術前新輔助化療對肺癌患者血清Lipocalin-2和MMP-9表達的影響

馬小剛 楊曉光 趙崢

·論著·

術前新輔助化療對肺癌患者血清Lipocalin-2和MMP-9表達的影響

馬小剛 楊曉光 趙崢

目的觀察術前新輔助化療對肺癌患者血清脂質運載蛋白-2(Lipocalin-2)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達的影響及臨床意義。方法將120例肺癌患者隨機分為對照組和治療組，每組60例。對照組采用單純手術治療，治療組術前給予新輔助化療，觀察兩組臨床療效。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測2組Lipocalin-2、MMP-9水平。結果治療組和對照組總有效率分別為91.7%、80.0%，差異有統計學意義(P<0.05)。2組治療后Lipocalin-2、MMP-9水平均降低，與治療前比較差異有統計學意義(P<0.05)，但治療組二者降低更顯著，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論與單純手術比較，術前新輔助化療可顯著提高臨床治愈率和遠期療效，降低Lipocalin-2、MMP-9水平，對二者水平監測可作為判斷療效和評估預后的可靠指標。

肺癌；Lipocalin-2；MMP-9；新輔助化療

肺癌是我國最常見的惡性腫瘤，致死率居惡性腫瘤之首。脂質運載蛋白-2(Lipocalin-2)是載脂蛋白家族成員之一，在調節脂代謝、滲透壓及抗炎方面發揮重要作用。眾多研究表明，Lipocalin-2與肺癌等惡性腫瘤發生密切相關[1]。基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)因其降解細胞外基質和基膜的作用，參與了腫瘤的侵襲轉移過程[2]。外科手術是治療肺癌的主要手段，但由于癌細胞遠處轉移早，單純手術療效不佳。目前，術前采用新輔助化療的治療方法越來越受到重視。本研究以Lipocalin-2、MMP-9水平為指標分析單純手術治療和術前配合新輔助化療的臨床療效，為療效判斷及預后評價提供科學依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月至2012年12月期間我院收治的、且經病理確診的原發性肺癌患者120例。男84例，女36例；年齡37～78歲，平均年齡56.8歲。病理類型：鱗癌69例，腺癌41例，小細胞癌10例。TNM臨床分期參照2002年UICC制定的標準：Ⅰ+Ⅱ期48例，Ⅲ+Ⅳ期72例。有淋巴結轉移者78例，無淋巴結轉移者42例。120例肺癌患者隨機分為對照組和治療組，每組60例，2組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 治療方法 治療組術前采用順鉑(30 mg/m2)+諾維本(25 mg/m2)的化療方案，3周為1個周期，共2個周期。化療結束后參考B超、胸片或CT結果評價化療效果。若癌灶縮小，患者病情平穩，3周后采取手術治療。療效評價標準分為臨床緩解、部分緩解及無變化，總有效率=(臨床緩解+部分緩解)例數/總例數×100%。

1.3 實驗方法

1.3.1 標本采集：抽取肺癌患者手術前后和健康人清晨空腹靜脈血3 ml,靜置30 min，4℃ 1 000 r/min，離心15 min，取上清凍于-80℃待測。

1.3.2 ELISA法：采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測Lipocalin-2、MMP-9水平，試劑盒由上海生物工程有限公司提供，嚴格按照說明書操作。

2 結果

2.1 2組治療后的臨床療效 治療組和對照組總有效率分別為91.7%、80.0%，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組臨床療效比較 n=60，例(%)

注：與對照組比較，*P<0.05

2.2 2組治療后的遠期療效 2組治療后隨訪5年，治療組無死亡病例，患者1、3、5年生存率分別為86.7%、65.0%、33.3%。對照組手術后死亡2例，患者1、3、5年生存率分別為69.0%、41.4%、20.7%。與對照組比較，治療組遠期生存率明顯提高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組遠期療效比較 例(%)

注：與對照組比較，*P<0.05

2.3 2組治療后Lipocalin-2、MMP-9水平的變化 兩組治療后Lipocalin-2、MMP-9水平均明顯低于治療前，差異有統計學意義(P<0.05)；且治療組Lipocalin-2、MMP-9降低更為顯著，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組Lipocalin-2、MMP-9水平比較

