老年乳腺浸潤性癌組織中ACK1、 表皮生長因子受體和PTEN的表達及意義

烏力吉白乙

(內蒙古民族大學醫學院，內蒙古 通遼 208000)

腫瘤發生發展過程中涉及多種蛋白和基因的表達失調，尤其是癌基因的激活和抑癌基因的失活。ACK1蛋白(ACK1)具有癌基因的作用，其主要分布在胞質，是非受體的酪氨酸激酶，具有催化底物蛋白的功能〔1〕。近來研究顯示其還具有調節細胞增殖、黏附和重組細胞骨架的作用〔2〕。表皮生長因子受體(EGFR)屬酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族，是多種腫瘤DNA合成和細胞生長的催化劑，其過度表達常引起細胞的惡性轉化及浸潤〔3〕。PTEN 蛋白(PTEN)具有抑癌作用，可參與化學通路的傳導，把信號傳導給細胞，使細胞停止分裂并進入凋亡階段，這種功能可以阻止不受控制的細胞生長進而對腫瘤的形成起到明顯抑制作用〔4〕。本實驗擬觀察老年乳腺浸潤性癌患者癌組織中ACK1、EGFR和PTEN的表達情況及其臨床價值。

1 材料與方法

1.1材料 收集科爾沁區第一人民醫院2011年12月至2013年4月行乳腺浸潤性癌根治手術的老年女性患者作為觀察組，共95例，標本于術后15 min內進行取材后置于-80℃冰箱中凍存。年齡60～72(平均65.2)歲。同時選取其他象限并經病理證實為正常乳腺組織的67例新鮮組織作為對照組，取材及保存方法同上，年齡60～68(平均65.4)歲。兩組一般資料無顯著差別(P>0.05)。

1.2ACK1、EGFR和PTEN蛋白檢測 ACK1、EGFR和PTEN抗體均購自武漢博士德生物工程有限公司。半定量表達均應用流式細胞術進行檢測。取出凍存標本，置于75%酒精中24～36 h后，制備單細胞懸液。取1 ml，嚴格按實驗步驟滴加一抗和熒光二抗后上機檢測，應用美國BC公司的流式細胞儀進行檢測，做好質量控制。

1.3流式細胞術檢測ACK1、EGFR和PTEN蛋白的判斷標準 以熒光指數(FI)表示半定量表達。

1.4統計學方法 應用SAS6.12軟件進行t檢驗、線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組ACK1、EGFR和PTEN蛋白表達的比較 兩組ACK1、EGFR和PTEN的表達量差別顯著(P<0.05)，見表1。

2.2觀察組中ACK1、EGFR和PTEN的表達與乳腺癌臨床病理特征的關系 觀察組中ACK1、EGFR和PTEN的表達與腫瘤的淋巴結轉移、脈管浸潤、腫瘤最大徑、雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和Ki67的表達密切相關。見表2。

表1 兩組ACK1、EGFR及PTEN蛋白的比較

表2 觀察組中ACK1、EGFR和PTEN的表達與乳腺癌臨床病理特征的關系

2.3觀察組中ACK1、EGFR和PTEN表達的相關性 觀察組中ACK1和EGFR(r=0.47，P=0.0243)的表達具有正相關性，而ACK1和PTEN(r=-0.45，P=0.0315)、EGFR和PTEN(r=-0.42，P=0.0237)的表達呈負相關性。

3 討 論

乳腺浸潤性癌在老年患者發病過程中基因和蛋白表達常出現明顯異常。ACK1是一種酪氨酸激酶，可以結合Cdc42Hs的GTP位點，以抑制其GTP酶活性，與酪氨酸磷酸化信號轉導通路有直接關系〔5〕。近來人們研究認為ACK1可以起到類似癌基因的作用，并在鱗癌等不同腫瘤中表達升高〔2，6〕。EGFR在腫瘤中的表達目前可用于判斷增殖及預后，主要與EGFR及其信號傳導通路對細胞增殖及調控的作用相關。EGFR激活后可以引起Ras-MAPK、PI3K-Akt及STAT等通路的活化，使細胞核外的信號傳導到細胞核內，調控細胞的生長及分裂。如果EGFR表達持續增加，使細胞的增殖能力增加，對腫瘤細胞凋亡的抑制作用減弱，此時細胞增殖活躍〔7〕。PTEN是一種抑癌基因，由多功能磷酸酶編碼，具有磷酸酯酶的活性。也有觀點認為PTEN的C端尾部具有富含絲/蘇氨酸殘基的序列和一個相關的結合區域，如果這個區域出現明顯的突變則可以逆轉抑癌基因，進而影響突變體的穩定性和磷酸酯酶的活性，分子結構也將發生明顯的變化〔8〕。

本實驗提示ACK1、EGFR和PTEN異常表達是促進腫瘤發生和進展的重要因素之一。3種蛋白可能與ER、PR功能及細胞增殖有關，三者具有協同作用。ACK1和EGFR作為癌基因，而PTEN作為抑癌基因在體內是一種動態平衡，維系這種平衡失調后，癌細胞活化，腫瘤細胞進展加速。PTEN可以直接使PIP3的D3位點去磷酸化，有效地降解PKB/AKT的磷酸化水平，拮抗下游通路的轉導，抑制血管活性因子的分泌而抑制血管的新生。也有研究認為PTEN表達丟失或下降可以增加VEGF的表達，促進腫瘤中微血管內皮細胞的新生〔9，10〕。而ACK1和EGFR在作用過程中也能增加血管的新生，也與VEGF的功能也有同向作用，因此ACK1、EGFR和PTEN協同作用機制可能與VEGF或血管生成相關。但是具體調節通路尚需要更多實驗證實。還有觀點顯示EGFR高表達可能與調節黏附作用有關，即EGFR表達在內皮細胞時，通過影響細胞支架結構和整合素介導的信號傳遞，參與腫瘤的進展〔11〕。

4 參考文獻

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10Alyasiri NS，Mehdi SJ，Alam MS，etal.PTEN-mediated AKT activation contributes to the reduced apoptosis among Indian oral squamous cell carcinoma patients〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol，2012;138(1)：103-9.

11Maity A，Pore N，Lee J，etal.Epidermal growth factor receptor transcriptionally up-regulates vascular endothelial growth factor expression in human glioblastoma cells via a pathway involving phosphatidylinositol 3′-kinase and distinct from that induced by hypoxia〔J〕.Cancer Res，2000;60(20)：5879-86.