Fascin在散發性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達及其意義

趙振亞 許 欣 薛延光

(邢臺市人民醫院病理科，河北 邢臺 054031)

大腸管狀腺瘤是一種具有癌變潛能的良性病變，發病率較高，而且是大腸癌主要的癌前病變〔1〕。本研究探討Fascin在大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達及可能作用。

1 資料與方法

1.1資料 選取河北邢臺市人民醫院病理科2000年12月至2008年1月期間存檔蠟塊，除外家族性結腸多發息肉病、幼年性息肉和其他類型的大腸腺瘤。所有病例全部切片均由2位高年資病理醫師進行明確診斷復核，按照病史及病理資料選擇伴有不同程度(輕中、重度)異型增生的散發性大腸管狀腺瘤82例，大腸管狀腺瘤癌變病例76例作為研究對象，同時以40例大腸黏膜作為對照，均取自大腸癌標本距腫物10 cm以上的大腸黏膜。本組研究病例中，男112例，女86例；年齡60～85(平均68.5)歲。82例大腸腺瘤組中，輕中度異型增生38例，重度異型增生44例。76例大腸腺瘤癌變組中，浸潤深度未侵及漿膜32例，侵及漿膜44例，無淋巴結轉移的34例，有淋巴結轉移的42例，Dukes分期A+B期34例，C+D期42例，高-中分化46例，低分化30例。

1.2方法 采用免疫組織化學ElivisionTMplus兩步法進行免疫組化染色。選用鼠抗人Fascin單克隆抗體，購自上海滬峰生物科技有限公司。用已確定為陽性的轉移性乳腺癌作為陽性對照。Ki-67抗體購自福州邁新生物技術開發有限公司，用已確定為陽性的乳腺癌作為陽性對照。

1.3免疫組化結果判定標準 Fascin蛋白陽性表達主要定位于細胞質,表現為胞質內有棕黃色顆粒。在間質中高表達,因此,在間質中的表達可以作為內對照。免疫組織化學染色結果采用以下判斷標準〔2〕。首先將染色程度評分：無色計0分、淡黃色計1分、棕黃色計2分和棕褐色計3分；再將陽性細胞所占的百分比評分：0分為陰性、陽性細胞數≤10%計1分、11%～50%計2分、51%～75%計3分、>75%計4分,然后計算兩者的乘積。乘積<3分為陰性，≥3分為陽性。Ki-67的評定標準：陽性表達位于細胞核，核內有棕黃色顆粒，陽性率：陽性細胞數<5%為-，5%～25%為+，26%～50%為，>50%為。以-和+為低表達，和為過表達進行分析。

1.4統計學分析 應用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗。

2 結 果

2.1Fascin蛋白在大腸管狀腺瘤癌變中的表達情況 在大腸黏膜、大腸管狀腺瘤伴上皮異型增生及大腸腺瘤癌變中Fascin蛋白陽性表達率分別為5.0%、30.5%、64.5%。其陽性表達率隨病變程度的加深而增高(P<0.05)(圖1)，且不同的組別之間存在顯著差異(P<0.05)(表1)；在大腸管狀腺瘤伴上皮異型增生中，Fascin蛋白陽性表達率分別為10.5%(輕中度)、47.7%(重度)，陽性表達率逐漸增高(P<0.05)。

表1 Fascin在大腸腺瘤癌變中表達與臨床病理參數的關系(n)

2.2Fascin在大腸腺瘤癌變中表達與臨床病理參數的關系 Fascin蛋白的表達與患者的年齡、性別無關(P>0.05)，與腫瘤分級、浸潤深度、淋巴結轉移、Dukes分期密切相關(P<0.05)(表1)。

圖1 Fascin在大腸管狀腺瘤不同病變中的表達(DAB，×100)

3 討 論

大腸癌居全球惡性腫瘤發病率的第3位〔3〕。侵襲、轉移行為是惡性腫瘤的本質特性和致死原因，癌轉移使局部病變擴散成全身多灶性分布的疾病。及早發現、診斷及治療癌前病變是降低大腸癌發生率的最好辦法，在大腸癌變之前(大腸腺瘤階段)，治療方法簡單，效果明顯，治愈率高。最近美國腫瘤研究所的Liatla 提出了腫瘤浸潤三步學說，即黏附、溶解和移動。癌細胞需經歷從原發灶脫落、細胞黏附于基質、蛋白水解酶降解基質、腫瘤細胞移動等過程，向周圍組織侵襲或進入血液循環及淋巴系統而進一步向遠處轉移。Fascin蛋白與細胞的黏附、移動有關。