組別Lipocalin-2(ng/ml)治療前治療后1個月MMP-9(pg/ml)治療前治療后1個月治療組120±3551±15*#515±104248±50*#對照組118±3570±18# 512±103327±61#

注：與治療前比較，*P<0.05；與對照組比較，#P<0.05

2.4 2組治療后復發組與未復發組Lipocalin-2、MMP-9水平的變化 治療1年后，治療組和對照組分別有15、20例復發，復發組Lipocalin-2、MMP-9水平均顯著升高，與未復發組比較差異有統計學意義(P<0.05)；對照組復發組二者升高更為顯著，與治療組復發組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4復發組與未復發組Lipocalin-2、MMP-9水平比較

組別Lipocalin-2(ng/ml)未復發復發MMP-9(pg/ml)未復發復發治療組74±1798±25*318±60420±89*對照組79±19126±36*#330±63518±103*#

注：與未復發組比較，*P<0.05；與治療組比較，#P<0.05

3 討論

Lipocalin-2是1993年Kjeldsen等[3]在中性粒細胞中發現和分離的一種脂質運載蛋白。大量研究證實，Lipocalin-2生物學功能廣泛，在肥胖、胰島素抵抗、代謝綜合征、血管病變、炎癥反應等方面發揮關鍵作用，是這些疾病的潛在治療靶點。近年來，國外研究發現Lipocalin-2在腫瘤細胞凋亡、粘附、浸潤轉移過程中扮演重要角色[4]。惡性腫瘤侵襲轉移的關鍵是對細胞外基質中膠原等多種蛋白成分的降解，其中MMP-9是基質金屬蛋白酶家族中分子量最大、最重要的酶。大量研究證實，Lipocalin-2和MMP-9在肺癌患者異常高表達，是肺癌惡化和轉移的重要風險因子，Lipocalin-2可能通過促進MMP-9活化在肺癌侵襲轉移過程中發揮關鍵作用。

由于肺癌早期癥狀隱匿、遠處轉移早，多數患者確診時已發展至晚期。此時手術療效差，易復發，生存率低。20世紀80年代以來，新輔助化療+手術的綜合療法在肺癌治療中取得了更為滿意的效果。術前新輔助化療能夠縮小病灶，抑制并殺滅轉移的微小癌細胞，從而提高手術切除率、治愈率、防止復發轉移。本研究顯示，治療組和對照組總有效率分別為91.7%、80.0%，差異具有統計學意義(P<0.05)，提示術前新輔助化療可明顯提高手術治愈率，療效優于單純手術治療。然而有學者認為新輔助化療與遠期療效無直接聯系。本研究顯示，術前新輔助化療后手術1、3、5年生存率高于單純手術。這與周志明等[5]報道的28.0%的術后5年生存率接近。因此，術前新輔助化療能夠顯著提高手術遠期療效，延長患者生存期。

我們發現與單純手術比較，術前新輔助化療后Lipocalin-2和MMP-9水平降低更顯著，且復發患者二者水平明顯回升，與未復發患者比較差異有統計學意義(P<0.05)。因此，Lipocalin-2和MMP-9水平可作為判斷療效及預后的可靠指標，若術后Lipocalin-2和MMP-9水平回升或持續處于高水平狀態，提示腫瘤復發、轉移和預后差，二者可為評價肺癌發生發展、侵襲轉移及判斷預后提供重要參考價值，并可成為肺癌治療的新靶標。

1 王宇,陳偉,曾婷婷.肺癌患者血清中脂質運載蛋白-2的表達及臨床意義.華西醫學,2013,28:44-46.

2 錢海紅.非小細胞肺癌化療前后血清 VEGF 和 MMP-9水平的對照觀察.河北醫藥,2013,35:496-497.

3 Kjeldsen L,Johnsen AH,Sengelov H,et al.Isolation and primary structure of NGAL,a novel protein associated with human neutrophil gelatinase.J Biol Chem,1993,268:10425-10432.

4 Leng X,Ding T,Lin H,et al.Inhibition of lipocalin 2 impairs breast tumorigenesis and metastasis.Cancer Res,2009,69:8579-8584.

5 周志明,孟憲春，王德舉，等.新輔助化療肺癌患者118例隨訪結果分析.中國煤炭工業醫學雜志,2010,13:248-249.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.10.021

056001 河北省邯鄲市中心醫院胸外科

R 734.2

A

1002-7386(2014)10-1492-02

2013-12-20)