596例新生兒溶血病血型血清學檢測結果分析

1.廣東省東莞市中心血站，廣東 東莞 523930；2.廣東省東莞市東華醫院輸血科,廣東 東莞 523110

596例新生兒溶血病血型血清學檢測結果分析

林棟1胡應明1何子毅1陳寶嬋2

1.廣東省東莞市中心血站，廣東 東莞 523930；2.廣東省東莞市東華醫院輸血科,廣東 東莞 523110

目的分析新生兒溶血病血型血清學檢測結果，探討采集標本時間與新生兒溶血病陽性率的關系。方法選取596例新生兒溶血病標本，進行新生兒溶血病溶血三項檢測、同時對母親標本進行不規則抗體篩查。結果596例新生兒溶血病標本中陽性429例，陽性率71.98%；ABO血型系統的新生兒溶血病409例，占陽性標本的95.33%；Rh血型系統的新生兒溶血病18例，占4.20%；其它不規則抗體2例占0.47%；4天后采集標本檢測新生兒溶血病陽性率較低(P<0.05)。結論本市新生兒溶血病發生主要為ABO血型系統，高達95.33%，新生兒溶血病在患兒出生后4天內采集的標本檢測陽性率較高。

新生兒溶血病；血型血清學

新生兒溶血病(Hemolytic disease of the newborn，HDN)是臨床新生兒科常見的疾病，引發該病的原因很多，包括同種被動免疫、紅細胞膜缺陷、紅細胞酶缺乏及感染等。其中的同種被動免疫(ABO、Rh血型不合)最為重要，它是由于母體內存在與其胎兒紅細胞不配合的IgG性質的抗體，引起的 HDN，診斷它最有力的證據是證實患兒紅細胞被來自孕婦的IgG抗體所致敏。本站輸血研究室對596例疑似 HDN 的送檢標本進行溶血三項(直接抗人球蛋白試驗、血清游離抗體測定、紅細胞抗體放散試驗)血型血清學檢測，現將結果進行回顧性分析，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 選取2011年1月至2013年6月我市各醫院送至本站輸血研究室，有新生兒高膽紅素血癥、疑似新生兒溶血病患兒的標本2～3ml,同時送父母親標本各3ml，均用EDTA抗凝管抗凝，共596例。

1.1.2 儀器 戴安娜孵育器、戴安娜卡式離心機(西班牙戴安娜公司)、KA一2200離心機(日本久保田公司)；HZS-H水浴振蕩器(哈爾濱東聯電子技術開發有限公司)。

1.1.3 試劑 微柱凝膠抗球蛋白卡(西班牙戴安娜公司)；抗A、抗B血型定型試劑、篩選細胞、譜紅細胞 (上海血液生物醫藥有限責任公司)；單克隆抗-D(IgM/ IgG)(Millipore(UK) Ltd)；血型反定型紅細胞(自配)。

1.2 方法

1.2.1 參照方法 ABO/ Rh血型檢測選用鹽水試管法、新生兒直接抗球蛋白試驗、游離抗體試驗、釋放試驗選用微柱凝膠法，所有操作均執行試劑說明書及《全國臨床檢驗操作規程》[1]。

1.2.2 母親和(或)新生兒紅細胞不規則抗體篩選及鑒定，分別在3個微柱孔下標記Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，在反應池中分別加50ul的 1%～2%相應篩檢紅細胞，再分別各加50ul待檢血清，置微柱凝膠專用孵育器孵育37℃，10min；取出后置專用微柱凝膠離心機離心。觀察結果：紅細胞全部沉于微柱底部者為陰性，全部或部分紅細胞滯留于微柱凝膠孔中者為陽性。如紅細胞不規則抗體篩選陽性需進一步進行抗體鑒定，操作方法同上。

1.2.3 HDN的判斷標準 ①母嬰血型不合；②嬰兒符合高膽紅素血癥診斷標準；③ HDN 溶血三項結果：釋放試驗陽性、釋放試驗陽性和直接抗人球蛋白試驗陽性、直接抗人球蛋白試驗陽性和游離抗體試驗陽性、釋放試驗陽性和游離抗體試驗陽性、溶血三項均陽性者都可以證實為 HDN[2]。

1.3 統計學方法 本研究的統計學資料采用SPSS17．0統計學軟件處理，計數資料用百分率表示，用χ2檢驗，(P<0.05)為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 596例HDN送檢標本血型血清學檢測結果 陽性標本429例，陽性率71.98%；其中ABO HDN 409例，占總陽性標本的95.33%；Rh HDN 18例占陽性標本的4.20%；其它不規則抗體2例(IgG型)占0.47%，詳見表1。

表1 HDN陽性標本血型系統及特異性分布

2.2 HDN陽性率與患兒出生后采集標本時間的關系 患兒出生1天內采集標本檢測陽性率與出生1天以上采集標本檢測陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05)，出生2天內采集標本與出生2天以上采集標本檢測陽性率差異無統計學意義(P>0.05)，出生3天內采集標本與3天以上采集標本檢測陽性率差異無統計學意義(P>0.05)，而患兒出生后4天內采集標本檢測陽性率的高于4天以上采集標本檢測陽性率(P<0.05)，而隨著采集標本時間越長陽性率越低，到第6天或6天以上，陽性率只有48.5%，詳見表2。

