老年子宮內膜樣腺癌患者癌組織中Cirpto-1、Survivin和基質金屬蛋白酶-14表達及意義

魏琳琳 王 蕊 關淑梅

(遼寧醫學院附屬第一醫院婦產科，遼寧 錦州 121001)

子宮內膜樣腺癌病變進展中出現多種蛋白表達的異常。Cirpto-1作為細胞膜表達的受體可以接受多種信號刺激，是重要的癌基因生長因子，參與癌細胞增殖和轉移〔1〕。Survivin是凋亡抑制基因，具有抑制腫瘤細胞凋亡和調節細胞周期的雙重功能，與腫瘤的發生和發展密切相關〔2,3 〕?；|金屬蛋白酶(MMP)-14是MMPs家族的重要成員，不僅可以降解細胞外基質(ECM)，還可以接受多種蛋白的調節作用，使基底膜的溶解作用增強，加速腫瘤細胞播散〔4〕。本實驗探討老年子宮內膜樣腺癌患者術后組織中Cirpto-1、Survivin和MMP-14蛋白的表達及在病變進展中的價值。

1 資料和方法

1.1臨床資料 2011年3月至2013年3月我院行子宮內膜樣腺癌根治術老年患者113例為觀察組，年齡60～82歲，中位年齡69歲。有淋巴結轉移42例，無淋巴結轉移71例；腫瘤最大徑0.4～9 cm。選擇70例子宮肌瘤或子宮脫垂后經病理證實為正常的老年人子宮內膜組織作為對照組，年齡60～80歲，中位年齡68歲。兩組一般臨床資料無顯著差別(P<0.05)。

1.2Cirpto-1、Survivin和MMP-14的檢測方法及判斷標準 Cirpto-1、Survivin和MMP-14蛋白的試劑盒均購自武漢博士德生物技術公司，應用免疫組化SP法進行檢測，DAB染色，均由病理科技師操作完成，嚴格按說明書進行，嚴格質量控制，努力減少誤差。Cirpto-1、Survivin和MMP-14的陽性表達部位是細胞質，以出現棕黃色顆粒為陽性細胞，選擇陽性細胞較為集中的區域(熱點區)，每個病例選取5個高倍視野(400倍)，計數陽性細胞的總數和高倍鏡下總細胞數，以陽性率≥50%定為陽性，以陽性率<50%定為陰性。

1.3統計學方法 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組中Cirpto-1、Survivin和MMP-14陽性表達率的比較 觀察組Cirpto-1、Survivin和MMP-14陽性表達率明顯高于對照組(P<0.000 1)，見表1。

2.2觀察組Cirpto-1、Survivin和MMP-14的表達與臨床病理特征的關系 觀察組Cirpto-1、Survivin和MMP-14陽性表達率與腫瘤的浸潤深度、淋巴結轉移、腫瘤最大徑、有無癌栓及Ki67指數密切相關。見表2。

2.3觀察組Cirpto-1、Survivin和MMP-14表達相關性 觀察組Cirpto-1和Survivin(r=0.47，P=0.045 3)、Cirpto-1和MMP-14(r=0.48，P=0.035 4)、Survivin和MMP-14(r=0.44，P=0.029 9)表達均呈正相關。

表1 兩組Cirpto-1、Survivin和MMP-14陽性表達率比較〔n(%)〕

表2 觀察組中Cirpto-1、Survivin和MMP-14陽性表達與臨床病理特征的關系〔n(%)〕

3 討 論

老年人伴有退性子宮內膜萎縮，因此，子宮內膜樣腺癌惡變過程中主要是蛋白或基因調節的。目前評估老年子宮內膜樣腺癌的高危因素有脈管侵犯、淋巴結轉移、是否伴有瘤栓等。研究顯示機體基因和蛋白水平的變化可以對生物學行為有重要影響，目前Cirpto-1 在腫瘤中的表達逐漸引起關注〔5，6〕。

Cirpto-1是表皮生長因子(EGF)家族成員，是一個糖基磷脂酰基醇錨定膜蛋白，具有調節細胞分化和早期胚胎發育的功能〔7〕。Cirpto-1基因最先由畸胎癌cDNA文庫中被發現并分離，其定位于染色體3p21.3，編碼由188個氨基酸組成的糖蛋白，其cDNA長約2.2 kb，內含約564 bp長的一個開放讀碼框架(ORF)。其基因由5個內含子和長約4.8 kb的6個外顯子組成，4號外顯子上含有保守的EGF樣序列〔8〕。Cirpto-1蛋白的相對分子量為36×103，其結構包含氨基末端的信號肽，一個可修飾的EGF樣結構域，一個富含半胱氨酸的CFC結構域及一個羧基疏水末端〔9〕。目前多項研究顯示Cirpto-1具有癌基因的特征，并對癌癥的發生及進展起重要作用〔10〕。徐朝霞等〔11〕通過對食管鱗癌中Cirpto-1蛋白和mRNA的表達進行檢測，發現Cirpto-1在腫瘤中高表達，并認為Cirpto-1能在體外誘導正常上皮細胞的轉化、促進上皮-間質轉換，刺激血管生成，高效促進腫瘤的發生。Survivin是凋亡抑制因子，不僅刺激細胞凋亡，還參與細胞周期的調控和新生血管的形成，也有研究顯示Survivin在發揮作用的過程中可以抑制多種信號途徑，如caspase、P53、Fas等誘導的細胞凋亡〔12,13〕。Survivin在調節細胞有絲分裂中也有一定作用，如影響微管的聚合及胞質的分化過程〔14〕。還有觀點認為Survivin在癌細胞過度表達時可以促使其跳過細胞周期的G2/M期檢測點，完成異常有絲分裂而促進癌細胞增殖，引起腫瘤逃避凋亡〔15〕。MMP-14對ECM和基底膜可以形成有效的降解，使細胞的移動性增強，易于在遠隔器官形成種植灶〔16〕。也有觀點認為MMP-14可以啟動細胞表達多個蛋白級聯反應，如激活細胞膜上的MMP-2引發連鎖性的ECM溶解〔17,18〕。

本實驗結果提示Cirpto-1、Survivin和MMP-14三種蛋白異常表達在腫瘤惡變中起積極的促進作用，均可以起癌基因的作用。本研究提示Cirpto-1高表達時促進腫瘤的侵襲、浸潤和脈管播散。三者對腫瘤的促進作用可能是通過促進細胞增殖實現的。Cirpto-1在發揮促進腫瘤進展的作用過程中可能與對Survivin和MMP-14的調節有關。如果Cirpto-1高表達，引起細胞增殖狀態活躍，細胞生長加速，侵襲能力增強，同時Cirpto-1高表達可以誘導Survivin抑制凋亡的作用，同時可以活化MMP-14的表達，引起ECM高效降解，使腫瘤轉移的屏障消失，促進腫瘤轉移和播散。也有觀點認為Cirpto-1高表達與腫瘤的侵襲和轉移相關，并認為Cirpto-1在上皮、間質轉化中的調節作用中發揮作用〔5〕，多項研究認為Cirpto-1可能通過轉化生長因子(TGF)、Wnt信號轉導系統發揮作用參與腫瘤的生物學進展〔19〕。本實驗相關分析顯示的只是Cirpto-1作用的一個方面，具體機制尚有待證實。

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