頸淋巴清掃術治療老年舌癌患者的療效及對CD44V6和MMP-9表達的影響

孫志廣

(吉林省人民醫院口腔科，吉林 長春 130021)

舌癌是多呈浸潤生長且易早期發生頸淋巴結轉移的口腔癌，CD44V6和MMP-9在舌癌中是否呈高表達，目前相關文獻報道較少〔1〕。舌癌的治療多以手術為主，一般行原發灶切除及頸部淋巴結清掃術。最新研究顯示，CD44V6和MMP-9在乳腺、肺、肝、前列腺、結腸等全身多種惡性腫瘤中均有表達并與腫瘤的浸潤和轉移密切相關〔2〕。本文擬分析淋巴清掃術治療舌癌的療效，以及CD44V6和MMP-9的表達。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集2007年12月至2013年12月我院口腔科手術切除且資料相對完整的舌癌組織(TSCC)石蠟包埋組織120例及30例癌旁正常組織，全部病例均經病理確診為舌鱗狀細胞癌，所有病例采取手術治療，術前均未做過放療或化療。120例舌癌患者，同時伴有頸淋巴結轉移42例，無頸淋巴結轉移78例。男64例，女56例；平均(53.3±9.98)歲。組織學分級：高分化70例，中分化34例，低分化16例。

1.2手術方法 采用骨上頸淋巴清掃術，取患者頜下弧形切口，距下頜骨下緣 1.5～2 cm，自頦部正中下方起，止于下頜角下、胸鎖乳突肌前緣，約6～7 cm。 逐步將皮膚、皮下組織及頸闊肌切開，然后由頸深筋膜淺層的淺面鈍性向上分離，至下頜骨下緣。在嚼肌附麗前緣、下頜骨下緣處覓出并游離頜外動脈和面前靜脈、牢靠結扎、剪斷〔3〕。注意淺面有面神經下頜緣支橫過，因此應松解后向上推移，對其進行保護。再沿下頜骨下緣下2 cm處平面切開頸深筋膜淺層，解剖頜下區和頦下區的周圍組織，顯露術側二腹肌后腹、健側二腹肌前腹、舌骨體部及術野底部的下頜舌骨肌和舌骨舌肌，此時，整個舌骨上區邊界已完全處于游離狀態。然后，通過自上而下、由后到前的方式，在下頜骨內側將頜下腺及頜下淋巴結組織解剖出來，同時向前翻轉牽拉，將頜外動脈近心端顯露出來，然后進行雙重結扎后予以切斷。將莖突下頜的韌帶切斷，在頜下腺后端將腮腺尾葉進行分離，應注意當平下頜角高度橫行切斷后應將其縫扎在二腹肌后腹上，若此時遇到頸外靜脈，則應結扎切斷，即可見到舌骨舌肌表面的舌下神經，當然，值得注意的是其上方的由后上向前下橫行的舌神經與頜下腺導管相互勾繞，所以都必須給予穩妥的保護措施。將舌神經到頜下腺間的分泌支予以結扎切斷，應盡可能地靠近導管口端。然后繼續向前到健側二腹肌前腹處，將舌骨上區的頜下腺、脂肪、淋巴結組織及蜂窩組織整塊切除。最后對傷口進行沖洗，然后止血，并分層對頸闊肌、皮下組織及皮膚進行縫合，置半管引流，傷口需在敷料覆蓋后再加壓包扎。

1.3試劑及染色方法 由北京中杉生物技術有限公司生產的CD44V6和MMP-9單克隆抗體，PV9000兩步法免疫組織化學試劑盒，DAB顯色試劑盒，根據說明書進行染色。以PBS代替一抗作陰性對照，用已知食管癌組織陽性切片作陽性對照。

1.4判斷標準 CD44V6陽性染色主要在細胞膜、部分有棕黃色或棕褐色細胞質顆粒沉著，MMP-9陽性染色主要在細胞質、部分有棕黃色或棕褐色細胞質顆粒沉著〔6〕。隨機選擇5個高倍視野，計數1 000個腫瘤細胞中的陽性細胞數，計算相應的占腫瘤細胞的百分比。陽性細胞數<10%為陰性(-)，陽性細胞數10%～25%為弱陽性(+)，陽性細胞數26%～50%為陽性()，陽性細胞數>51%為強陽性()。