細胞形狀的改變如膜突起形成、細胞間的黏附性降低等是腫瘤早期發生浸潤轉移的重要原因之一，而這些改變與細胞周邊肌動蛋白微絲、細胞骨架的重排及肌動蛋白結合蛋白的聚集形成偽足密切相關。結直腸癌的進展和侵襲與癌細胞運動性增加及肌動蛋白細胞骨架結構改變密不可分。三維的肌動蛋白微絲的結構和功能是由眾多肌動蛋白捆綁蛋白調節和控制〔4〕。人類Fascin基因是定位于染色體7q22，編碼一種分子量為55 kD的細胞骨架蛋白，可與F-肌動蛋白結合，定位于細胞質張力纖維和細胞膜皺褶邊緣的絲狀偽足、微棘的核心肌動蛋白束中，Fascin蛋白N端11～50之間的氨基酸殘基高度保守，其中第39位的絲氨酸為蛋白激酶C(PKC)的磷酸化位點，該位點的磷酸化可調節Fascin蛋白與F-actin的結合活性〔5〕以及細胞膜表面絲狀偽足和微棘的形成〔6〕。細胞的絲狀偽足和微棘與細胞的運動、癌細胞的轉移有密切關系，這提示Fascin蛋白在細胞遷移，細胞黏附以及細胞間信息交流等過程中發揮作用〔6，7〕。近年來的研究發現Fascin蛋白在正常上皮細胞中不表達或低表達，但在一些上皮組織腫瘤如胃癌、乳腺癌，非小細胞肺癌，胰腺癌，卵巢癌，食管癌中常表達上調。在霍奇金淋巴瘤、多發性骨髓瘤、指突狀樹突細胞肉瘤、Sjogren綜合征、(HIV)相關的淋巴細胞增生疾病等高表達。Fascin表達與腫瘤的進展、高侵襲性、預后不良和生存率的降低呈正相關〔8,9〕。

有研究者認為在結直腸癌中Fascin表達可能受wnt途徑的調節〔10〕，導致Fascin蛋白的異常表達，提高了細胞運動能力和移動性，促使細胞產生各種惡性行為，從而引起大腸癌的發生發展。也有可能在細胞惡變后上調了Fascin基因的表達或增加轉錄，使其蛋白表達亦隨之上調。還有研究者認為：Fascin蛋白可能是c-erbB-2在細胞骨架上的一種效應蛋白，c-erbB-2在癌中的擴增激活Fascin的轉錄，由此看來，大腸癌中可能存在多條途徑調節Fascin蛋白的表達。

本研究提示隨著Fascin表達的增高，致使細胞膜表面突起增多，細胞增殖旺盛，肌動蛋白骨架重建，細胞運動和移動性增強，促使細胞產生各種惡性行為，在大腸從正常黏膜-腺瘤-癌變的發生發展過程中起到了一定作用，提示Fascin蛋白可能參與了大腸管狀腺瘤的形成及癌變。因此，阻斷Fascin蛋白表達或阻斷對其細胞運動裝置或黏連結構的作用可能成為未來結腸癌治療的新措施〔11〕。在大腸管狀腺瘤癌變組中Fascin的表達與腫瘤的分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移、Dukes分期有關,與性別、年齡均無關。這與文獻報道相類似〔12〕，Ki-67是顯示腫瘤增殖活性和判斷預后的重要指標，Fiscin與Ki-67的表達呈正相關，由此說明Fascin蛋白也可成為判斷腫瘤預后新的指標。

4 參考文獻

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10Tao YS,Edwards RA,Tubb B,etal.Beta-Catenin associates with the actin-bunding protein fascin in a noncadherin complex〔J〕. J Cell Biol,1996；134 (5):1271-81.

11宋曉昕. Fascin在大腸腺瘤癌變過程中的表達及意義〔J〕. 河北醫藥， 2010;32(17):2370-1.

12李宏偉,王鐵山,黃 勇，等. 結直腸腺癌中Fascin-1蛋白表達與其臨床病理特征的關系〔J〕. 中國普外基礎與臨床雜志，2010;17(4):362-4.