分子印跡技術在鹽酸克倫特羅殘留檢測中的應用

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(渤海大學化學化工與食品安全學院,渤海大學食品研究院,遼寧省食品安全重點實驗室,遼寧錦州 121013)

分子印跡技術在鹽酸克倫特羅殘留檢測中的應用

湯軼偉,高子媛,李譯,蘭建興,魏立巧,張德福,高雪,勵建榮*

(渤海大學化學化工與食品安全學院,渤海大學食品研究院,遼寧省食品安全重點實驗室,遼寧錦州 121013)

鹽酸克倫特羅屬β2-受體激動劑,該藥物理化性質穩定,具有促進動物生長、增加瘦肉率的功能。然而,長期食用殘留該藥物的食品,會嚴重損害人體健康。以分子印跡技術制備的聚合物以其高親和性、高選擇性,高穩定性、制備簡單、應用范圍廣等特點,廣泛用于食品安全檢測中。本文綜述了分子印跡技術的產生、發展、基礎理論以該技術在鹽酸克倫特羅殘留檢測中的應用進展,并對其發展前景進行了分析。

分子印跡技術,鹽酸克倫特羅,檢測

由于CLB的毒副作用較強,故歐盟早在1988年就開始禁止CLB作為飼料添加劑使用。后來美國FDA和我國也分別于1991年和1997年禁止在畜禽生產過程中使用該藥物。然而,在經濟利益的驅動下,許多不法商家在畜禽養殖過程中偷用CLB以提高其產品品質,致使人們的健康受到損害,如2006年上海市民食用殘留有CLB豬肉的中毒事件、2011年的河南雙匯“瘦肉精”事件等[2]。所以,檢測食品中CLB殘留對保證食品安全具有重要意義。

分子印跡技術(Molecular Imprinting Technology,MIT)是近十幾年發展起來的合成功能性材料的新方法。以MIT制備的分子印跡聚合物(Molecular Imprinting Polymers,MIPs)對目標物具有類似生物抗體與抗原之間的特異識別性,制備簡單,迅速成為食品安全檢測領域研究的熱點。本文主要對MIT的發展、基本原理以及在CLB檢測中的應用進行綜述,分析各個方法的優缺點,以期為促進我國食品安全檢測方法及對食品中CLB殘留的有效監測提供技術支持。

1 分子印跡技術

分子印跡技術是制備對目標分子具有特異選擇性聚合物的技術,為人們提供了合成具有期望結構和性質聚合物的新選擇。1931年,Polyakov[3]第一次提出用一種新的合成方法制備具有特殊吸附特性硅球的想法,這與后來Dickey[4]定義的“分子印跡”如出一轍。該技術的發展受啟于Pauling[5]提出的以抗原為模板合成抗體的理論,雖然這一理論被證明在抗體制備上不可行,但對科學工作者卻提供了新的啟發。

分子印跡技術真正為人們所知是在1972年Wuff[6]首次報道人工合成了分子印跡聚合物之后,特別是Mosbach[7](1993年)等在《Nature》上發表有關茶堿分子印跡聚合物的研究報道后,該技術迅速成為材料和檢測領域研究的熱點。目前,分子印跡技術已被廣泛應用到環境保護、生物技術、藥物研發和食品安全等領域[8]。

2 基本原理

首先,印跡分子(模板分子)和功能單體在一定溶劑中通過可逆共價鍵或非共價鍵作用形成單體-模板分子復合物；然后加入適當的交聯劑,在引發劑、光或熱等作用下使功能單體、交聯劑發生共聚合,聚合結束后功能單體上的功能基團在空間上被固定下來；在通過化學或物理方法除去模板分子后,聚合物中形成了與模板分子空間結構互補的三維立體孔穴。印跡聚合物中的功能基團和孔穴結構是對模板分子特異性吸附功能的關鍵。

圖1 分子印跡聚合物制備過程Fig.1 Representation of the molecular imprinting process

3 分子印跡技術在鹽酸克倫特羅檢測中的應用

分子印跡技術的發展為CLB的快速提取和檢測提供了一條新的途徑。以MIT制備的CLB分子印跡聚合物以其制備成本低、耐酸堿、可重復利用等特點已廣泛用于色譜固定相、固相萃取及傳感器等方面。

