結核蛋白芯片檢測在結核病診斷中的價值

吳友根，楊興萍，王 軍，羅菊華，劉紅兵，張 麗，李朝金，余 碧，肖舒元

(攀枝花市第六人民醫院，四川 攀枝花 617023)

結核病是結核分枝桿菌(mycobacterium tuberculosis，MTB)感染引起的一種感染性疾病，部分確診困難。結核病也是不明原因發熱性疾病的主要疾病之一。全球有約17億人感染結核菌；在我國一些地區結核病已在感染性長期發熱的病因中上升至首位，其中肺外結核遠較肺內結核為多[1]。目前結核蛋白芯片檢測MTB-IgG抗體在結核病診斷應用較多而療效觀察較少。我們應用蛋白芯片技術檢測MTB-IgG抗體，對結核感染的診斷具有一定的作用，但發現無動態檢測治療效果的作用。2009年12月至2014年2月，我們利用該方法進行臨床檢測，現總結分析如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源 ①結核組：選取我院感染科臨床表現、細菌學、影像學或抗結核治療有效而明確診斷的結核病例464 例，其中:結核性胸膜炎35例,淋巴結結核20例，骨結核19例，腎泌尿系結核9例，其他肺外結核16例，余為肺結核。肺外結核的部分患者合并有肺結核。患者中男309例，女155例；年齡1～84歲，平均48.39歲。②非結核病組：選取我院非結核病例4 038例(且以出院診斷為準)，其中：男2 396例，女1 642例；年齡1個月至94歲，平均58.12歲。均抽取空腹血液5 mL。所有研究對象均無HIV感染、妊娠、使用免疫抑制劑或增強劑。采用5種MTB復合群特異性的抗原來檢測待檢血清中的抗體，如果任一抗體檢測陽性則結果可判定為陽性，5種抗體檢測均為陰性則結果可判定為陰性。

1.2 儀器及試劑 西安聯爾科技有限公司的配套儀器及相應試劑盒。

1.3 檢測方法 嚴格依照配套說明書進行操作，結果由儀器自動判讀。

1.4 統計學方法 采用χ2檢驗。

2 結 果

2.1 2組結核蛋白芯片法檢測情況 結核病組464例患者中結核蛋白芯片法檢測陽性323例，陽性率69.61%；非結核病組4 038例患者中結核蛋白芯片法檢測陽性788例，陽性率19.51%。2組抗體陽性率有非常顯著性差異(P<0.01)。

2.2 2組多項指標的檢出率情況 結果詳見表1。

表1 2組多項指標的檢出率情況

2.3 2組各項指標的檢出情況 結果詳見表2。

表2 2組各項指標的檢出率情況

在4 502例血清標本MTB-IgG抗體檢測中，5項MTB-IgG抗體的敏感性為69.61%(323/464)，特異性為80.49%(3 250/4 038)。

3 討 論

蛋白芯片作為一種新近發展起來的微量分析技術，以其良好的穩定性、高通量和高度敏感性等優點，在疾病診斷領域受到越來越多的青睞[2-4]。許多研究顯示活動性結核患者的抗LAM抗體陽性率為60%～70%，特異性達到95%；檢測具有很好的重復性。本文研究也支持以上觀點，靈敏度、特異性低于預計值，可能為多因素所致；我院感染科所收治的結核病患者大多由內外科轉診而來，非結核病患者中存在部分漏診可能；過去由于我國非結核分枝桿菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)病發病較少，故檢出抗酸桿菌對診斷結核病有極重要的意義[5]；近年來NTM肺病疫情呈上升趨勢[6]，NTM肺病容易被誤診為肺結核病。以上2點是靈敏度、特異性低于預計值的主要原因。 ESAT-6即早期分泌性低分子量抗原6 000融合蛋白抗原靶、CFP10(培養濾液蛋白10)、38 000融合蛋白、16 000融合蛋白等4項抗體，許多同行研究顯示有很好的特異性，但敏感性太差，本研究也顯示以上4項抗體的陽性率均低于17%；其中CFP10的陽性率僅為4.53%。5種抗體聯合檢測較單個抗體檢測提高了檢測的陽性率。當患者經過1個療程治療2個月后復查時LAM或38 000融合蛋白仍陽性反應，表示治療效果不佳，需要調整治療方案并持續治療；如果呈陰性反應，表示治療達到效果[7]。但本文研究顯示隨著治療的好轉，蛋白芯片結核抗體陽性率并未出現明顯下降，筆者分析MTB-IgG抗體如其他IgG抗體一樣可通過胎盤，在新生兒的抗感染中起重要作用，6個月后才逐漸降解；其半衰期長，為23 d；而治療好轉中，殺滅的MTB仍可繼續刺激機體繼續產生IgG抗體。故筆者認為MTB-IgG抗體陽性對判斷療效無意義，本研究也支持這一理論推斷。綜上所述，蛋白芯片法檢測結核患者血清抗體作為臨床輔助診斷結核病具有一定的價值。對結核病的療效監測無實用價值。本芯片僅能檢測MTB-IgG抗體，若能同時檢測IgM抗體或抗原，對于MTB感染的臨床輔助診斷則更有意義。有關結核抗原的檢測，國內外均有人進行該方面的研究[8-9]。本研究也有待于進一步擴大樣本量及同行的佐證。

參考文獻：

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