馮向陽
摘 要:達元DY-5000和托普NY-16D兩款酶抑制率法—比色法農殘速測儀用于農產品蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測,具有檢測靈敏度高、重現性較好、檢測速度快和成本低等優勢。通過對比、研究兩款儀器在工作原理、操作步驟和檢測結果判定上的不同之處,使其能更好地服務于農產品質量安全檢測工作。
關鍵詞:酶抑制率法;達元DY-5000;托普NY-16D;農藥殘留檢測儀
中圖分類號:S481.8 文獻標識碼:A 文章編號:2095-6835(2014)15-0062-02
蔬菜、水果中殘留的農藥會危害食用者的身體健康,確保人民群眾舌尖上的安全是政府食品質量安全監管的重要職責。蔬菜水果農藥殘留檢測儀適用于各級食品安全監測部門、蔬菜生產基地、蔬菜批發市場和食品超市的蔬菜、水果農藥殘留檢測,通過農藥殘留檢測儀對農藥殘留含量進行科學的檢測,并根據數據判斷蔬菜的農藥殘留量是否超標,是當前確保食品安全的重要環節。近年來,基于酶抑制率法—比色法的原理,開發了適用于蔬菜、水果農藥殘留檢測的儀器,具有快速、簡便、靈敏和成本低等優點,深受廣大基層監督部門、生產基地和市場的歡迎。我市在農產品質量安全監管檢測中,配備了達元DY-5000和托普NY-16D兩款農藥殘留速測儀,經過一段時間的使用后,對這兩款儀器的性能有了更好的了解和撐握,現將兩款儀器的使用事項與大家討論分享,以便更好地服務于檢測工作。
現階段,蔬菜水果農藥殘留主要是有機磷和氨基甲酸酯類農藥超標,而對人體造成危害的是農藥殘留的總量。農藥殘毒速測法正適應了以上兩個特點,可以快速檢測上述兩類農藥嚴重超標的蔬菜、水果,防止因食用引起的急性中毒;同時,還具有短時間內檢測大量樣本、檢測成本低、對檢測人員技術水平要求低、易于在基層推廣等特點,是現階段我國控制高毒農藥殘留的一種有效方法。
酶抑制法是研究最多且相對成熟的一種對部分農藥殘留進行快速檢測的技術,我國已將其列入國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》(GB/T 5009.199—2003)中,并作為快速檢測農產品中農藥殘留的方法。光電比色法是用光電比色計測量溶液的吸光度,根據待測組分溶液吸光度的變化和空白溶液吸光度的變化計算濃度,具有較高準確度,是一種非常經典的分析方法。
1 酶抑制率—比色法農殘速測的工作原理
有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常條件下,乙酰膽堿酯酶(AchE)或丁酰膽堿酯酶(BuChE)能催化神經傳導代謝產物類似物——碘化硫代乙酰膽堿(ATCI)或碘化硫代丁酰膽堿(BTCI)水解,水解產物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)發生反應,產生黃色物質,用農殘測試儀在410 nm波長比色法測定固定時間內空白對照溶液和樣品溶液的吸光度的變化值(△A),計算酶抑制率,可以判斷出樣品中有機磷或氨基甲酸酯類中農藥的殘留劑量。
2 兩款儀器的共同點
2.1 儀器特點
兩款儀器都是由光學、機械、電子軟件等部分組成,可以同時檢測多個樣品,自動檢測、記錄、計算和顯示最終抑制率和濃度值;內置樣品測試數據庫可連接電腦進行測試、分析、匯總;置熱敏打印,方便快捷;中文菜單操作人機對話界面便于輸入操作,步驟簡單、明了。
2.2 試劑開放,無特定限制
試劑可以選用儀器廠家的商品化小包裝專供試劑。