在非物質文化遺產保護過程中對非物質文化遺產實施產業化開發，從而形成產業化經營是一種尤為重要的保護方式，把能夠進入市場的非物質文化遺產進行產業化開發，順應當前市場經濟，充分挖掘其經濟價值，將文化與經濟相結合，會更好地推動非物質文化遺產保護。傈僳族傳統紡織技藝具有一定經濟價值，火草布紡織耗時長，織一件活草衣需要大量時間，制作工序復雜，且需人工完成，機械不能代替。同時傈僳族活草布具有很高的藝術特征，能夠與現代女裝設計相結合，使其既具有超前的時尚感又蘊含豐富的民族文化特色。

3.1高效液相色譜固定相

高效液相色譜(HPLC)分析法是食品中CLB殘留檢測的主要儀器方法之一,該方法的關鍵是選擇具有適合固定相的色譜柱。目前,色譜固定相主要有C18、C8鍵合固定相,離子鍵合相等,但這些固定相對待測物的特異吸附效果較差,檢測時易受復雜基質的影響。MIPs以其良好的特異性、穩定的理化性質、較高的分離效能為HPLC固定相的選擇提供了新材料。

2001年,Masci G等[9]以CLB為模板分子,甲基烯丙酸(MAA)為功能單體,乙二醇二甲基烯丙酸酯(EDMA)為交聯劑、偶氮二異丁腈(AIBN)為引發劑,乙腈為致孔劑通過本體聚合法制備了具有高選擇性的CLB印跡聚合物。該MIPs經研磨后將粒徑在25μm的顆粒濕法裝入色譜柱(150×4.6mm)中,以甲醇-乙酸為流動相洗脫模板分子,直到沒有CLB檢出為止。實驗考察了在不同流動相和pH時該色譜柱對CLB與結構類似物的分離因子(α)、保留指數(RI)和容量因子(k′),結果表明:在流動相為磷酸鹽緩沖液(PBS,pH3.4,10-3mol/L)-乙腈(30∶70,V∶V)時能夠對CLB實現基線分離,k′為5.88。該研究為CLB-MIPs作為色譜固定相對CLB殘留檢測奠定了基礎。

2002年,Masci G[10]研究團隊以CLB為模板分子,EDMA為交聯劑,通過使用兩步溶脹法和熱聚合技術制備出粒徑一致的CLB-MIPs,然后將制備的MIPs濕法裝入色譜柱(150×4.6mm)中。此研究優化了不同功能單體和交聯劑用量對MIPs粒徑分布、吸附性能、分離因子等指標的影響,實驗結果顯示:丙烯酰胺(AM)為功能單體時制備的MIPs粒徑分布較小,在15μm左右；在流動相為乙腈-PBS(pH2；50∶50,V∶V)時可對CLB實現基線分離,k′為4.18。該方法制備的MIPs粒徑較小、分布均勻,不需要研磨處理,極大的保留了聚合物中的功能性孔穴結構,非常適合作為色譜固定相對CLB殘留進行檢測,也為工業化生產CLB色譜固定相提供了新方法。

2009年,Turson M等[11]為了獲得完整的CLB-MIP色譜整體柱,以CLB為模板分子,MAA為功能單體,EDMA為交聯劑,AIBN為引發劑,三硫代碳酸二芐酯(DBTTC)為鏈轉移試劑,采用可逆加成-鏈斷裂轉移聚合(RAFT)技術直接在不銹鋼色譜柱(150×4.6mm)中制備CLB-MIP。該實驗考察了不同引發劑用量對整體柱孔徑、選擇性等指標的影響,并將傳統自由基本體聚合物和RAFT聚合物比較,結果顯示:采用RAFT技術制備的CLB-MIP整體柱的孔徑比本體聚合的小,比表面積大；通過對CLB和沙丁胺醇混合物分離結果顯示,以RAFT制備的整體柱的選擇因子最大,達到8.5,分離度達到1.6,印跡系數達到7.17。整體柱制備和RAFT聚合技術的結合,提高了CLB-MIP作為色譜固定相的選擇性,避免了傳統色譜柱制備時裝柱程序。

