色譜-質(zhì)譜聯(lián)用在藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究中的應(yīng)用

易 嘯 張開(kāi)蓮

（瀘州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院 四川 瀘州 646000）

藥物代謝動(dòng)力學(xué)（Phar macokinetic）是定量研究藥物在生物體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄規(guī)律，并運(yùn)用數(shù)學(xué)原理和方法闡述血藥濃度隨時(shí)間變化的規(guī)律的一門(mén)學(xué)科。隨著新型分析技術(shù)的發(fā)展，藥代動(dòng)力學(xué)分析手段日趨多樣化。其中，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用已成為較為先進(jìn)且應(yīng)用廣泛的分析手段，主要包括氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。本文主要介紹目色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在藥物代謝動(dòng)力學(xué)方面的應(yīng)用。

1 高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，它以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測(cè)系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動(dòng)相分離，被離子化后，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開(kāi)，經(jīng)檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖。液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢(shì)的互補(bǔ)，在藥動(dòng)學(xué)研究中到了廣泛的應(yīng)用，主要有以下優(yōu)點(diǎn)：

1.1 提高了對(duì)目標(biāo)物的分析靈敏度和專(zhuān)屬性：以質(zhì)譜儀作為檢測(cè)系統(tǒng)，特定選擇離子作為信號(hào)記錄對(duì)象，使其對(duì)目標(biāo)物的響應(yīng)更高，有更低的檢出限，而特定檢測(cè)離子選擇條件，使得其對(duì)該目標(biāo)物的檢測(cè)專(zhuān)屬性更強(qiáng)，因此在藥動(dòng)學(xué)研究中備受青睞，成為體內(nèi)藥物分析研究中不可或缺的有效工具［1］。洪馨等［2］在國(guó)［作者簡(jiǎn)介：易嘯，男，1986年，學(xué)士學(xué)位，助理工程師，主要從事色譜檢測(cè)方面工作。］內(nèi)首次采用了LC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)血漿中的雙氫青蒿素進(jìn)行了測(cè)定，其日內(nèi)、日間精密度均小于10%，回收率在98.14%～101.19%之間，方法靈敏度高，可用于雙氫青蒿素的藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度的研究。楊波等［3］，采用液質(zhì)連用法，測(cè)定人血漿中的艾芬地爾，其工作曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍為0.25～50g／L，日內(nèi)、日間精密度分別小于2.7%和6.5%，平均回收率為101.3%～105.0%，檢測(cè)限為0.08g／L。該方法靈敏度高，特異性好，可以用于臨床試驗(yàn)的血漿樣品的檢測(cè)。第四軍醫(yī)大學(xué)的喬逸［4］等，利用LC-MS／MS測(cè)定美多拉宗的血藥濃度，其高靈敏度得到很好驗(yàn)證。

1.2 極大提高了分析效率。質(zhì)譜儀對(duì)碎片離子的篩選，使得一部分極性相當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)可以被輕易的區(qū)別開(kāi)來(lái)，使得分析人員在分離極性相似的物質(zhì)的時(shí)候，可以相同色譜條件條件，在分離度不佳的情況下分析出在高效液相色譜儀中無(wú)法祛除干擾的樣品，極大提高了分析效率，同時(shí)，隨著儀器的不斷改進(jìn)，實(shí)現(xiàn)了高度自動(dòng)化，減輕了分析人員的工作量，提高了工作效率。

從上述結(jié)果可以看出，液質(zhì)聯(lián)用，既保留了液相色譜分離好、分析時(shí)間短、被測(cè)組分不受沸點(diǎn)影響，適用范圍廣的特點(diǎn)，更加突出了質(zhì)譜靈敏度高，抗干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn)，將是未來(lái)大有前途的一種分析方法。但由于該法方儀器價(jià)格昂貴，保養(yǎng)費(fèi)用高，使得該法的推廣受到一定的限制，但隨著科技的發(fā)展，液質(zhì)聯(lián)用法，必將成為藥代動(dòng)力學(xué)領(lǐng)域最廣泛采用的分析手段。

2 氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，簡(jiǎn)稱(chēng)氣質(zhì)聯(lián)用法，是將氣相色譜（GC）與質(zhì)譜檢測(cè)器串聯(lián)起來(lái)的分析方法。其原理是將樣品氣化后，以載氣（通常為氦氣）為載體進(jìn)入色譜柱進(jìn)行分離后，進(jìn)入質(zhì)譜儀，由質(zhì)譜儀將被測(cè)組分電離后進(jìn)入特定電場(chǎng)，檢測(cè)其離子碎片。氣質(zhì)聯(lián)用法，有以下優(yōu)點(diǎn)。

