復方冠心舒有效組分最佳配伍研究*

★ 陳俊杰 張馨瑜 諶燕 楊世林 范玫玫*

(1.江西中醫藥大學中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心 江西 南昌 330006;2.中國藥科大學 江蘇 南京 210009)

冠心舒為中草藥復方制劑，處方來源于中國藥典2005年版一部“冠心丹參膠囊”，通過應用現代提取技術、精制純化技術，對處方中丹參、三七、降香三味藥材中有效部位的提取精制后，并通過藥效學篩選，制成的由丹參總酚酸、三七總皂苷、降香總萜三個有效組分組成的制劑，其有效成分的配比影響著藥物的療效。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物 丹參總酚酸、三七總皂苷、降香油(本草天工制藥有限公司提供)。

1.2 實驗動物 清潔級Sprague-Dawley(SD)新生大鼠(1～3d)，雌雄不限(GCI公司提供)。

1.3 主要試劑 L-NAME、胰蛋白酶、Brdu、HEPES(均為Sigma公司產品)；MTT(Ameresco公司產品)；乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(Beckman公司產品)；MDA、SOD、GPx、Catalase測定試劑盒(均為Beckman公司產品)；胎牛血清、MEM培養基(GIBCO BRL公司)；其余化學試劑均為分析純。

1.4 方法 1.4.1 心肌細胞的分離培養 參照Spector等方法，取出生1～3d內SD乳鼠心臟，分離心室組織，經0.1%胰酶消化分離,用含15%胎牛血清的MEM培養基混懸后置CO2培養箱(5%CO2,37℃)培養2 h去除成纖維細胞,將懸浮的心肌細胞過200目不銹鋼網,計算細胞懸液中臺盼藍拒染的活細胞數,達90%以上。再分別按5×105/孔、1×105/孔接種于24孔培養板或96孔培養板內，于CO2培養箱培養，隔天換培養液，前3 d加入終濃度為0.1 mmol/LBrdu抑制纖維細胞生長。培養4 d隨機分組進行實驗。

1.4.2 心肌細胞A/R模型建立 心肌細胞生長接近融合狀態時，對培養心肌細胞換用模擬缺氧缺糖溶液，置于持續95%N2～5%CO2平衡的A/R裝置(37℃)中缺氧孵育3 h后，再換用模擬再灌注溶液于95%O2～5%CO2復氧孵育2 h。……