抵抗素基因rs34861192多態(tài)性與東北漢族 人群2型糖尿病相關(guān)性研究

李勁然，張桂珍，陳 琰,2，叢樂樂﹟，宋 旸，楊期巍，于 衫，張 琳，杜珍武*

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 中心研究室,吉林 長春130033;2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 內(nèi)分泌科)

糖尿病是危害老年人健康的重要疾病之一。近幾年的研究發(fā)現(xiàn)糖尿病的發(fā)病不僅與生活方式有關(guān)，也與遺傳因素密切相關(guān)。一些與糖尿病發(fā)生易感基因以及位點先后被發(fā)現(xiàn)，這些易感基因的發(fā)現(xiàn)有利于進(jìn)一步闡明生活方式與基因共同作用的糖尿病發(fā)生機制，為糖尿病防治提供理論依據(jù)。

抵抗素作為一種炎性因子來源于單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)[1]，在小鼠的研究認(rèn)為抵抗素與2型糖尿病(T2DM)發(fā)病過程中胰島素抵抗有關(guān)。而在人類是否是誘發(fā)胰島素抵抗，導(dǎo)致2型糖尿病的發(fā)生還存在爭議。近幾年發(fā)現(xiàn)抵抗素基因存在幾個單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點與抵抗素在血清中的含量以及與2型糖尿病有密切的關(guān)系。其中抵抗素基因的rs34861192以及rs1862513兩個位點被認(rèn)為是與日本人群2型糖尿病發(fā)病密切的兩個SNP[2-4]。在我國，抵抗素基因的rs1862513位點與我國2型糖尿病相關(guān)性研究較多，但是否與我國的2型糖尿病發(fā)病有相關(guān)性的研究結(jié)果不一致[5-7]；抵抗素基因的rs34861192位點在我國研究較少，特別是東北地區(qū)的人群。因此本研究擬進(jìn)行抵抗素基因的rs34861192位點與我國東北地區(qū)糖尿病發(fā)病的相關(guān)性以及臨床表型相關(guān)性進(jìn)行研究，以此闡明該位點是否為糖尿病發(fā)病風(fēng)險基因之一。

1 材料與方法

1.1 研究對象

2型糖尿病患者113例均來自吉林大學(xué)第二醫(yī)院內(nèi)分泌科，在獲取血液樣本的同時，跟蹤收集這些研究對象的臨床資料包括年齡、性別、體重指數(shù)、空腹血糖、空腹胰島素、糖化血紅蛋白、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰島素抵抗指數(shù)和胰島素敏感指數(shù)等。正常對照組107例來自吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院體檢中心健康體檢者，明確排除糖尿病。

1.2 血細(xì)胞DNA提取

獲取研究對象外周抗凝靜脈血2 ml，200 g離心10 min，吸取血漿保存。剩余的血細(xì)胞應(yīng)用血液DNA提取試劑盒(北京天恩澤公司，中國)進(jìn)行血細(xì)胞DNA提取。提取的DNA應(yīng)用分光光度計進(jìn)行DNA含量與質(zhì)量的測定。提取DNA置于-80℃保存。

1.3 基因分型

應(yīng)用連接酶檢測反應(yīng)分型方法進(jìn)行113例糖尿病患者與107例健康人的抵抗素基因的rs34861192位點基因分型檢測。該檢測委托上海捷瑞生物技術(shù)有限公司完成。

1.4 統(tǒng)計分析

抵抗素基因的rs34861192位點在人群中的基因型等位基因頻率以及Hardy-Weinberg equilibrium應(yīng)用Shesis軟件(http://analysis.bio-x.cn/SHEsisMain.htm)進(jìn)行分析；臨床相關(guān)指標(biāo)包括體重指數(shù)、空腹血糖、空腹胰島素、糖化血紅蛋白、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰島素抵抗指數(shù)和胰島素敏感指數(shù)等與抵抗素基因的rs34861192位點的相關(guān)性采用獨立T檢驗統(tǒng)計方法應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 抵抗素基因rs34861192多態(tài)性與2型糖尿病相關(guān)性

抵抗素基因rs34861192基因型在兩組人群中分布頻率均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律。抵抗素基因rs34861192多態(tài)性的基因型頻率在T2DM組和正常對照組中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。等位基因頻率的分布在兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

2.2 抵抗素基因rs34861192多態(tài)性與2型糖尿病患者臨床表型相關(guān)性分析

病例組中GG基因型的患者空腹胰島素含量以及胰島素抵抗指數(shù)均明顯高于GA基因型患者(P值均<0.05)，患者體重指數(shù)、空腹血糖、糖化血紅蛋白、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和胰島素敏感指數(shù)在病例組中GG基因型與GA基因型的患者之間沒有差異(P值均>0.05 )結(jié)果見表3。

表1 rs34861192基因型與2型糖尿病相關(guān)性

表2 rs34861192等位基因與2型糖尿病相關(guān)性

表3 rs34861192多態(tài)性與2型糖尿病患者相關(guān)生化指標(biāo)的關(guān)系

*P< 0.05

3 討論

抵抗素基因多態(tài)性位點與T2DM的關(guān)系國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行廣泛研究，其中抵抗素基因-420多態(tài)位點與+299多態(tài)位點研究較多。抵抗素基因rs34861192位點在國外人群中有一定突變率，我國楊冰等對廣東地區(qū)2型糖尿病患者與抵抗素基因該單核苷酸多態(tài)相關(guān)性進(jìn)行初步研究[8]，而東北地區(qū)人群該基因位點多態(tài)性的相關(guān)研究未見文獻(xiàn)報道。

本研究應(yīng)用連接酶檢測反應(yīng)分型方法檢測漢族人群113 例2型糖尿病患者，107例正常對照者rs34861192(G/A)多態(tài)性。分析該基因位點多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性，并分析該基因多態(tài)性與糖尿病患者體重指數(shù)、空腹血糖、空腹胰島素、糖化血紅蛋白、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰島素抵抗指數(shù)和胰島素敏感指數(shù)的相關(guān)性。結(jié)果顯示2型糖尿病組和對照組抵抗素rs34861192位點的基因型分布分別為AA0.9%、AG35.4%、GG63.7%和AA 1.9%、AG35.5%、GG62.6%；等位基因頻率分別為A 18.6%、G 81.4%和A 19.6%、G 80.4%，該位點的基因型分布和等位基因頻率在2型糖尿病組和對照組間分布均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均>0.05)。病例組中GG基因型的患者空腹胰島素含量以及胰島素抵抗指數(shù)均明顯高于GA基因型患者(P值均<0.05)，患者體重指數(shù)、空腹血糖、糖化血紅蛋白、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和胰島素敏感指數(shù)在病例組中GG基因型與GA基因型的患者之間沒有差異(P值均>0.05 )。上述研究結(jié)果表明抵抗素基因rs34861192多態(tài)性與東北漢族人群2型糖尿病無顯著相關(guān)性，但與臨床胰島素抵抗有關(guān)系。我們研究結(jié)果與楊冰等研究結(jié)論不一致，這種不同結(jié)論可能由于(1)各個實驗結(jié)果之間存在差異，需要進(jìn)一步進(jìn)行meta分析，進(jìn)行數(shù)據(jù)整合，(2)同一民族同一疾病發(fā)生的遺傳背景存在一定地域差異性。

作者簡介：李勁然(1991-),男，吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)部2010級本科在讀。

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