結腸腺癌患者癌組織中TPX2、PTEN和Ki67 的關系及臨床意義

才保加 祁玉娟 周 為 王曉龍

(青海大學附屬醫院胃腸外科，青海 西寧 810001)

腫瘤發生發展過程中基因和蛋白表達的失調對腫瘤的進展有重要作用。增殖活躍是腫瘤生長和侵襲性強的重要標志〔1〕。TPX2是一種微管相關蛋白，對于有絲分裂紡錘體的穩定有重要作用〔2〕。相關研究認為其高表達可能是腫瘤進展的重要因素〔3〕。PTEN是一種腫瘤抑制基因，定位于人染色體10q23。PTEN編碼的磷酸酶可調節細胞周期和凋亡進程〔4〕。Ki67是與細胞周期密切相關的細胞增殖標志物，G1、S、G2和M期有表達，G0期無表達〔5〕。研究認為Ki67表達的增殖指數與許多腫瘤的浸潤轉移及預后密切相關〔6〕。本文關注結腸腺癌中TPX2、PTEN和Ki67蛋白的表達特征、相關性及臨床意義。

1 材料和方法

1.1材料 選取2010年1月至2013年6月在我院行結腸腺癌根治術的患者122例作為觀察組，納入均符合世界衛生組織(WHO)中關于結腸腺癌的診斷標準。其中男62例，女60例，年齡50～70〔平均(65.7±7.6)〕歲。有淋巴結轉移46例，無淋巴結轉移76例。選擇本組中部分病例切端經病理證實為正常的結腸黏膜組織73例作為對照組，其中男43例，女30例，年齡53～69〔平均(65.1±7.0)〕歲。兩組一般臨床資料無明顯差別(P>0.05)，具有可比性。

1.2TPX2、PTEN和Ki67蛋白的檢測 TPX2、PTEN和Ki67蛋白濃縮液的試劑盒均購自基因科技(上海)有限公司。按不同比例進行稀釋后先行預實驗，并由病理醫師判斷，選取最理想的配比濃度進行正式實驗。TPX2、PTEN和Ki67蛋白的檢測應用免疫組化SP法，均采用手工染色法，DAB染色，操作均由同一病理技師完成，嚴格按說明書進行，嚴格質量控制，減少人為誤差。

1.3結果判定方法 TPX2的陽性部位為細胞核，PTEN的陽性部位為細胞質和(或)細胞核，Ki67的陽性部位為細胞核，均為出現棕黃色顆粒為陽性反應的細胞，選擇腫瘤細胞集中區域的10個400倍視野進行計數后合并計算陽性率。以陽性細胞≥25%為陽性，以<25%為陰性。

1.4統計學處理 采用SAS6.12軟件進行χ2或相關分析。

2 結 果

2.1TPX2、PTEN和Ki67在兩組中表達陽性率的比較 觀察組中TPX2和Ki67表達的陽性率明顯高于對照組，PTEN表達的陽性率明顯低于對照組(P<0.01)。見表1。

2.2觀察組中TPX2、PTEN和Ki67的表達在不同臨床病理特征中的比較 觀察組中TPX2、PTEN和Ki67表達的陽性率與淋巴結轉移、遠處轉移、浸潤深度和臨床分期密切相關。見表2。

表1 兩組TPX2、PTEN和Ki67表達陽性率比較〔n(%)〕

表2 觀察組中TPX2、PTEN和Ki67的陽性表達在不同臨床病理特征中的關系〔n(%)〕

2.3觀察組中TPX2、PTEN和Ki67表達的相關性 觀察組中TPX2和Ki67(r=0.45，P=0.043 2)的表達呈正相關，而PTEN和Ki67(r=-0.48，P=0.030 4)的表達呈負相關。

3 討 論

結腸腺癌病變發展是高增殖的過程，其中伴有異常增生、分化障礙等生物學行為過程。在此過程中，與增殖相關的蛋白常對病變發展有重要影響。TPX2是一個分子量是100 kD的核增殖相關蛋白，其基因定位于人染色體20q11.2，其表達受細胞周期的調控，有研究顯示TPX2只在G1～S交界期中表達，而當細胞分裂完成后就消失〔7〕。也有觀點認為在S期和G2期，人TPX2分布在細胞核，而在分裂期TPX2的表達與有絲分裂的紡錘體分布密切相關，此時TPX2的靶向作用附著于紡錘體的微管，有效地保證了正常的紡錘體的極性〔8，9〕。也有觀點認為TPX2還可能對核因子、增殖細胞核抗原有重要的調控作用〔10，11〕。PTEN對腫瘤的發生具有明顯的抑制作用，PTEN也具有磷酸酯酶活性〔12〕，其不僅能通過脫磷酸化的途徑對細胞內信號進行影響，還可以對腫瘤細胞的增殖和黏附起到明顯的作用〔13〕。也有觀點認為PTEN可以誘導細胞凋亡，有效抑制細胞的失控性增生〔14〕。近來的多項研究發現，在人類多種腫瘤和遺傳性腫瘤易感綜合征疾病中存在PTEN的缺失和突變，在不同腫瘤中PTEN的表達與病人的預后有一定的相關性〔15，16〕。Ki67存在于細胞周期的G1、S、G2和M期，其蛋白表達在細胞核中，其功能與細胞的有絲分裂密切相關〔17〕。

