乳腺癌患者手術前后血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平變化及臨床意義

陳 坤, 王曉剛, 李狄航, 孔 勇

(廣西壯族自治區桂東人民醫院, 1. 腺體外科; 2. 檢驗科, 廣西 梧州, 543001)

乳腺癌通常發生于乳腺腺上皮組織，是女性常見的惡性腫瘤之一。據世界衛生組織報道，2011年全球范圍內因乳腺癌死亡病例約50萬[1]。在中國，乳腺癌的發病率和死亡率呈逐年增長趨勢，其中發病率城市地區年齡標化率(ASR)為每10萬女性34.3例[2]。臨床上治療乳腺癌以手術為主，但由于乳腺癌癌細胞易脫落游離，隨血液或淋巴液擴散至全身而形成遠端轉移，因此早期診斷對疾病預后尤為重要。近年來研究發現，白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-8(IL-8)等炎癥因子在腫瘤細胞形成和分化中扮演著重要作用[3]。另一方面，腫瘤標志物譬如血管內皮生長因子-A(VEGF-A)的高表達與腫瘤細胞的增殖和轉移關系密切。本研究通過觀察乳腺癌患者手術前后血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平變化，探討其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年12月—2013年12月在本院就診的乳腺癌患者42例為觀察組，均為女性，年齡29～67歲，平均(51.5±10.6)歲。患者均經術前體格、影像學和術后組織病理學檢查確定為乳腺癌，且就診前未接受任何放、化療或內分泌治療。根據中國抗癌協會《乳腺癌診治指南與規范(2011版)》[4]分類：原位癌2例，浸潤性導管癌40例；根據國際抗癌聯盟TNM分期: Ⅰ期10例, Ⅱ期18例, Ⅲ期14例；其中伴淋巴結轉移18例，無轉移24例。選取同期體檢的健康女性30例為對照組，年齡28～65歲，平均(50.9±11.5)歲。2組年齡分布比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：觀察組患者經全面檢查無手術禁忌證，均在氣管插管全麻或高位硬膜外麻下實施改良乳腺癌根治術或者保乳手術，其中保乳手術患者的適應證包括: ① 單發腫瘤且直徑≤3 cm; ② 腫瘤邊緣距乳暈≥2 cm; ③ 腋窩未觸及腫大淋巴結；患者術后均靜脈置管以促進康復。

1.2.2 檢測方法：抽取健康體檢女性和乳腺癌患者術前3 d及術后7 d 時清晨空腹狀態下靜脈血3 mL置于潔凈試管中, 3 000 r/min離心5～10 min, 取上層血清約1 mL, -70 ℃冰凍保存備檢。運用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清中IL-6和IL-8水平, ELISA試劑盒購自上海酶聯生物科技有限公司；采用ELISA 檢測VEGF-A水平，試劑盒購自上海依科賽生物制品有限公司，酶標儀購自美國MD公司。所有操作嚴格按照各自說明書進行，測定樣品OD值并結合濃度曲線計算相應濃度。

1.3 觀察指標

觀察2組患者術前3 d和術后7 d 時血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平。

2 結 果

2.1 觀察組手術結果

42例患者中行改良乳腺癌根治術22例，保乳手術20例，包括象限切除術9例，區段切除術11例。35例行腋窩淋巴結清掃，清掃范圍為Ⅰ、Ⅱ級水平淋巴結。2例乳腺導管內原位癌患者未進行淋巴結清掃。42例患者均成功完成手術治療并接受術后康復治療。

2.2 2組患者手術前后血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平變化

不同分期乳腺癌患者手術前3 d血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平均顯著高于對照組相應指標水平(P<0.01); 手術后7 d, 不同分期乳腺癌患者血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平較手術前3 d均顯著下降(P<0.05或P<0.01)。不同組別間方差分析顯示，不同分期乳腺癌患者血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平差異均具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 對照組和乳腺癌患者手術前后IL-6、IL-8和VEGF-A水平變化

與對照組比較，**P<0.01; 與同期患者術前比較，#P<0.05, ##P<0.01。

3 討 論

乳腺癌形成過程相對復雜，其發生發展受多重因素影響，包括細胞增殖和凋亡紊亂，以及腫瘤周圍微血管形成。有研究發現，腫瘤細胞增殖和凋亡與某些細胞因子關系密切。IL-6是一種多功能細胞因子，主要由淋巴細胞，激活的巨噬細胞和血管內皮細胞產生，能夠調節T淋巴細胞、B淋巴細胞核、單核巨噬細胞的免疫活性，具有廣泛的生物學活性[5]。在抗腫瘤生成方面, IL-6通過干預腫瘤細胞黏附和活動度、腫瘤特異性抗原表達和細胞增殖等，達到影響疾病進展的目的[6]。而IL-8作為一種趨化因子(CXC), 其通過與人CXC趨化因子受體1(CXCR1)和趨化因子受體2(CXCR2)結合來發揮生物學效應。相關研究[7]顯示，受體CXCR1和CXCR2可能存在與某些癌細胞以及新生的血管內皮細胞中，當IL-8與該受體結合后，能促進癌細胞增殖和血管生長。因此，癌癥患者體內IL-6 和IL-8表達升高，不但促進腫瘤細胞的增殖，還加劇了機體免疫功能的抑制，預示著腫瘤進展和轉移。