2011年,Luo Y F等[12]以CLB為模板分子,MAA為功能單體,EDMA為交聯劑,低極性溶劑甲苯和十二烷醇為致孔劑,通過原位聚合技術合成CLB分子印跡整體柱。該研究考察了不同功能單體、模板分子與功能單體比例、致孔劑用量等條件對實驗結果的影響,結果顯示:在模板分子:功能單體(MAA):引發劑比例為5∶20∶1時效果最好,最大吸附容量為212.02μmmol/g；最優色譜條件下,該分子印跡色譜柱對CLB的選擇因子為56.44；實際豬肝樣品檢測中,對CLB的最低檢出限為10ng/g,回收率為99.16%～113.06%,RSD為4.55%～11.81%。該研究為以CLB-MIPs為色譜固定相的HPLC方法對實際樣品的檢測奠定了基礎。

以CLB分子印跡聚合物為HPLC色譜柱固定相是分子印跡應用研究的新方向,可通過改變流動相的種類或比例實現對樣品提取物的在線凈化和富集,簡化儀器分析的樣品前處理程序,提高檢測效率。MIPs色譜柱主要分為MIPs填充柱[9-10]和MIPs整體柱[11-12]兩種,這種色譜柱在實際應用過程中都可能會出現模板分子泄露、柱壓高等問題。針對模板分子泄露問題,可以通過使用假模板分子制備印跡聚合物來嘗試解決；而對于柱壓高的問題,則需要通過研究聚合方法或裝柱方法來解決。

3.2固相萃取

固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)技術始于20世紀70年代中期,是當前食品安全檢測中對樣品目標物進行萃取、凈化以及富集的主要方法之一。然而,目前商品化的SPE柱對特定分子的特異吸附性較差,且只能使用一次,大大增加了使用成本。分子印跡固相萃取(Molecularly Imprinted-solid-phase Extraction,MI-SPE)柱對目標物具有獨特的選擇性和親和力,能夠長期保存并可重復使用,成為食品中CLB殘留檢測樣品前處理方法研究的熱點。

2000年,Berggren C等[13]首次研究了CLB分子印跡聚合物作為SPE吸附材料凈化、富集尿樣中CLB的可行性。實驗以60mg CLB-MIPs裝SPE柱,優化了上樣溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑等條件,結果顯示:在10mL尿樣直接上樣,10mL乙腈-乙酸(99∶1,V∶V)溶液洗雜,6mL甲醇-乙酸(9∶1,V∶V)洗脫目標分子時樣品的添加回收率為65%；如果尿樣凍干后再添加CLB,乙腈溶劑復溶后上樣,回收率可達100%。該研究結果表明以CLB-MIPs作為SPE吸附材料可對尿樣中CLB進行提取、凈化和富集。

2001年,Crescenzi C等[14]建立了基質固相分散(MSPD)和MI-SPE聯用凈化富集豬肝中CLB的方法。首先,牛肝樣品與C18吸附劑在研缽中研碎混勻后裝入MSPD柱中,然后通過連接器將上端的MSPD柱和下端的MI-SPE柱聯在一起,通過乙腈-醋酸(99∶1,V∶V)溶液洗脫MSPD柱吸附物,洗脫液進入MI-SPE柱時CLB特異性的吸附在柱內；最后用8mL甲醇-乙酸(9∶1,V∶V)洗脫MI-SPE柱上的CLB。通過HPLC方法檢測MSPD-MI/SPE聯用凈化富集效果,結果顯示:該方法的添加回收率在90%以上,最低檢出限為0.5ng/g。同年,Brambilla G等[15]也以CLB-MIP作為SPE吸附材料對尿樣、肝臟和牛奶中的CLB、萊克多巴胺(RAC)、沙丁胺醇(SAL)等β-興奮劑進行凈化富集,結果顯示:最優條件下該MI-SPE對不同樣品中的CLB、RAC、SAL的添加回收率都在90%以上。

2002年,Blomgren A等[16]以溴布特羅為模板分子制備對CLB有特異吸附性能的MIPs。將該MIPs作為SPE吸附材料凈化富集尿樣中CLB殘留。實驗結果顯示:尿樣離心分離后用乙酸銨(25mmol/L,pH 6.7)2倍稀釋后以0.5mL/min流速上樣通過MI-SPE,然后依次用1mL水、1mL乙腈-乙酸(98∶2,V∶V)、1mL乙酸銨(0.5mol/L,pH5)、1mL乙腈-水(70∶30,V∶V)溶液洗雜,最后用甲醇-三氟乙酸(99∶1,V∶V)洗脫目標分子；經HPLC檢測結果顯示該MI-SPE對尿樣的添加回收率為75%,線性范圍0.5～100ng/mL。

