血清可溶性粘附分子ICAM-1、VCAM-1與急性冠脈綜合征及其預(yù)后的關(guān)系

楊群芳，嚴(yán)偉玲

(惠州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，廣東 惠州 516001)

急性冠脈綜合征(acute coronary syndromes，ACS)是由動脈粥樣硬化引起急性心肌缺血的一組臨床綜合征，它是冠心病發(fā)生發(fā)展的一種臨床階段，包括急性心肌梗死和不穩(wěn)定性心絞痛。動脈粥樣硬化是動脈血管壁的慢性炎癥反應(yīng)引起，其生理機制是炎性反應(yīng)導(dǎo)致循環(huán)血液中白細(xì)胞和單核細(xì)胞通過與血管壁特異性受體結(jié)合而粘附于血管壁上，隨后向血管內(nèi)皮遷移造成血管動脈粥樣硬化樣病變[1～4]。細(xì)胞間粘附分子(intercellular adhesion molecule，ICAM-1)和血管細(xì)胞間粘附分子(vascular cell adhesion molecule，VCAM-1)是免疫球蛋白基因超家族的成員，在介導(dǎo)血液中炎性細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附過程中起著非常重要的作用[5～7]。研究表明循環(huán)血液中粘附分子是由于炎性細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合后被清除后進(jìn)入循環(huán)血液中，ICAM-1的釋放量與體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)量成顯著正相關(guān)，在人類主動脈粥樣硬化中血清VCAM-1表達(dá)量與VCAM-1 mRNA也是顯著相關(guān)的[8，9]。因此本研究檢測了ACS患者和健康對照人群循環(huán)血清中VCAM-1與ICAM-1的量，同時隨訪ACS患者心腦血管不良事件的發(fā)生情況，探討循環(huán)血清中VCAM-1與ICAM-1與ACS及其預(yù)后的關(guān)系。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇某醫(yī)院心內(nèi)科2009年6月至2011年12月確診的120例ACS患者作為研究對象，ACS診斷均按照WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。選擇同期在醫(yī)院進(jìn)行健康體檢，年齡和性別與ACS患者匹配的健康人群120例作為對照，排除有冠心病、嚴(yán)重肝腎疾病以及血管疾病的人群。在所有對象簽署知情同意書后，由經(jīng)過培訓(xùn)的調(diào)查員詳細(xì)詢問研究對象和對照人群年齡、吸煙飲酒史、高血壓史、糖尿病史和冠心病家族史，并且測量研究對象身高、體重、腰圍、臀圍等指標(biāo)。抽取研究對象空腹外周血5ml，肝素抗凝備用。

1.2 生化指標(biāo)檢測 研究對象空腹外周血于3000g離心10min，分離上層血清，保存于-80℃?zhèn)溆谩Ｊ褂萌詣由治鰞x(BS2000M，深圳邁瑞公司)檢測研究對象血清中總膽固醇、甘油三酯、血糖和超敏反應(yīng)蛋白(hsCRP)。使用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒(美國R&D公司)檢測研究對象血清中sVCAM-1和sICAM-1，具體操作步驟簡要如下：首先將樣品稀釋液加入已包被抗體的反應(yīng)孔中，在37℃下孵育1h后用雙蒸水洗滌；隨后在每個反應(yīng)孔中加入酶標(biāo)抗體，37℃下孵育0.5h后再用雙蒸水洗滌；最后加入顯色液顯色，在ELSA檢測儀上于450nm處測定各孔的OD值；每個樣品進(jìn)行復(fù)孔檢測，OD值以兩孔OD值得平均值表示；根據(jù)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和相應(yīng)的OD值，制定標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中各指標(biāo)的濃度。

1.3 臨床隨訪 對納入研究的120例ACS患者定期每3個月進(jìn)行1次隨訪，隨訪方式為門診、住院及電話隨訪，隨訪的主要內(nèi)容為心腦血管主要不良事件(MACCE)和發(fā)生事件，MACCE主要包括心功能衰竭、心肌梗死、需要住院治療的不穩(wěn)定心絞痛、腦卒中、腦缺血和死亡。隨訪終止日期到2012年6月30日，共隨訪6～33個月，期間無1例失訪，隨訪率為100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。分類資料采用χ2檢驗，對連續(xù)性資料首先采用正態(tài)性檢驗，所有連續(xù)性資料為正態(tài)分布，使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；兩組樣本間連續(xù)性變量采用t檢驗；采用Cox比例風(fēng)險回歸模型進(jìn)行生存資料的單因素和多因素分析。所有檢驗均為雙側(cè)概率檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 正常對照組與ACS基本資料比較 由表1可知，ACS組患者體重、BMI、腰圍、臀圍和腰臀比顯著高于正常對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；ACS組患者吸煙、飲酒比例顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；ACS組患者收縮壓顯著高于對照組(P<0.05)，而舒張壓差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；ACS組患者高血壓史、糖尿病史和關(guān)系病家族史比例也均高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；兩組人群性別分布、年齡和身高差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組一般情況比較

2.2 ACS組與正常對照組臨床生化指標(biāo)比較 由表2可知，ACS組患者血清中總膽固醇、甘油三酯、血糖、hsCRP、sVCAM-1和sICAM-1濃度均顯著高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)，其中ACS組患者血清hsCRP平均水平為對照組平均水平的10.28倍，ACS組血清sVCAM-1平均水平為對照組平均水平的4.08倍。