1.5統計學方法 采用SPSS11.5軟件進行χ2檢驗，相關性分析采用Kappa一致性相關檢驗。

2 結 果

2.1TSCC和癌旁組織中CD44V6和MMP-9的臨床表達 CD44V6在癌旁組織中陽性表達28例(93%)，在TSCC中陽性表達104例(87%)；MMP-9在癌旁組織中陽性表達6例(20%)，在TSCC中陽性表達94例(78%)。見圖1。

圖1 CD44V6、MMP-9在TSCC中陽性表達(DAB，×100)

2.2TSCC原發灶與淋巴結轉移灶中CD44V6和MMP-9的表達 TSCC原發灶中CD44V6陽性104例(87%)、MMP-9陽性94例(78%),淋巴結轉移灶中CD44V6陽性34例(81%)、MMP-9陽性32例(76%)。

2.3TSCC中CD44V6和MMP-9表達的相關性 TSCC中CD44V6、MMP-9雙陽性92例，雙陰性14例，僅CD44V6陽性12例，僅MMP-9陽性2例，相關分析顯示Kappa=0.605 7，P<0.01。

3 討 論

就舌癌而言，傳統的舌骨上頸淋巴清掃術手術切除范圍有一定局限性，無法徹底切除頸部轉移病變，尤其一些微小轉移，隱匿性轉移組織無法得到有效清除，易導致復發。而肩胛舌骨上頸淋巴清掃術清除范圍廣泛，幾乎包括舌癌頸部淋巴結轉移涉及的全部路徑〔4〕。目前，CD44V6與腫瘤發生、發展、轉移、分化等生物學行為的關系仍意見不一，甚至對同種腫瘤的研究亦有不同結論〔5〕。這可能是由于各研究者采用的免疫組化技術和第一抗體不同，并與評價的標準及方法不一致導致的〔6〕。本研究結果顯示CD44V6與組織學分級無明顯相關，但CD44V6和舌癌頸淋巴結轉移有密切相關，因此，舌癌中CD44V6的表達水平可作為評價舌癌轉移的生物學指標。MMP-9不但能作為口腔鱗癌的腫瘤標志物，亦可作為口腔鱗癌浸潤、轉移的重要評價指標〔7〕。本研究表明MMP-9的陽性表達與舌癌的惡性程度及轉移呈正相關，腫瘤細胞及腫瘤細胞的間質組織都可以表達MMP-9，而且腫瘤細胞呈高表達；另外，呈陽性表達的腫瘤細胞大多呈片狀、灶狀或彌散狀分布，并且大多位于癌巢邊緣，這種現象說明具有轉移潛能的腫瘤細胞大多分布在腫瘤的病灶周邊，促使腫瘤細胞向周圍浸潤或轉移更加容易〔8〕。

4 參考文獻

1張 波，李 麗.舌癌頸淋巴清掃術不同術式的臨床療效〔J〕.中國老年學雜志，2012；32(21)：4822-3.

2常 瑋，王斌全.RECK和MMP-9在喉鱗癌中的表達及臨床意義〔J〕.醫學研究雜志，2010； 39(4)：73-7.

3張天彪，許 丹，關一夫.RECK和MMP-2在口腔鱗癌中的表達及其與侵襲轉移關系研究〔J〕.中國實用口腔雜志，2010；3(5):292-4.

4李晟磊，趙秋民，劉宗文，等.食管鱗癌中RECK和MMP-9蛋白表達的相關性及臨床病理意義〔J〕.世界華人消化雜志，2007；15(10)：1082-6.

5Yuen AP，Ho CM，Chow TL.舌癌 CNO 患者選擇性頸淋巴清掃和頸部觀察的前瞻性隨機研究〔J〕.中國口腔頜面外科雜志，2009;7(4):369.

6陳 坤，習利軍，姜 倩，等.CD44V6、MMP-9在舌癌中的表達及其意義〔J〕.口腔醫學研究，2010；26(5)：740-3.

7王 茜，潘朝斌，王建廣，等.CD44V3及CD44V6在舌鱗癌組織中的表達及意義〔J〕.中華口腔醫學研究雜志(電子版)，2009；3(1)：29-35.

8Cruz MC，Pereira AL，Lopes FF，etal.Immunohistochemical expression of E-cadherin and CD44V6 in squamous cell carcinomas of the lower lip and tongue〔J〕.Braz Dent J，2009；20(1)：64-9.