2007年,王培龍等[17]使用商品化的CLB分子印跡SPE小柱提取、凈化并富集豬尿樣中的CLB,實驗優化了MI-SPE上樣、淋洗及洗脫過程。實驗結果顯示:樣品離心用乙酸銨緩沖液2倍稀釋后上樣后,依次經1mL水、1mL乙腈-乙酸(99∶1,V∶V)、1mL乙酸銨(0.5mol/L,pH5)淋洗,最后用2mL甲醇-乙酸(90∶10,V∶V)洗脫目標分子。洗脫液經GC-MS檢測后顯示該SPE對尿樣的添加回收率為71.0%～89.3%,方法的檢出限和定量限分別為0.51μg/L和1.0μg/L。該方法靈敏度和精密度高,重現性好,適合尿樣中CLB的凈化、富集。

2009年,鄭素連等[18]以CLB為模板,以MAA為功能單體,采用本體聚合法制備了MIPs。以該印跡聚合物為SPE吸附材料對豬肉中CLB殘留凈化富集。實驗結果顯示:樣品提取后以磷酸(3mmol/L,pH3.4)-乙腈(30∶70,V∶V)為上樣溶液,然后依次經1mL水、1mL 2%乙酸乙腈、1mL 70%乙腈水溶液、1mL乙腈為淋洗液,最后用3mL甲醇-乙酸(9∶1,V∶V)洗脫目標分子,樣品的添加回收率高于99.4%。該樣品前處理方法效果好、檢測靈敏度高,為豬肉中CLB殘留檢測提供了一種新方法。

2012年,楊挺等[19]以CLB-MIPs為吸附劑建立了基于分子印跡分散固相萃取液質聯用測定尿液中CLB檢測方法。樣品中CLB通過MIPs吸附,甲醇-乙酸-水(7∶2∶1,V∶V∶V)洗脫目標分子,氮氣吹干后以0.1%甲酸 水-甲醇(9∶1,V∶V)溶液定容,過0.22μm濾膜后可進行LC-MS/MS 分析。結果顯示,MIPs對CLB有良好的結合性,樣品的添加回收率大于70.2%,檢出限(S/N=3)為0.08μg/L,該方法重現性好、試劑用量少、無基質干擾,可用于尿液中CLB檢測。王培龍等[20]采用商品化的MI-SPE建立了氣相色譜-質譜(GC-MS)聯用法測定豬尿中CLB的方法。應用MI-SPE柱富集、凈化豬尿液中CLB、RAC、馬布特羅、氯丙那林,其過程同文獻17。經GC-MS測定結果顯示,CLB等4種β-受體激動劑在5～100μg/L范圍內線性良好,添加回收率為75.1%～97.5%。該方法的精密度和準確度較好,操作簡單,能夠用于檢測豬尿中痕量的CLB。黃紅萍等[21]以商品化的CLB分子印跡SPE凈化富集了喘息靈中的CLB。樣品中的CLB用乙醇提取,濾液蒸干后用5mL水溶解,取2mL上樣,然后SPE柱經乙腈-水溶液洗雜,6mL甲醇-乙酸(9∶1,V∶V)洗脫目標物。通過HPLC方法測定所建立方法的凈化富集效果,結果顯示:CLB濃度在0.4～40.0μg/mL范圍內呈良好線性關系(r2=0.9998),CLB的平均回收率為97.8%,(RSD=0.9%,n=9)。該方法簡便,分離效果好,結果準確可靠。