表2 患兒出生后采集標本時間與陽性率的關系

3 討論

在596例新生兒溶血病標本中檢出陽性的有429例，陽性率達71.98%，比相關一些報道略高，可能與各醫院送檢時患兒的臨床癥狀明顯(新生兒高膽紅素血癥)，血型符合HDN的規律(O型母親生育非O型嬰兒或Rh陰性母親生育Rh陽性嬰兒)有關。HDN 主要發生于ABO血型系統， ABO HDN 有409例，占陽性標本的95.33% ，這與吳遠軍等報道的95.63%[3]和孫六娜報道的95.56%[4]非常接近。而在ABO HDN 中B型患兒219例(51.05%)比A型患兒190例(44.28%)高，這也與蔡于旭等[5]報道的相一致。由表2可以看出HDN在患兒出生4天內采集標本檢測的陽性率較高，隨著出生時間越長而陽性率不斷地下降。筆者認為原因可能與母親的IgG抗體的效價與半衰期有關，如果效價較低，那么采集標本的時間越長，檢測的陽性率越低；其次采集標本時間在4天后，游離抗體已被消耗差不多、致敏紅細胞也被破壞了，游離實驗與放散實驗很難檢測出來，因此產生假陰性。臨床上疑似新生兒溶血病的患兒應在出生后4天內采集標本送檢，采集時間越早越好，為臨床提供早診斷早治療的依據。

ABO HDN 是由于母嬰ABO血型不合，母體的IgG抗A(B)抗體經過胎盤進入胎兒體內血液循破壞胎兒紅細胞所引起,因孕婦在懷不合血型胎兒前就可能有多種原因使自身產生高效價的IgG抗-A(B)抗體，故ABO HDN可發生在第一胎。此病多見于O型孕婦所生A(B)型嬰兒，本次結果調查409例ABO HDN 中孕婦均是O型，這可能與0型個體血液中除含有IgM 抗A(B)抗體外，同時含有較多的IgG抗A(B)抗體有關， O型孕婦血漿IgG抗A(B)抗體效價隨孕婦年齡、孕次的增長而升高，即母嬰血型不合新生兒發生 HDN 的患病率也隨之升高[6],有相關的報導IgG抗A(B)抗體效價≥1∶64 可引起 HDN 并且隨著效價增加而升高[7-8]。Rh HDN是由于母嬰Rh血型不合所致的Rh免疫抗體作用于胎兒紅細胞所致的高膽紅素血癥，此病只能由人類紅細胞作為抗原刺激產生Rh免疫抗體，故極少發生在第一胎，除非以前有輸血史與流產史。有報道Rh血型系統抗體發生的比例大約占到14.6%，以抗-D最為常見，抗-E、抗-C、抗-c抗體引起的Rh HDN也相對多見，也有Rh雙抗體和三抗體的聯合抗體的報道。本次調查Rh血型系統以抗-D最為多見，但總體確診率明顯較低(4.2%)，也發現了由抗-E、抗-Ec、抗-C等抗體引起的HDN。對于Rh血型系統，由于我國漢族Rh(D)陰性頻率為0.2%～0.5%，遠低于白種人的15%[9]，因此Rh血型系統紅細胞抗體引起的HDN相對ABO較少。近幾年來我國實行輸血前鑒定Rh(D)血型，Rh(D)陰性受血者大多數都能接受Rh (D)陰性紅細胞輸注，由抗-D引起的 HDN 有逐步減少的趨勢[3]。

該病主要臨床癥狀是新生兒出現不同程度的貧血、黃疸、肝脾腫大，嚴重者可有水腫、核黃疸后遺癥，甚至因為呼吸衰竭或肺出血而死亡。治療上一般給予腎上腺皮質激素、藍光照射、抗感染退黃等對癥治療，對于膽紅素水平達到換血指征者應進行換血治療。換血療法的目的是預防核黃疸而降低血清膽紅素的濃度，用帶氧能力強的紅細胞代替處于加速破壞的已包被的紅細胞，移出嬰兒體內已包被的紅細胞，因為當這些細胞破壞時會增加膽紅素的量，減少嬰兒體內不相容的抗體含量[10]。換血療法的效果非常顯著，常能迅速改變患兒癥狀，是對高膽紅素血癥新生兒最有效的治療手段。

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗操作規程[M]． 3版．南京：東南大學出版社，2006：256-257．

[2]劉達莊．免疫血液學[M]．上海：上海科學技術出版社，2002：136.

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[5]蔡于旭. 290新生兒溶血病血清學檢測結果分析[J]. 海南醫學，2013.24(2)230-231.

[6]于曉，張濤，羅文娟，等．O型血型孕婦血漿中lgG抗體效價與孕婦年齡、孕期、孕次關系探討[J].都醫學院學報,2013.8(3) 341-343.

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[8]溫潔新, 馬西霞,孫稔俠,等． O型血孕婦血清中IgG抗(A)B抗體效價與ABO新生兒溶 血病的相關分析[J]．廣東醫學，2010,31(11)1430-1431 .

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林棟，主管技師，本科學歷，E-mail:335295257@qq.com

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1007-8517(2014)14-0038-02

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