試劑的儲存和使用要求有:①緩沖劑。粉狀物常溫存放,蒸餾水溶解制成pH 8.0提取液。②顯色劑。5,5二硫代雙(2-硝基苯甲酸)和碳酸氫鈉以一定比例混合,用緩沖液溶解,在0~4 ℃的環境下保存期較長。③底物。碘化硫代乙酰膽堿,粉狀在0~4 ℃的環境下保存期在半年以上,加蒸餾水溶解在0~4 ℃的環境下保存期為7 d。④酶。粉狀的膽堿酯酶冷凍儲存,溶解后應儲存在0~4 ℃的環境下冷藏,一周內用完。
2.3 計算公式
采用兩點法檢測,相比于終點法,兩點法可以檢出本身帶有較深顏色的農產品,受干擾程度較小。檢測時通過測定固定時間段對照和樣品溶液吸光度變化計算抑制率,公式如下:
抑制率=(△A對照-△A樣品)/ △A對照×100%. (1)
檢測結果不會出現負值,但需要注意審核0抑制率數據。
3 兩款儀器的不同點
3.1 試劑用量方面
DY-5000儀器取2 g蔬果樣品+20 mL緩沖液進行浸提;樣液比率為1︰10;測試時,180 uL緩沖液(檢測樣品時則為浸提液)+10 uL酶液+10 uL顯色劑,靜置10 min+10 uL底物,立即測試;反應物濃度,例如以顯色劑計算,為10 uL/210 uL。
NY-16D儀器取2 g蔬果樣品+10 mL緩沖液進行浸提;樣液比率為1︰5;測試時,2.5 mL緩沖液(檢測樣品時則為浸提液)+100 uL酶液+100 uL顯色劑,靜置15 min+100 uL底物,立即測試;反應物濃度,以顯色劑計算,為100 uL/2 800 uL。
3.2 測試反應時間不同
DY-5000儀器的標準反應測試時間為60 s,而NY-16D儀器的標準反應測試時間180 s。則在公式(1)中:△A對照表示對照溶液反應60 s/180 s的吸光度變化值;△A樣品表示樣品溶液反應60 s/180 s的吸光度變化值;
3.3 空白吸光值作用不同
DY-5000儀器的空白吸光值△A在0.4~0.8之間,且必須>0.4.每進一批次樣品都需要同時做雙孔空白檢測,并作為本批次樣品的參照標準。這樣能夠較好地克服儀器工作點漂移的影響。
NY-16D儀器的空白吸光值△A在0.3以上,即采用國標標準。必須先單獨進行空白檢測,作為不同批次樣品的空白參考值參與計算;也可隨時根據儀器狀況進行空白測試,作為下批次空白值參與計算。這樣可以在保證空白檢測值準確的情況下進行樣品檢測,一般不會使批次樣品檢測數據作廢。
3.4 樣品重復檢測方式不同
DY-5000儀器可默認雙孔檢測,自動設立重復,并計算平均值,能通過平行測定的結果一致性比對判斷兩次結果的可信度。
NY-16D儀器的單孔檢測需要手動設立重復和計算平均值。
摘 要:達元DY-5000和托普NY-16D兩款酶抑制率法—比色法農殘速測儀用于農產品蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測,具有檢測靈敏度高、重現性較好、檢測速度快和成本低等優勢。通過對比、研究兩款儀器在工作原理、操作步驟和檢測結果判定上的不同之處,使其能更好地服務于農產品質量安全檢測工作。
關鍵詞:酶抑制率法;達元DY-5000;托普NY-16D;農藥殘留檢測儀
中圖分類號:S481.8 文獻標識碼:A 文章編號:2095-6835(2014)15-0062-02
蔬菜、水果中殘留的農藥會危害食用者的身體健康,確保人民群眾舌尖上的安全是政府食品質量安全監管的重要職責。蔬菜水果農藥殘留檢測儀適用于各級食品安全監測部門、蔬菜生產基地、蔬菜批發市場和食品超市的蔬菜、水果農藥殘留檢測,通過農藥殘留檢測儀對農藥殘留含量進行科學的檢測,并根據數據判斷蔬菜的農藥殘留量是否超標,是當前確保食品安全的重要環節。近年來,基于酶抑制率法—比色法的原理,開發了適用于蔬菜、水果農藥殘留檢測的儀器,具有快速、簡便、靈敏和成本低等優點,深受廣大基層監督部門、生產基地和市場的歡迎。我市在農產品質量安全監管檢測中,配備了達元DY-5000和托普NY-16D兩款農藥殘留速測儀,經過一段時間的使用后,對這兩款儀器的性能有了更好的了解和撐握,現將兩款儀器的使用事項與大家討論分享,以便更好地服務于檢測工作。
