胃腺癌組織中白細胞分化抗原147和Furin的表達對血管生成的作用

才保加 祁玉娟 周 為 王曉龍 馬玉斌 馬曉明

(青海大學附屬醫院胃腸外科，青海 西寧 810001)

胃腺癌病變發生和進展中腫瘤間質的血管生成明顯增多，對供應營養和氧有重要價值〔1〕。白細胞分化抗原(CD)31是臨床標記血管的重要標志物，對新生血管內皮細胞的標記特異性強〔2〕。CD147是免疫球蛋白家族的成員之一，在細胞表面發揮作用時具有多項生物學功能〔3,4〕。近來人們關注CD147在腫瘤中的作用，認為其類似癌基因的作用〔5〕。弗林蛋白酶(Furin)是最早發現的哺乳動物前體蛋白加工酶，底物非常廣泛，包括多種凝血因子、激素、生長因子和基質金屬蛋白酶等〔6〕。近來學者研究認為Furin的異常表達對腫瘤的發生和進展有一定關系〔7〕。本實驗對胃腺癌術后組織中CD147、Furin和CD31的表達進行檢測，關注其臨床意義。

1 材料與方法

1.1一般資料 我院診斷為胃腺癌并進行根治手術的患者95例作為研究組，均經病理醫師確診，并符合WHO中的診斷標準。年齡56～78歲，平均66.8歲；男51例，女44例。術前均未進行放療和化療。62例不典型增生的胃黏膜組織作為對照組，年齡53～77歲，平均65.4歲；男32例，女30例。收集距腫物邊緣>5 cm的正常胃黏膜組織作為正常對照組，年齡57～76歲，平均64.5歲；男33例，女29例。3組一般臨床資料無差別，具有可比性。

1.23組中CD147、Furin和CD31蛋白的表達 選擇CD147、Furin和CD31的濃縮液，試劑均購自北京博奧森生物技術公司。正式檢測前進行預實驗，選擇染色強度最理想、背景最干凈的配比濃度進行正式實驗。CD147、Furin和CD34的檢測應用免疫組化二步法，DAB染色。嚴格實驗步驟，嚴格質量控制。

1.3CD147、Furin和CD34蛋白表達的判定 CD31以間質中血管內皮的細胞質染成棕黃色為陽性，選擇連續的內皮細胞叢或分支判定為新生血管，選擇10個密度最高的區域(400倍)進行計數，取平均值計為微血管密度(MVD)。CD147和Furin均以細胞質中染成棕黃色為陽性，均計數10個400倍上皮細胞集中的區域，計算陽性率。CD147和Furin以陽性細胞≥5％為陽性，以<5％為陰性。

1.4統計學方法 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結 果

2.1研究組中CD147、Furin和MVD與臨床特征的關系 研究組中CD147、Furin和MVD的表達均與腫瘤最大徑、浸潤深度、脈管侵犯和淋巴結轉移相關。見表1。

表1 研究組中CD147、Furin陽性表達和MVD與臨床特征的關系〔n(％)〕

2.23組中CD147、Furin和MVD的比較 3組中CD147、Furin的陽性率、MVD值的差別均有統計學意義。見表2。

2.3研究組中CD147、Furin和MVD相關性 CD147和MVD(r=0.47,P=0.027 4)、Furin和MVD(r=0.48,P=0.025 0)均具有正相關性。

表2 3組中CD147、Furin陽性表達和MVD比較〔n(％)〕

3 討 論

胃腺癌的生長及進展與血管生成相關，此時腫瘤中癌基因和血管生成對促進腫瘤進展有重要價值〔8〕。CD31是臨床病理中最常用的血管內皮細胞標志物，其標記的特異性強，尤其是對腫瘤新生的內皮細胞更明顯。血管的生成使機體可以為腫瘤細胞提供更加豐富的營養和氧氣，腫瘤的營養豐富，氧供豐富，腫瘤生成和代謝快，侵襲能力增加，轉移潛能增強〔9〕。CD147是作為一種基質金屬蛋白酶的誘導劑而發現的，是一種細胞表面的黏附分子，介導多種生物學功能〔10,11〕。研究認為CD147具有調節單羧酸轉運蛋白的活性，對免疫應答、生殖等生理過程均有一定的調節作用，在此過程中可以直接影響上皮細胞的功能〔12,13〕。CD147與腫瘤的進展密切相關，可通過增加透明質烷的分泌量來促進腫瘤細胞的增長，通過誘導血管內皮生長因子的產生來促進腫瘤間質的血管新生〔14〕。CD147可以影響腫瘤的微環境，導致腫瘤細胞向臨床浸潤及向遠處進行轉移〔15〕。Furin在機體中的功能也具有多樣性，如參與多肽與蛋白質激素的合成與分泌、膜受體的成熟過程及血漿蛋白前體的激活等〔16,17〕。近來研究顯示Furin可以調節細胞的惡性轉化及過程，同時加速腫瘤細胞的侵襲和播散，在此過程中，針對血管生成的作用更為引人關注〔18,19〕。

本研究結果提示CD147和Furin在腫瘤癌變過程中發揮明顯的促進作用，同時MVD也隨著腫瘤的惡變逐漸增多。CD147、Furin不僅是促進胃腺癌發生的重要因子，也是促進腫瘤血管生成的重要因子。CD147的跨膜區域具有亮氨酸拉鏈的結構特點，跨膜區域含有3個亮氨酸和1個苯丙氨酸，在細胞膜的疏水性環境中，電荷氨基酸是一個不穩定因素〔20〕，這提示CD147的跨膜區域可能會通過與其他蛋白相互作用引起蛋白的不穩定，CD31正是此種結構蛋白中的一員，二者易發生作用，影響腫瘤的間質結構。Furin可以引起腫瘤細胞分泌多種血管生成信號，腫瘤血管可以由周圍正常組織的固有血管向腫瘤組織內部延伸而成〔21〕，也可以通過內皮細胞前體細胞分化后形成內皮依賴性血管〔22〕，此時血管生成，腫瘤細胞生長加速，腫瘤體積增大。因此Furin對胃腺癌的調節作用更明顯。也有觀點認為CD147對血管生成的作用可能對VEGF的影響更直接〔23〕，因此CD147可能促進腫瘤局部VEGF升高，進而VEGF誘導CD31陽性的血管生成，形成級聯性反應。本文提示CD147、CD31、MVD三者均與腫瘤的進展有關。因此三者可能對判斷預后有一定價值。

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