李曉萍 薛海嬌 郭麗娜 劉忠英
(白城師范學院,吉林 白城 137000)
淫羊藿為小檗科淫羊藿屬植物〔1〕。有益精氣、堅筋骨、補腰膝、強心力之功效。現代藥理實驗研究表明,淫羊藿中主要活性物質為黃酮類化合物,具有抗骨質疏松活性、促進造血功能、增加心腦血管血流量、免疫功能、抗衰老、抗腫瘤等多種功效〔2〕。目前,相關研究結果表明,人類的許多疾病與氧化應激有關〔3〕。由自由基介導的氧化損傷在許多疾病的發生和發展過程中起到極其重要的作用。由活性氧(ROS)、活性氮 (RNS)引起的蛋白質氧化損傷與衰老、阿爾茨海默病(AD)、帕金森病(PD)等老年性疾病的發生有密切關系〔4〕。關于淫羊藿次苷抗疲勞、抗氧化活性的研究未見報道。本實驗采用運動性實驗與生化指標檢測相結合的方法,研究淫羊藿次苷抗氧化、抗疲勞作用。
1.1實驗動物 健康SD大鼠40只,體重(200±20)g,購自吉林大學實驗動物中心。
1.2試劑和儀器 淫羊藿次苷,淡黃綠色粉末,純度為75%,由實驗室制備。香菇多糖:北京康蒂尼藥業有限公司。血乳酸試劑盒、尿素氮(BUN)試劑盒、肝糖原測定試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒、過氧化物歧化酶(SOD)試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。Spectra FLOUR plus酶標儀(瑞士TECAN公司),恒溫游泳池,水浴鍋。
1.3實驗方法 大鼠購進后,飼養1 w,適應環境。隨機分為空白對照組、陽性對照組、低、中、高劑量組,每組8只。其中低、中、高劑量組經大鼠灌胃給予淫羊藿次苷(含量為75%)7.5 mg/kg、15 mg/kg及22.5 mg/kg,空白對照組給予蒸餾水的劑量為20 ml/kg,陽性對照組給香菇多糖(北京康蒂尼藥業有限公司)420 mg/kg。每組均連續給藥28 d后,于末次給藥1 h后進行實驗,在大鼠尾部負重5%的鉛皮,投入恒溫游泳箱中,溫度(27±0.5)℃,水深40 cm。以頭部沉入水中不能游出水面為體力耗竭,記錄體力耗竭的游泳時間。大鼠游泳后取出,斷頭取血,以轉速4 000 r/min,溫度4℃ 離心10 min,取血清分裝,并取肝臟,放好凍存。測定指標:負重游泳時間、血乳酸(LD)、BUN、肝糖原、肝臟MDA、SOD。
1.4統計學分析 計量資料組間比較采用t檢驗。
2.1淫羊藿次苷抗大鼠運動性疲勞作用 與空白組相比較,淫羊藿次苷中、高劑量組能顯著延長大鼠的負重游泳時間,其中高劑量組作用強于陽性藥組,低劑量組作用不顯著;與空白組相比較,淫羊藿次苷的高劑量組能顯著降低大鼠血清中BUN;中劑量組和高劑量組均能顯著降低LD量,低劑量組作用不顯著;淫羊藿次苷的高、中、低劑量組能顯著提高大鼠肝臟中肝糖原含量,其中高劑量組比陽性藥組作用更強。見表1。
2.2淫羊藿次苷抗氧化作用 與空白組相比較,淫羊藿次苷的中劑量組和高劑量組能極顯著提高大鼠血清中SOD的活力(P<0.01),低劑量組作用不顯著;淫羊藿次苷三個劑量組能顯著降低血清中MDA的含量,且抗氧化作用隨著淫羊藿次苷的劑量增加而增強。見表2。

表1 淫羊藿次苷對大鼠運動性指標及生化指標的影響±s,n=8)

表2 淫羊藿次苷對大鼠抗氧化作用的影響±s,n=8)
疲勞是機體失去其完成原來所從事的正常活動或者工作能力,身體功能暫時降低的現象。運動性疲勞會導致機體抗過氧化能力下降、中樞神經系統的疲勞、免疫功能下降、神經內分泌功能抑制、造血系統功能抑制等〔5〕。抑制氧化損傷是防治疾病一個重要的途徑。中藥抗氧化作用的機制主要包括清除活性氧自由基,增強抗氧化酶的活性,抗脂質過氧化,減少DNA損傷及對氧化酶系活力的影響〔6〕。
從朝鮮淫羊藿根部提取出的淫羊藿次苷可使轉錄信號轉導子與激活子相關信號失活,從而使急性髓細胞白血病細胞株U937發生凋亡〔7〕,還可以通過激活雌激素信號通路來促進大鼠體外培養骨髓間充質干細胞成骨性分化過程〔8〕。SOD是生物體內清除自由基的一種重要酶,能使機體有效抵御自由基的毒性〔9〕;MDA是脂質過氧化最重要的產物之一,其含量高低可反映出抗氧化能力強弱〔10〕。淫羊藿次苷能提高大鼠血清中SOD活力,加快MDA的清除速率,具有顯著的抗氧化活性。
大鼠負重游泳時間的長短可有效反映出抗疲勞能力〔11〕。BUN為蛋白質的代謝產物,強運動時,蛋白質的代謝加快,BUN的清除速率可反映出機體抗疲勞的能力;糖原是運動過程中的主要能源物質,肝糖原含量越高,抗疲勞活性越強;在強運動過程中,機體主要通過無氧氧化供能,其代謝產物LD是引起疲勞的原因之一,LD的清除有利于疲勞的恢復〔12〕。本實驗結果表明,淫羊藿次苷可延長大鼠負重游泳時間,降低BUN含量,提高肝糖原含量,減少LD堆積,表現出顯著的抗疲勞活性。
綜上所述,淫羊藿次苷具有顯著的抗運動性疲勞及抗氧化活性。其抗氧化、抗疲勞活性與給藥劑量成正比。本實驗研究結果可為抗氧化保健品的研制奠定基礎。
4 參考文獻
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