現階段,蔬菜水果農藥殘留主要是有機磷和氨基甲酸酯類農藥超標,而對人體造成危害的是農藥殘留的總量。農藥殘毒速測法正適應了以上兩個特點,可以快速檢測上述兩類農藥嚴重超標的蔬菜、水果,防止因食用引起的急性中毒;同時,還具有短時間內檢測大量樣本、檢測成本低、對檢測人員技術水平要求低、易于在基層推廣等特點,是現階段我國控制高毒農藥殘留的一種有效方法。
酶抑制法是研究最多且相對成熟的一種對部分農藥殘留進行快速檢測的技術,我國已將其列入國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》(GB/T 5009.199—2003)中,并作為快速檢測農產品中農藥殘留的方法。光電比色法是用光電比色計測量溶液的吸光度,根據待測組分溶液吸光度的變化和空白溶液吸光度的變化計算濃度,具有較高準確度,是一種非常經典的分析方法。
1 酶抑制率—比色法農殘速測的工作原理
有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常條件下,乙酰膽堿酯酶(AchE)或丁酰膽堿酯酶(BuChE)能催化神經傳導代謝產物類似物——碘化硫代乙酰膽堿(ATCI)或碘化硫代丁酰膽堿(BTCI)水解,水解產物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)發生反應,產生黃色物質,用農殘測試儀在410 nm波長比色法測定固定時間內空白對照溶液和樣品溶液的吸光度的變化值(△A),計算酶抑制率,可以判斷出樣品中有機磷或氨基甲酸酯類中農藥的殘留劑量。
2 兩款儀器的共同點
2.1 儀器特點
兩款儀器都是由光學、機械、電子軟件等部分組成,可以同時檢測多個樣品,自動檢測、記錄、計算和顯示最終抑制率和濃度值;內置樣品測試數據庫可連接電腦進行測試、分析、匯總;置熱敏打印,方便快捷;中文菜單操作人機對話界面便于輸入操作,步驟簡單、明了。
2.2 試劑開放,無特定限制
試劑可以選用儀器廠家的商品化小包裝專供試劑。
試劑的儲存和使用要求有:①緩沖劑。粉狀物常溫存放,蒸餾水溶解制成pH 8.0提取液。②顯色劑。5,5二硫代雙(2-硝基苯甲酸)和碳酸氫鈉以一定比例混合,用緩沖液溶解,在0~4 ℃的環境下保存期較長。③底物。碘化硫代乙酰膽堿,粉狀在0~4 ℃的環境下保存期在半年以上,加蒸餾水溶解在0~4 ℃的環境下保存期為7 d。④酶。粉狀的膽堿酯酶冷凍儲存,溶解后應儲存在0~4 ℃的環境下冷藏,一周內用完。
2.3 計算公式
采用兩點法檢測,相比于終點法,兩點法可以檢出本身帶有較深顏色的農產品,受干擾程度較小。檢測時通過測定固定時間段對照和樣品溶液吸光度變化計算抑制率,公式如下:
抑制率=(△A對照-△A樣品)/ △A對照×100%. (1)
檢測結果不會出現負值,但需要注意審核0抑制率數據。
3 兩款儀器的不同點
3.1 試劑用量方面
DY-5000儀器取2 g蔬果樣品+20 mL緩沖液進行浸提;樣液比率為1︰10;測試時,180 uL緩沖液(檢測樣品時則為浸提液)+10 uL酶液+10 uL顯色劑,靜置10 min+10 uL底物,立即測試;反應物濃度,例如以顯色劑計算,為10 uL/210 uL。
NY-16D儀器取2 g蔬果樣品+10 mL緩沖液進行浸提;樣液比率為1︰5;測試時,2.5 mL緩沖液(檢測樣品時則為浸提液)+100 uL酶液+100 uL顯色劑,靜置15 min+100 uL底物,立即測試;反應物濃度,以顯色劑計算,為100 uL/2 800 uL。