表2 兩組臨床生化指標(biāo)比較

2.3 MACCE組和無MACCE組患者一般情況和臨床生化指標(biāo)比較 由表3可知，MACCE組和無MACCE組患者一般情況如年齡、性別、BMI、腰臀比、吸煙、飲酒比例、血壓(收縮壓和舒張壓)，疾病史(高血壓史和糖尿病史)以及冠心病家族史差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；兩組患者臨床生化指標(biāo)總膽固醇、甘油三酯和血糖水平差異也均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但是hsCRP、sVCAM-1和sICM-1水平差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，MACCE組患者血清中hsCRP、sVCAM-1和sICM-1水平顯著高于無MACCE組患者。

表3 MACCE組和無MACCE組患者一般情況和臨床指標(biāo)比較

2.4 ACS患者M(jìn)ACCE危險因素分析 單因素COX回歸模型分析可知，腰臀比、hsCRP、sVCAM-1和sICM-1是ACS患者M(jìn)ACCE的危險因素(P<0.05)；多因素COX回歸模型校正其他因素的影響后發(fā)現(xiàn)，只有hsCRP和sVCAM-1是ACS患者M(jìn)ACCE的獨立危險因素(P<0.05)，ACS患者血清中hsCRP和sVCAM-1水平越高，越容易發(fā)生MACCE，見表4。

表4 急性冠脈綜合癥患者M(jìn)ACCE危險因素分析

3 討 論

ICAM-1和VCAM-1是免疫球蛋白基因超家族的成員，在介導(dǎo)血液中炎性細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附過程中起著非常重要的作用[5～7]。免疫組化學(xué)分析發(fā)現(xiàn)動脈粥樣硬化斑塊中ICAM-1和VCAM-1表達(dá)量是顯著增加的。循環(huán)血液中粘附分子是由于炎性細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合被清除后進(jìn)入循環(huán)血液中，有研究發(fā)現(xiàn)ICAM-1的釋放量與體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)量成顯著正相關(guān)，同時有研究觀察到在人類主動脈粥樣硬化中血清VCAM-1表達(dá)量與VCAM-1 mRNA也是顯著相關(guān)的[8，9]。另外一些前瞻性研究觀察到炎性反應(yīng)進(jìn)程的動脈壁上的ICAM-1和VCAM-1表達(dá)量是增加的，因此猜測循環(huán)血液中這些粘附分子表達(dá)量也會增加，同時循環(huán)血液中粘附分子的量反映了內(nèi)皮細(xì)胞上他們的表達(dá)量。本研究檢測了ACS患者和健康對照人群血清中兩種最重要的粘附分子ICAM-1和VCAM-1，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACS患者血清sVCAM-1和sICAM-1水平顯著高于對照組，同時通過對ACS患者進(jìn)行隨訪，發(fā)現(xiàn)ACS患者中MACCE發(fā)生者血清sVCAM-1和sICAM-1水平也均顯著高于非MACCE者，單因素及多因素Cox回歸模型分析顯示sVCAM-1是ACS患者發(fā)生MACCE的獨立預(yù)測因素。

在心肺疾病的前瞻性研究中，循環(huán)血液中可溶性粘附分子表達(dá)量與疾病及其預(yù)后關(guān)系的數(shù)據(jù)是非常稀少的。ARIC和PHS關(guān)于健康人群的前瞻性試驗中發(fā)現(xiàn)循環(huán)血液中可溶性粘附分子中僅僅只有ICAM-1與冠心病的發(fā)病存在著關(guān)聯(lián)[10-12]。ICAM-1不僅僅只有血管內(nèi)皮細(xì)胞會表達(dá)，同樣許多其他細(xì)胞如造血干細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等都會表達(dá)ICAM-1。另外許多研究表明循環(huán)血液中ICAM-1的表達(dá)量與CRP存在著正相關(guān)，ICAM-1與CRP都能夠預(yù)測冠心病的發(fā)病，循環(huán)血液中ICAM-1的表達(dá)量僅僅反映了血管的促炎狀態(tài)[13，14]。這與我們的研究結(jié)果是一致的，ACS患者循環(huán)血液中ICAM-1表達(dá)量顯著高于對照人群，但是在校正其他相關(guān)因素后ICAM-1與ACS患者M(jìn)ACCE預(yù)后不存在關(guān)聯(lián)。另外，有研究在動物及人類器官模型中證實VCAM-1表達(dá)量在機體促炎等基線狀態(tài)下是無差異的，但是在促動脈粥樣硬化狀態(tài)下顯著增加[5，6]。這同樣與我們的研究結(jié)果一致，ACS患者循環(huán)血液中VCAM-1表達(dá)量顯著高于對照人群，在校正其他相關(guān)因素后VCAM-1與ACS患者M(jìn)ACCE預(yù)后存在關(guān)聯(lián)。這表明循環(huán)血液中VCAM-1表達(dá)量反映了動脈粥樣硬化斑塊的負(fù)荷，從而能作為預(yù)測MACCE事件的預(yù)后指標(biāo)，但是卻不能在健康人群檢測其表達(dá)量來預(yù)測冠心病發(fā)病。

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