本實驗結果提示TPX2和Ki67高表達、PTEN低表達是促進腫瘤進展的重要因素。Ki67作為標記腫瘤增殖的重要蛋白，高表達時提示腫瘤處于進展期，并具有高增殖的特征。而TPX2作為微管相關蛋白，是微管組裝、紡錘體形成的關鍵蛋白，TPX2高表達使腫瘤的惡性生物學行為和促使細胞周期失調的功能明顯增強，加速腫瘤的進展。PTEN是腫瘤抑制蛋白，其表達丟失是腫瘤進展的重要因素。本實驗結果提示3種蛋白異常表達可以加速腫瘤的進展。由于以上因素均為判斷腫瘤生物學行為、惡性程度及預后的重要指標，因此聯合檢測TPX2、PTEN和KI67的表達可以在一定程度上反映腫瘤的預后。TPX2的作用是通過促進腫瘤細胞的增殖起作用的，PTEN抑癌作用是通過抑制腫瘤細胞增殖發揮其生物學功能的。

總之，結腸腺癌中TPX2和Ki67高表達、PTEN低表達時對病變的發生和進展均具有重要促進作用。對增殖的影響可能是TPX2和PTEN作用的主要方式。后續研究可以關注TPX2、PTEN和Ki67對結腸腺癌的預后判斷的作用，不僅可以為臨床提供有效依據，還可能成為治療的靶點。

4 參考文獻

1Reyal F，Hajage D，Savignoni A，etal.Long-term prognostic performance of Ki67 rate in early stage，pT1-pT2，pN0，invasive breast carcinoma〔J〕.PLoS One，2013;8(3)：e55901.

2劉紅春，劉玉含，李晟磊，等.TPX2和Aurora A在食管鱗中的蛋白表達及其臨床病理意義〔J〕.腫瘤防治研究，2009;36(11)：932-4.

3林冬梅，馬 瑩，肖 汀，等.TPX2在肺鱗狀細胞癌及其癌前病變中的表達和意義〔J〕.中華病理學雜志，2006;35(9)：540-2.

4Mriouah J，Boura C，Gargouri M，etal.PTEN expression is involved in the invasive properties of HNSCC：a key protein to consider in locoregional recurrence〔J〕.Int J Oncol，2014;44(3)：709-16.

5Feng XS，Wang YF，Hao SG，etal.Expression of Das-1，Ki67 and sulfuric proteins in gastric cardia adenocarcinoma and intestinal metaplasia lesions〔J〕.Exp Ther Med，2013;5(6)：1555-8.

6陳 昊，李玉民，何明彥，等.胃不典型增生和癌組織中Ki67和PTEN蛋白的表達及意義〔J〕.中國普外基礎與臨床雜志，2007;14(3)：304-6.

7劉紅春，劉玉含，劉紅彥，等.TPX2在食管鱗癌中mRNA的表達及與臨床病理的關系〔J〕.第四軍醫大學學報，2009;30(20)：2179-81.

8張 賓，趙海波，種道群，等.TPX2蛋白在子宮內膜樣腺癌的表達及其臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學雜志，2011;16(4)：335-6.

9常海平，王敬芝，田 原，等.TPX2在宮頸癌中的表達及意義〔J〕.基礎醫學與臨床，2012;32(5)：561-4.

10李 賓，黃 新，陳 鑫，等.人腦膠質瘤中TPX2的表達及其病理相關性分析〔J〕.中國微侵襲神經外科雜志，2011;16(1)：35-6.

11武 燃，李明賀，左偉文，等.TPX2和Aurora A在口腔鱗癌組織中的表達及其臨床意義〔J〕.吉林大學學報(醫學版)，2013;39(4)：768-70.

12Jang Y，Lu SA，Chen ZP，etal.Genetic polymorphisms of CCND1 and PTEN in progression of esophageal squamous carcinoma〔J〕.Genet Mol Res，2013;12(4)：6685-91.

13Marsh Durban V，Jansen M，Davies EJ，etal.Epithelial-specific loss of pTEN results in colorectal juvenile polyp formation and invasive cancer〔J〕.Am J Pathol，2014;184(1)：86-91.

14Li Y，Cui J，Zhang CH，etal.High-expression of DJ-1 and loss of PTEN associated with tumor metastasis and correlated with poor prognosis of gastric carcinoma〔J〕.Int J Med Sci，2013;10(12)：1689-97.

15紀 勇，張梓威，陳靜瑜，等.非小細胞肺癌組織中PTEN基因與Ki67蛋白的表達及其意義〔J〕.東南大學學報(醫學版)，2013;32(2)：141-5.

16Neto JC，Ikoma MM，Carvalho KC，etal.MGMT and PTEN as potential prognostic markers in breast cancer〔J〕.Exp Mol Pathol，2012;92(1)：20-6.

17Wagner D，Trudel D，van der Kwast T，etal.Randomized clinical trial of vitamin D3 doses on prostatic vitamin D metabolite levels and ki67 labeling in prostate cancer patients〔J〕.J Clin Endocrinol Metab，2013;98(4)：1498-507.