3.2 測試反應時間不同
DY-5000儀器的標準反應測試時間為60 s,而NY-16D儀器的標準反應測試時間180 s。則在公式(1)中:△A對照表示對照溶液反應60 s/180 s的吸光度變化值;△A樣品表示樣品溶液反應60 s/180 s的吸光度變化值;
3.3 空白吸光值作用不同
DY-5000儀器的空白吸光值△A在0.4~0.8之間,且必須>0.4.每進一批次樣品都需要同時做雙孔空白檢測,并作為本批次樣品的參照標準。這樣能夠較好地克服儀器工作點漂移的影響。
NY-16D儀器的空白吸光值△A在0.3以上,即采用國標標準。必須先單獨進行空白檢測,作為不同批次樣品的空白參考值參與計算;也可隨時根據儀器狀況進行空白測試,作為下批次空白值參與計算。這樣可以在保證空白檢測值準確的情況下進行樣品檢測,一般不會使批次樣品檢測數據作廢。
3.4 樣品重復檢測方式不同
DY-5000儀器可默認雙孔檢測,自動設立重復,并計算平均值,能通過平行測定的結果一致性比對判斷兩次結果的可信度。
NY-16D儀器的單孔檢測需要手動設立重復和計算平均值。
摘 要:達元DY-5000和托普NY-16D兩款酶抑制率法—比色法農殘速測儀用于農產品蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測,具有檢測靈敏度高、重現性較好、檢測速度快和成本低等優勢。通過對比、研究兩款儀器在工作原理、操作步驟和檢測結果判定上的不同之處,使其能更好地服務于農產品質量安全檢測工作。
關鍵詞:酶抑制率法;達元DY-5000;托普NY-16D;農藥殘留檢測儀
中圖分類號:S481.8 文獻標識碼:A 文章編號:2095-6835(2014)15-0062-02
蔬菜、水果中殘留的農藥會危害食用者的身體健康,確保人民群眾舌尖上的安全是政府食品質量安全監管的重要職責。蔬菜水果農藥殘留檢測儀適用于各級食品安全監測部門、蔬菜生產基地、蔬菜批發市場和食品超市的蔬菜、水果農藥殘留檢測,通過農藥殘留檢測儀對農藥殘留含量進行科學的檢測,并根據數據判斷蔬菜的農藥殘留量是否超標,是當前確保食品安全的重要環節。近年來,基于酶抑制率法—比色法的原理,開發了適用于蔬菜、水果農藥殘留檢測的儀器,具有快速、簡便、靈敏和成本低等優點,深受廣大基層監督部門、生產基地和市場的歡迎。我市在農產品質量安全監管檢測中,配備了達元DY-5000和托普NY-16D兩款農藥殘留速測儀,經過一段時間的使用后,對這兩款儀器的性能有了更好的了解和撐握,現將兩款儀器的使用事項與大家討論分享,以便更好地服務于檢測工作。
現階段,蔬菜水果農藥殘留主要是有機磷和氨基甲酸酯類農藥超標,而對人體造成危害的是農藥殘留的總量。農藥殘毒速測法正適應了以上兩個特點,可以快速檢測上述兩類農藥嚴重超標的蔬菜、水果,防止因食用引起的急性中毒;同時,還具有短時間內檢測大量樣本、檢測成本低、對檢測人員技術水平要求低、易于在基層推廣等特點,是現階段我國控制高毒農藥殘留的一種有效方法。
酶抑制法是研究最多且相對成熟的一種對部分農藥殘留進行快速檢測的技術,我國已將其列入國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》(GB/T 5009.199—2003)中,并作為快速檢測農產品中農藥殘留的方法。光電比色法是用光電比色計測量溶液的吸光度,根據待測組分溶液吸光度的變化和空白溶液吸光度的變化計算濃度,具有較高準確度,是一種非常經典的分析方法。
1 酶抑制率—比色法農殘速測的工作原理
