據,減少臨床治療中的誤診、漏診的發生。還可以通過臨床中不同微生物標本的陽性率檢驗,尋找患者病菌感染的原因,為疾病在臨床的診斷中提供客觀依據[7]。因此,應該認真分析臨床中不同年度的微生物標本檢驗的陽性率,不僅為醫院中臨床微生物檢測提供有價值的信息,還能提高醫生檢驗和診斷感染性疾病的水平,也對患者疾病的治療提供有效的幫助[8]。其中在不同臨床標本微生物檢驗中,雖然其不同的生長與生化特點是不同病原菌的存在方式,盡管各種微生物的有千差萬別的特性,但它們之間的檢測方法是一致的,都要經過三個步驟,即標本分離,菌種鑒定,藥敏試驗,而本文中的Rosco紙片法可作為真菌藥敏的常規方法推行使用。

表2 6種臨床臨床常見酵母樣真菌的耐藥率

[1] 刁菁,楊秀生,李天保,等.病原微生物藥敏檢測方法的研究進展[J].中國農學通報,2013,29(8):1-5.

[2] 景曉敏.回顧性分析比較不同臨床標本微生物檢驗的陽性率[J].中國現代藥物應用，2013，7（9）：89-90.

[3] 楊安芳.微生物檢驗泌尿系統的病原菌結果研究[J].中國醫藥導刊,2014,1(2):325-327.

[4] 段曉丹.常見臨床標本的微生物檢驗程序[J].按摩與康復醫學（下旬刊），2012，3（10）：151-152.

[5] 于路妹.臨床常用微生物學檢查標本常見細菌、真菌及其臨床意義[J].健康之路,2013,12(2):249-250.

[6] 楊柳,郭清蓮,申及,等.回顧性分析比較不同臨床標本微生物檢驗的陽性率[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(14):1573-1574.

[7] 張新秀.微生物檢驗在臨床應用中的質量控制[J].臨床和實驗醫學雜志,2011,10(5):396-397.

[8] 張卓然,高鵬,李琳,等.微生物非培養鑒定技術在臨床標本檢查中的應用研究[J].微生物學雜志,2009,29(3):18-24.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.25.008

湖南 418400 靖州縣人民醫院檢驗科（徐衛珍）