李鐵民 丑廣程 劉淑卓 王建國 王淑仙 梁淑新
·論著·
尿紅細胞MCV及RDW離心效應分析
李鐵民 丑廣程 劉淑卓 王建國 王淑仙 梁淑新
目的研究離心條件對尿紅細胞相關參數平均紅細胞體積(MCV)、紅細胞體積分布寬度(RDW)測定值的影響。方法篩選經干化學法及顯微鏡檢出紅細胞之尿液樣本20份,同一樣本分為4管,其中1管加入1 ml尿液不離心,其余3管各加入5 ml尿液分別以500 r/min離心5 min、1 000 r/min離心5 min及1 500 r/min離心5 min進行前處理,離心后樣本棄去上清留取0.2 ml沉渣與未離心管均以Sysmex XS-800i血細胞分析儀按末梢血模式檢測,取得尿液樣本紅細胞計數(RBC)、MCV、RDW等參數測定值。結果隨離心力加大,所有血尿樣本RBC檢測結果呈上升趨勢。當樣本RBC測定值低于某一數值時,MCV測定值為測不出或100.0 fl,RDW則測不出;當樣本RBC測定值高于某一數值時,同一樣本MCV測定值基本一致,RDW測定值基本一致。個別樣本經不同條件離心后尿紅細胞MCV測定值存在不一致現象。結論離心條件的合理選擇是準確測定尿紅細胞MCV及RDW的前提條件。
離心條件;血尿;紅細胞;平均紅細胞體積;紅細胞體積分布寬度
血尿是臨床常見癥狀,依紅細胞形態差異分為腎小球源性血尿和非腎小球源性血尿[1]。準確鑒別血尿來源是明確血尿病因的重要步驟,以往主要以尿紅細胞形態觀察法進行。近年來,以血細胞分析儀檢測尿紅細胞平均體積(mean corpuscular volume,MCV)、尿紅細胞體積分布寬度(red blood cell volume distribution width,RDW)等參數借以鑒別血尿來源的方法逐漸受到重視。此法具有人為因素少、結果較可靠的優勢。在現有資料中,不同實驗室在進行尿紅細胞MCV、RDW檢測前其血尿樣本一般以1 500 r/min離心5 min進行前處理[2-5],但實際工作中血尿樣本離心與否及離心條件不同時對尿紅細胞MCV、RDW測定值存在何種影響尚不確定。因此,有必要對不同離心條件下尿紅細胞相關參數檢測結果一致性進行比較,以確保檢測結果的準確性。本文就不同離心條件對尿紅細胞MCV及RDW檢測值的影響進行探討。全部實驗于2012年10月15~19日完成。
1.1 樣本來源 血尿樣本的確定僅單純依靠干化學法易出現假陽性和假陰性[6,7],因此本研究采用經尿干化學初篩,然后再經人工鏡檢確認的方法確定待檢血尿樣本。所有樣本取自門診及住院患者檢測后剩余尿液樣本,共20份。
1.2 儀器及試劑 迪瑞H-500半自動尿液分析儀及配套干化學試紙條(長春迪瑞實業有限公司);Olympus 雙筒顯微鏡(日本奧林巴斯);Sysmex XS-800i血細胞分析儀及配套試劑(日本希森美康);白洋B320A型離心機(安新縣白洋離心機廠);所有儀器質控合格,工作狀態正常。
1.3 方法
1.3.1 血尿樣本確定:篩選經H-500尿液分析儀檢測隱血陽性之尿液樣本,經2名技術熟練之檢驗師人工鏡檢確認該樣本中存在紅細胞。所有樣本均在1 h內完成離心與檢測。
1.3.2 樣本前處理:同一樣本充分混勻后分為4管,其中一管約1 ml尿液不離心;其余3管各5 ml尿液,分別以500 r/min離心5 min、1 000 r/min離心5 min及1 500 r/min離心5 min進行前處理,離心后棄去上清留取約0.2 ml沉渣待檢。
1.3.3 樣本檢測:將未離心管混勻后直接以Sysmex XS-800i血細胞分析儀按末梢血模式進行檢測;3個離心管中所余0.2 ml沉渣分別進行混勻后以Sysmex XS-800i血細胞分析儀按末梢血模式進行檢測;獲得同一血尿樣本在四種不同離心條件下的紅細胞計數(red blood cell count,RBC)、尿紅細胞MCV、尿紅細胞RDW-SD等數據。
2.1 血尿樣本RBC檢測結果 在本研究中四種離心條件下,隨離心力加大,所有樣本RBC檢測結果呈上升趨勢。見表1。
2.2 血尿樣本MCV檢測結果 當樣本RBC測定值低于某一數值時,MCV測定值為測不出或100.0fl;當樣本RBC測定值高于某一數值時,同一樣本尿紅細胞MCV測定值基本一致。個別樣本不同離心條件下MCV測定值不一致。見表2。
2.3 血尿樣本RDW檢測結果 在本研究中四種離心條件下,當RBC低于某一數值時,出現RDW測不出現象;當RBC高于某一數值時,其測定結果在不同離心條件下基本一致。見表3。

