熱休克蛋白70在膠質細胞瘤中的表達以及與腫瘤病理分級的相關性

王曉東 陳善成 楊俊保

(暨南大學附屬第一醫院神經外科，廣東 廣州 510000)

熱休克蛋白70(HSP70)普遍存在于生物細胞內，在細胞的生長發育、分化以及基因轉錄等方面均起著核心作用〔1〕。實驗研究證實〔2〕，HSP70的主要生物學功能在于應激狀態下保護細胞生命活動必要的蛋白質，維持細胞的生存。此外，HSP70臨床上還可以作為腫瘤標志物，在腫瘤免疫中發揮重要的作用〔3〕。膠質細胞瘤屬于中樞神經系統較為多見的原發性腫瘤，由于其復發率較高，預后往往不佳。筆者通過檢測膠質細胞瘤組織中HSP70的表達，試圖闡述HSP70與膠質細胞瘤病理分級間的相關性，同時分析腫瘤復發對HSP70表達的影響。

1 材料與方法

1.1一般材料 納入膠質細胞瘤組織樣本50例，均為2010年1月至2013年1月于我院進行膠質細胞瘤切除手術患者的存檔標本。年齡62～84〔平均(66.2±11.2)〕歲，男33例，女17例。根據世界衛生組織(WHO)2000年頒布的神經系統腫瘤分類和分級標準，Ⅰ級9例、Ⅱ級12例、Ⅲ級13例、Ⅳ級16例。局部復發患者21例，無復發患者29例。

1.2主要試劑 鼠抗人HSP70單抗，購于美國Santa Cruz公司；SP免疫組化試劑盒，購于北京中杉金橋生物技術有限公司；3%過氧化氫；DAB等。

1.3免疫組化檢測 采用免疫組化SP法進行HSP70蛋白的測定，操作按試劑盒說明書進行。免疫組化檢測分別設立陽性以及陰性對照組。以細胞核或細胞質內出現棕黃色顆粒作為陽性細胞，將陽性細胞比例與顯色強度相結合判斷，觀察每張切片，以高倍視野(40×)計數1 000個細胞。(-)：陽性細胞<5%；(+)：陽性細胞5%～50%；()陽性細胞>50%。

2 結 果

2.1HSP70在膠質細胞瘤各病理分級中的陽性表達比較 Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級、Ⅳ級膠質細胞瘤中HSP70陽性表達率分別為33.33%、66.67%、84.62%、100.00%。χ2檢驗顯示各級膠質瘤間HSP70陽性表達有顯著差異(χ2=8.699，P<0.05),見表1。

2.2HSP70在膠質細胞瘤局部復發組與無復發組中的陽性表達比較 HSP70在膠質細胞瘤局部復發組與無復發組中的陽性率分別為87.50%、55.56%，無差異(χ2=5.520，P>0.05)，見表2。

表1 HSP70在膠質細胞瘤各病理分級中的陽性表達比較(n)

2.3HSP70對膠質細胞瘤局部復發時間及1年死亡率的影響 結果表明，HSP70陽性患者復發時間〔(5.13±0.97)個月〕明顯早于HSP70陰性患者〔(8.34±1.04)個月〕(t=5.264，P<0.05)。1年死亡率方面，HSP70陽性患者為65.79%，HSP70陰性患者為16.67%，組間差異顯著(χ2=5.115，P<0.05)。

表2 HSP70在膠質細胞瘤局部復發組與無復發組中的陽性表達比較(n)

3 討 論

膠質細胞瘤是臨床常見的顱內腫瘤類型，約占顱內腫瘤的45%〔4〕。膠質細胞瘤主要侵襲中樞神經系統白質與灰質的膠質細胞，嚴重危害人類生命〔5〕。目前的研究表明〔6，7〕，膠質細胞瘤具有無限增殖與抗細胞凋亡兩個主要特點，因此在腫瘤的發生、發展過程中，腫瘤細胞密度逐漸上升，核分裂象增加，細胞異型性改變顯著。膠質細胞瘤分子生物學改變涉及多種癌基因的異常激活、擴增以及高表達等，抑癌基因的突變、失活以及細胞周期基因與凋亡相關基因的異常表達〔8，9〕。

HSP70蛋白家族屬于HSPs中最保守及最主要的一類蛋白，目前的實驗表明〔10〕，HSP70擁有分子伴侶樣的作用。實驗研究證明〔11〕，HSP70可以通過抑制多種凋亡通路起到抑制細胞凋亡的效果。因此，HSP70對于細胞的生長以及增殖起到顯著的保護作用。本研究發現隨著腫瘤分級的逐步提升，腫瘤惡性化程度的逐步越高，HSP70的陽性表達亦出現逐步升高的趨勢，說明HSP70與膠質細胞瘤的分化程度存在較大的關系〔12〕。因此，檢測HSP70可以預測膠質細胞瘤患者惡性化程度與預后。有研究表明，HSP70陽性表達，不但能夠介導錯配蛋白的降解，協調腫瘤細胞蛋白的快速代謝平衡，還能介導癌基因及抑癌基因產物的構像成熟、跨膜轉運，通過影響細胞增殖過程參與細胞周期、細胞間信號轉導，使腫瘤細胞得以無限增殖〔13〕。此外，膠質細胞瘤的臨床復發率較高，本研究發現局部復發組HSP70陽性率較高，而且HSP70陽性組患者復發時間明顯早于HSP70陰性組。說明檢測HSP70可以作為早期預測腫瘤有無復發的一個重要指標，而且HSP70蛋白對于患者的預后，特別是1年期死亡率，有著較高的價值。

4 參考文獻

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