本研究中，術前乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8水平均較正常體檢者顯著增高，差異具有統計學意義(P<0.01), 而手術治療后，各臨床分期乳腺癌患者的IL-6和IL-8水平均顯著下降(P<0.05或P<0.01)。同時，不同臨床分期患者間比較, IL-6和IL-8水平均具有顯著差異(P<0.05), 證實腫瘤疾病進展和轉移與IL-6和IL-8表達上調之間關系密切。Dethlefsen等[8]通過研究發現, IL-6高表達往往預示著乳腺癌患者預后不良，李明等[9]也發現，乳腺癌患者臨床分期與IL-6和IL-8水平呈正相關。此外，相關研究[10]還顯示, IL-8高表達與乳腺癌轉移能力呈正相關，可以加速臨床進程，對乳腺癌復發患者具有獨立預后意義。

除了免疫抑制，實體瘤發生、發展的另一關鍵步驟是血管和淋巴管新生，而VEGF與其關系密切。VEGF受體包括VEGF-1、VEGF-2和VEGF-3, VEGF-A則主要通過與VEGF-1和VEGF-2受體結合來促進血管新生和增加血管通透性[11-12]。張瑰紅等[13]運用TaqMan realtime反轉錄聚合酶鏈反應分別檢測乳腺癌和乳腺良性病變患者VEGF-A mRNA的表達，發現VEGF-A mRNA在乳腺癌高表達，這與本研究中各個分期乳腺癌患者VEGF-A水平較正常體檢者顯著增高的結論相似。此外，胡帥爾等[14]通過免疫組化的方法觀察乳腺癌組織中VEGF-A與癌細胞增殖、微血管密度和淋巴結轉移的關系，發現增殖細胞抗原表達和微血管密度隨VEGF-A表達增強，腫瘤細胞增殖活性也隨之增強。

[1] DeSantis C, Siegel R, Bandi P, et al. Breast cancer statistics, 2011[J]. CA: a Cancer Journal for Clinicians, 2011, 61(6): 408.

[2] Fan L, Strasser-Weippl K, Li J J, et al. Breast cancer in China[J]. The Lancet Oncology, 2014, 15(7): 279.

[3] Hartman Z C, Poage G M, den Hollander P, et al. Growth of triple-negative breast cancer cells relies upon coordinate autocrine expression of the proinflammatory cytokines IL-6 and IL-8[J]. Cancer Research, 2013, 73(11): 3470.

[4] 邵志敏.《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范》基本要點解讀[J]. 中國實用外科雜志, 2011, 31(10): 915.

[5] Neurath M F, Finotto S. IL-6 signaling in autoimmunity, chronic inflammation and inflammation-associated cancer[J]. Cytokine & Growth Factor Reviews, 2011, 22(2): 83.

[6] Guo Y, Xu F, Lu T J, et al. Interleukin-6 signaling pathway in targeted therapy for cancer[J]. Cancer Treatment Reviews, 2012, 38(7): 904.

[7] Korkaya H, Liu S, Wicha M S. Regulation of cancer stem cells by cytokine networks: attacking cancer's inflammatory roots[J]. Clinical Cancer Research, 2011, 17(19): 6125.

[8] Dethlefsen C, Hijfeldt G, Hojman P. The role of intratumoral and systemic IL-6 in breast cancer[J]. Breast Cancer Research and Treatment, 2013, 138(3): 657.

[9] 李明, 張金業, 林蘭, 等. 乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8測定的臨床價值[J]. 現代檢驗醫學雜志, 2012, 26(6): 134.

[10] 孫曉明, 羅南萍. IL-8在不同腫瘤患者血清中的表達[J]. 放射免疫學雜志, 2010, 23(3): 245.

[11] 段澤星, 謝立群. VEGF在腫瘤生長和血管生成中的作用[J]. 世界華人消化雜志, 2010, 18(27): 2894.

[12] 陳基善, 張雅潔, 胡帥爾, 等. VEGF-A/VEGF-C反義脫氧寡核苷酸對乳腺癌生長及其脈管生成的影響[J]. 癌癥, 2007, 26(9): 972.

[13] 張瑰紅, 曾郁, 楊文濤, 等. 乳腺癌血管內皮生長因子-(A、C、D) mRNA的表達及其預后意義[J]. 中華病理學雜志, 2006, 35(8): 473.

[14] 胡帥爾, 張雅潔, 崔玉梅, 等. VEGF-A和VEGF-C在乳腺癌組織中的表達及其意義[J]. 癌癥, 2005, 24(9): 1076.