2013年,Qiao F等[22]以正丁胺和氯苯胺為虛擬模板分子采用懸浮聚合方法合成MIPs,并以此聚合物作為分散固相萃取吸附材料凈化、富集雞肉樣品中的CLB。實驗結果顯示,最佳條件下樣品的添加回收率為92.0%～99.1%,RSD<4%。Yan H Y等[23]以苯腎上腺素為虛擬模板分子,以離子液體1-烯丙基-3-乙基咪唑溴鹽和MAA為功能單體,采用懸浮聚合法合成分子印跡微球,并將該MIPs作為SPE吸附材料從尿液中分離、凈化和富集CLB。實驗結果顯示:尿樣(20mL)在pH6～9范圍內直接上樣,用6mL甲醇-水(4∶6,V∶V)淋洗雜質,以5.0mL甲醇-乙酸(85∶15,V∶V)為洗脫溶劑時效果最好,樣品的添加回收率為93.3%～106%,RSD≤5.6%。Li X等[24]采用兩步法制備具有排除蛋白質能力的CLB分子印跡材料,該材料具有印跡內部結構和親水性外層。制備過程如下:首先,采用RAFT技術制備CLB-MIP；第二步,在CLB-MIP表面接枝聚合聚甲基丙烯酸甘油酯親水層。實驗以該聚合物作為SPE吸附材料建立了在線HPLC檢測血液中CLB殘留的方法,實驗結果顯示:以Na2HPO4/NaH2PO4(0.1mol/L,pH7.0)-乙腈(80∶20,V∶V)為淋洗溶液可除去吸附在SPE上的血清蛋白,以Na2HPO4/NaH2PO4(0.1mol/L,pH3.0)-乙腈(20∶80,V∶V)為洗脫溶液洗脫SPE內部吸附的CLB效果最好,不同添加水平CLB的回收率為87.3%～96.9%,檢測限為0.7mg/mL。該方法檢測效率高,可以用于對血液中的CLB富集、凈化。

良好的樣品前處理技術對復雜樣品中痕量物質的分析極為重要,樣品不同所采取的前處理程序也應不同。上述研究[13-24]以CLB-MIPs為固相萃取材料分別對尿樣、豬肝、豬肉、雞肉樣品中CLB的凈化、富集條件作了優化,取得了滿意的回收率。但是,MIPs應用過程中的分子泄露問題會造成檢測結果的不準確度低,為了避免模板分子泄露問題的發生,Blomgren A和Qiao F分別采用虛擬模板分子制備MIPs,很好的解決了這一問題。

3.3分子印跡傳感器

以分子印跡聚合物膜或微球結合在識別元件表面與適當的信號轉化器結合在一起構成了分子印跡傳感器。該傳感器具有專一識別性、機械穩定性、熱穩定性等優點,提高了傳統傳感器的特異性。傳感器的轉換器類型豐富,包括電導型、電流型、電容型、電位型、熒光型、石英晶體微天平、場效應晶體管、放射性、鑭系發光纖維等[25]。

2001年,Andrea P等[26]以CLB為模板分子、MAA為功能單體、EDMA為交聯劑制備CLB-MIP,洗去模板分子后通過物理方法固定在電極表面制成電化學傳感器,通過差分脈沖伏安法(DPV)測定牛肝中的CLB殘留。實驗結果顯示:該傳感器具有很好的機械性能和電化學特性,檢出限為20nmol/L,能夠用于牛肝中痕量CLB殘留的檢測。

2004年,Zhou H J等[27]以CLB為模板分子、MAA為功能單體、EDMA為交聯劑制備的CLB-MIP制備了流動化學發光傳感器(CL),通過測定傳感器中富集的CLB量對高錳酸鉀-甲醛-多聚磷酸鹽化學發光體系的發光強度建立線性關系。實驗結果表明:該傳感器對CLB檢測的線性濃度范圍為1.0×10-9～ 5.0×10-8g/mL,檢測限為3.0×10-10g/mL,RSD<5%。該方法具有高度的選擇性和敏感性,可以用于動物尿液樣本中CLB的檢測。

2011年,Zhao C等[28]采用電化學方法制備了納米銀/聚槲皮素修飾的充蠟石墨電極(Ag/Qu/WGE),然后以CLB為模板分子混合殼聚糖、Nafion、甲酸等涂布在Ag/Qu/WGE電極表面制備一種新型的分子印跡膜修飾電極。該修飾電極采用恒電位法電化學清洗去除模板分子CLB,最優條件下,該方法的線性范圍為0.3～50μmol/L,檢測限為0.01μmol/L,實際豬肝中CLB的添加回收率在90%以上,因此該方法可用于豬肝中CLB殘留的檢測。