表1 不同離心條件下血尿樣本RBC測定值 1012/L

表2 不同離心條件下尿紅細胞MCV測定值 fl
以血細胞分析儀檢測尿紅細胞相關參數鑒別血尿來源的方法在實際應用中尚存在一些問題需要解決,其中的關鍵問題便是尿紅細胞相關參數檢測結果的準確性[8]。已有研究顯示,離心條件對尿中紅細胞計數及紅細胞形態存在一定影響[4,9]。血尿樣本離心時存在離心的有效性不足和離心的破壞性大的矛盾,解決這一問題需要合理選擇離心條件[10]。本研究發現,不同離心條件對尿紅細胞體積參數檢測結果存在一定影響。其中,離心條件對MCV的影響與RBC存在一定關聯,當RBC低于某一數值時,出現MCV測不出或100.0 fl的特殊結果,考慮可能原因為低于血細胞分析儀對紅細胞MCV的檢出限所致,MCV測不出不會導致血尿來源判斷失誤,而檢測結果為100.0 fl卻可能導致判斷錯誤;當RBC高于某一數值時,MCV測定結果基本一致,隨離心強度加大略呈下降趨勢,但其中兩個樣本出現大于10 fl的結果變異。另外,當RBC較低時出現RDW測不出現象;當RBC高于某一數值時,RDW結果基本一致,隨離心強度加大略呈升高趨勢,說明離心強度越大,紅細胞體積離散程度越大。

表3 不同離心條件下尿紅細胞RDW-SD測定值 fl
MCV和RDW均是血細胞分析儀依據所檢測到的紅細胞體積參數的計算結果。因此,此兩項參數的檢測值直接與血細胞分析儀檢測到的尿紅細胞有效數量相關,也就是說,MCV和RDW的“檢出限”應是以尿紅細胞計數來表示的。
血細胞分析儀專為血液樣本檢測設定了相關檢測參數。在應用于尿液檢測時由于多數血尿樣本中紅細胞濃度遠低于血液樣本,致使血尿樣本因血細胞分析儀檢出限所限而不能準確取得紅細胞體積參數結果。本研究中,在一定強度內進行離心可使血尿樣本中檢出的紅細胞數量達到或超過儀器的檢出限,從而準確測定尿紅細胞相關參數。雖然離心條件對尿紅細胞相關參數存在一定影響,但當紅細胞計數高于某一數值時按照現有血尿來源判斷標準尚未達到出現相反結果的程度。因此,對于鏡下血尿和輕度肉眼血尿樣本進行一定強度的離心再進行檢測是必要的,而且檢測結果必須結合尿中紅細胞計數進行判斷。必要時,可對同一血尿樣本進行至少兩種不同離心條件處理再進行檢測,兩次結果相互對照,防止結果偏倚。當然,為提高尿紅細胞檢出量而采用大強度離心的方法也存在一定局限,易導致紅細胞破壞過多,使相關參數檢測結果不準確。對于不同型號血細胞分析儀,有必要確定尿紅細胞RBC、MCV及RDW的實際檢出限,以免出現因檢出限問題出現測不出或“100 fl”現象,導致血尿來源判斷錯誤。合理選擇離心條件,對準確測定尿紅細胞相關參數至關重要。在擴大樣本數量時及其他型號血細胞分析儀上是否存在與本研究相似情況有待于進一步探討。
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10.3969/j.issn.1002-7386.2014.06.016
071000 河北省保定市,河北大學附屬醫院檢驗科
R 446.12
A
1002-7386(2014)06-0850-03
2013-10-17)