2.1 分離效果好，可用于組分復(fù)雜血液樣品的分析：氣質(zhì)聯(lián)用，繼承了氣相色譜分離效果好的特點(diǎn)，更兼顧了質(zhì)譜儀專(zhuān)屬性強(qiáng)的特點(diǎn)，可以在血液中干擾物質(zhì)多的情況下進(jìn)行多組分的分析。金永春［5］等，利用氣質(zhì)聯(lián)用對(duì)人體血液樣本中10種常見(jiàn)毒品進(jìn)行了分離分析，有著良好的效果，氣質(zhì)聯(lián)用對(duì)于復(fù)雜樣品的多組分分析，有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。

2.2 較高的靈敏度及專(zhuān)屬性：早在1985年李 銳［6］等，利用氣質(zhì)聯(lián)用法，對(duì)青蒿酯鈉在體內(nèi)的代謝進(jìn)行研究，對(duì)該藥物用藥提供了實(shí)際指導(dǎo)意義。蔡葵花［7］等，采用氣質(zhì)聯(lián)用法，測(cè)定血中嗎啡的濃度，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)在1.0～60ng／ml之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，日間日內(nèi)RSD＜9.0%，回收率達(dá)96%。并進(jìn)行了8例腫瘤病人口服30 mg嗎啡控釋片、普通片的藥代動(dòng)力學(xué)的研究。為該藥的臨床研究提供了依據(jù)。

2.3 可用于未知物質(zhì)的分析：氣質(zhì)聯(lián)用儀通過(guò)對(duì)電離后的離子碎片的比對(duì)分析，可以進(jìn)入相應(yīng)譜庫(kù)進(jìn)行檢索，按離子碎片組成比較進(jìn)行相似度比較，從而找出與當(dāng)前分析物質(zhì)離子碎片相似的已知物質(zhì)名稱(chēng)，為未知物的鑒定提供參考依據(jù)。當(dāng)前，一些知名大品牌儀器商的譜庫(kù)中，已包含5000多種常見(jiàn)化合物，可以滿(mǎn)足日常分析的需求。

但是，氣質(zhì)聯(lián)用法，也有其先天不足，如分析溫度高，只使用于沸點(diǎn)較低，熱穩(wěn)定性較好的物質(zhì)的分析，對(duì)于不易揮發(fā)，不易氣化的物質(zhì)不適用的缺點(diǎn)，而且，分析儀器價(jià)格較為昂貴，也是其廣泛使用的一大障礙。

綜上，隨著色譜分析技術(shù)的發(fā)展，藥代動(dòng)力學(xué)可采用的方法更加豐富。各種方法互有優(yōu)勢(shì)與缺點(diǎn)，可相互補(bǔ)充。氣相色譜質(zhì)譜法和液相色譜質(zhì)譜法，都有靈敏度高，抗干擾強(qiáng)，專(zhuān)屬性好的優(yōu)點(diǎn)。液質(zhì)聯(lián)用由于不受被測(cè)組分沸點(diǎn)的影響，適用范圍較氣質(zhì)聯(lián)用更廣。氣質(zhì)聯(lián)用，雖然受被測(cè)組分沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性影響，應(yīng)用收到局限，但較液質(zhì)法而言，有分離更好，可以對(duì)未知組分進(jìn)行鑒別的功能。因此，在日常科研活動(dòng)中，可以采取多種手段相互補(bǔ)充的方式進(jìn)行研究，對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)的推進(jìn)，有積極的影響。

［1］ 張廣洲等液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)展［J］，齊魯藥事，2006年，第25卷 第4期：236-237

［2］ 洪馨等，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定人血漿中雙氫青蒿素的含量［J］，分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2005，24（1）：46～48

［3］ 楊波等，液相色譜電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定人血漿中的艾芬地爾［J］，色譜，2008年5月，322-326

［4］ 喬逸等，LC-MS／MS法測(cè)定美托拉宗血藥濃度及其藥物動(dòng)力學(xué)研究［J］，中國(guó)藥師2011年，第14卷第5期：606-609

［5］ 金永春等，人血中10種常見(jiàn)毒品的GC-MS同時(shí)檢測(cè)方法研究［J］，分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2007，26：151-155

［6］ 李銳等，應(yīng)用氣-質(zhì)聯(lián)用等法對(duì)青蒿酯鈉體內(nèi)命運(yùn)的研究［J］，藥學(xué)學(xué)報(bào)，1985，20（7）：485-490

［7］ 蔡葵花等，氣質(zhì)聯(lián)用（GC／MS）研究嗎啡控釋片的藥代動(dòng)力學(xué)［J］，《藥物分析雜志》，1996年02期：89-91