2012年,丁照云等[29]以CLB為模板分子,鄰苯二胺為功能單體,采用電化學聚合法在多壁碳納米管修飾的電極表面制備分子印跡薄膜,用乙腈水溶液快速去除模板分子后得到多壁碳納米管-分子印跡傳感器。該傳感器以K3[Fe(CN)6]為探針測定樣品中的CLB含量,結果顯示,K3[Fe(CN)6]的相對峰電流與CLB的濃度在4.0×10-8～6.6×10-6mol/L范圍內呈線性關系,檢測限為8.1×10-9mol/L,豬肉樣品的添加回收率為101.3%～107.9%。該傳感器對結構類似物具有較強的抗干擾能力,能夠滿足復雜樣品中CLB檢測的要求。Liang R N等[30]以CLB為模板分子、MAA和甲基丙烯酸酯為共同功能單體、二乙烯基苯(DVB)和三羥甲基丙烷三丙烯酸基質(TRIM)為交聯劑、AIBN為引發劑采用沉淀聚合方法制備CLB-MIPs。該MIPs經甲醇-乙酸溶液洗脫模板分子后混合親脂性陽離子交換劑(NaTFPB)、增塑劑(o-NPOE)和膜基體(PVC)共360.0mg溶于3.5mL四氫呋喃溶劑中制備電活性物質溶液,取一定量的電活性溶液于直徑3.6cm的玻璃圓環中,自然揮發12h得到MIPs敏感膜組成CLB離子選擇性電極。該電極中MIPs為離子載體,通過氫鍵作用與樣品中的CLB選擇性結合,通過對實際尿樣中CLB檢測結果顯示:在最優條件下該電極傳感器對CLB陽離子的檢出限為7.0×10-8mol/L,線性范圍為1.0×10-7～1.0×10-4mol/L,能在3min內完成檢測。該傳感器屬于分子印跡電位型傳感器,具有較高的準確性,為豬尿中CLB的快速、準確檢測奠定基礎。

分子印跡傳感器以其靈敏度高、選擇性好和價格低廉等特點深受科研工作者的廣泛關注。目前,CLB分子印跡電化學傳感器和流動化學發光傳感器的研究較多,但未見商品化產品,這主要是由于傳感器元件上聚合物膜的穩定性和分子印跡傳感器的重現性還有待進一步提高。

4 結論

2013年我國肉制品行業分析報告指出我國的肉制品消費總量穩定增長,所以肉制品中的CLB等藥物殘留問題越來越受到人們的關心,建立快速、準確的檢測方法有重要的現實意義。雖然目前已有商品化的CLB-MIPs用于SPE吸附材料對不同樣品中的CLB殘留進行進化富集,但是如何找到種類更多、性能更好的功能單體和交聯劑,用于提高MIPs在不同極性溶劑中的吸附容量和特異性,依然是今后研究的重點。CLB-MIPs作為色譜固定相是改善傳統色譜柱選擇性的有效途徑,但是現階段CLB分子印跡色譜柱依然存在重現性差、柱壽命短及柱效低等不足,并且色譜柱中分子印跡聚合物的形態與其傳質機理之間的關系研究較少,這限制了分子印跡聚合物在色譜固定相應用中的發展。另外,當前對CLB-MIPs的研究大多只針對純溶劑中目標物的分離,對復雜樣品中CLB殘留的檢測較少。分子印跡傳感器的研究為實時、在線檢測樣品中CLB殘留提供可能,而研究性能穩定的分子印跡傳感器元件是該技術能否實際應用的關鍵。

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Progress in application of molecular imprinted technique in determination of Clenbuterol Hydrochloride

TANGYi-wei,GAOZi-yuan,LIYi,LANJian-xing,WEILi-qiao,ZHANGDe-fu,GAOXue,LIJian-rong*

(Food Science Research Institute of Bohai University,Food Safety Key Lab of Liaoning Province,College of Chemistry,Chemical Engineering and Food Safety,Bohai University,Jinzhou 121013,China)

Clenbuterol hydrochloride(CLB),as a kind of β2-agonist,has repartitioning ability to promote the growth of animals and to increase muscling in animal products. The physics and chemistry of CLB is stable and its residues in food are definitely harmful to health. Due to the merits of molecular imprinted polymers,such as high affinity and selectivity,good chemical stability,preparing sample,wide range of application and so on,molecular imprinted technique(MIT)is widely used in food safety detection. So this article reviewed the generation,development,basic theory and implication of MIT in detecting CLB,and the application prospect of MIT are also introduced.

molecular imprinted technique;clenbuterol hydrochloride;detection method

2014-01-09 *通訊聯系人

湯軼偉(1981-)，男，博士，講師，主要從事食品安全與檢測方面的研究。

國家自然科學基金(31201370)；遼寧省博士啟動基金(20121080)；國家“十二五”科技支撐計劃(2012BAD29B06)。

TS201.6

A

1002-0306(2014)17-0000-00

10.13386/j.issn1002-0306.2014.17.001