有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常條件下,乙酰膽堿酯酶(AchE)或丁酰膽堿酯酶(BuChE)能催化神經傳導代謝產物類似物——碘化硫代乙酰膽堿(ATCI)或碘化硫代丁酰膽堿(BTCI)水解,水解產物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)發生反應,產生黃色物質,用農殘測試儀在410 nm波長比色法測定固定時間內空白對照溶液和樣品溶液的吸光度的變化值(△A),計算酶抑制率,可以判斷出樣品中有機磷或氨基甲酸酯類中農藥的殘留劑量。
2 兩款儀器的共同點
2.1 儀器特點
兩款儀器都是由光學、機械、電子軟件等部分組成,可以同時檢測多個樣品,自動檢測、記錄、計算和顯示最終抑制率和濃度值;內置樣品測試數據庫可連接電腦進行測試、分析、匯總;置熱敏打印,方便快捷;中文菜單操作人機對話界面便于輸入操作,步驟簡單、明了。
2.2 試劑開放,無特定限制
試劑可以選用儀器廠家的商品化小包裝專供試劑。
試劑的儲存和使用要求有:①緩沖劑。粉狀物常溫存放,蒸餾水溶解制成pH 8.0提取液。②顯色劑。5,5二硫代雙(2-硝基苯甲酸)和碳酸氫鈉以一定比例混合,用緩沖液溶解,在0~4 ℃的環境下保存期較長。③底物。碘化硫代乙酰膽堿,粉狀在0~4 ℃的環境下保存期在半年以上,加蒸餾水溶解在0~4 ℃的環境下保存期為7 d。④酶。粉狀的膽堿酯酶冷凍儲存,溶解后應儲存在0~4 ℃的環境下冷藏,一周內用完。
2.3 計算公式
采用兩點法檢測,相比于終點法,兩點法可以檢出本身帶有較深顏色的農產品,受干擾程度較小。檢測時通過測定固定時間段對照和樣品溶液吸光度變化計算抑制率,公式如下:
抑制率=(△A對照-△A樣品)/ △A對照×100%. (1)
檢測結果不會出現負值,但需要注意審核0抑制率數據。
3 兩款儀器的不同點
3.1 試劑用量方面
DY-5000儀器取2 g蔬果樣品+20 mL緩沖液進行浸提;樣液比率為1︰10;測試時,180 uL緩沖液(檢測樣品時則為浸提液)+10 uL酶液+10 uL顯色劑,靜置10 min+10 uL底物,立即測試;反應物濃度,例如以顯色劑計算,為10 uL/210 uL。
NY-16D儀器取2 g蔬果樣品+10 mL緩沖液進行浸提;樣液比率為1︰5;測試時,2.5 mL緩沖液(檢測樣品時則為浸提液)+100 uL酶液+100 uL顯色劑,靜置15 min+100 uL底物,立即測試;反應物濃度,以顯色劑計算,為100 uL/2 800 uL。
3.2 測試反應時間不同
DY-5000儀器的標準反應測試時間為60 s,而NY-16D儀器的標準反應測試時間180 s。則在公式(1)中:△A對照表示對照溶液反應60 s/180 s的吸光度變化值;△A樣品表示樣品溶液反應60 s/180 s的吸光度變化值;
3.3 空白吸光值作用不同
DY-5000儀器的空白吸光值△A在0.4~0.8之間,且必須>0.4.每進一批次樣品都需要同時做雙孔空白檢測,并作為本批次樣品的參照標準。這樣能夠較好地克服儀器工作點漂移的影響。
NY-16D儀器的空白吸光值△A在0.3以上,即采用國標標準。必須先單獨進行空白檢測,作為不同批次樣品的空白參考值參與計算;也可隨時根據儀器狀況進行空白測試,作為下批次空白值參與計算。這樣可以在保證空白檢測值準確的情況下進行樣品檢測,一般不會使批次樣品檢測數據作廢。
3.4 樣品重復檢測方式不同
DY-5000儀器可默認雙孔檢測,自動設立重復,并計算平均值,能通過平行測定的結果一致性比對判斷兩次結果的可信度。
NY-16D儀器的單孔檢測需要手動設立重復和計算平均值。