血液標本集中檢測提高輸血安全性研究＊

陳興智，許建榮，吳敬林，李聚林，覃柳燕，周仲民△，雷 煒，趙安生（.廣西壯族自治區血液中心，廣西柳州 545005；.來賓市中心血站，廣西來賓 54600；.河池市中心血站，廣西河池 547000）

集中檢測是采供血機構及醫療機構血液標本檢測的發展趨勢，對于采供血機構而言，其優點是可以將血液中心或較大型中心血站的優勢惠及其他中心血站或分站，提高血液集中檢測區域的血液檢測技術水平，確保血液制品質量。集中檢測部門充分發揮場地、設備、管理的優勢，使檢測過程得到更好的控制。現將桂中地區來賓中心血站與河池中心血站的血液標本集中到廣西壯族自治區血液中心實驗室進行集中檢測的情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 來賓中心血站、河池中心血站及廣西壯族自治區血液中心采集的獻血者血液標本；血液標本當天采集后2～8℃保存，于次日上午以冷鏈運輸的方式運送至血液中心實驗室。標本采集及運送的要求參照文獻［1］。

1.2 儀器與試劑 FAME20／30全自動酶免分析儀（瑞士HAMILTON），Freedom EVO前處理加樣系統（瑞士 TECAN），TIGRIS核酸分析系統及配套試劑（美國諾華）。酶聯免疫吸附法（ELISA）乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）檢測試劑（廈門新創、美國雅培），丙型肝炎病毒（HCV）抗體（抗－HCV）ELISA檢測試劑（珠海麗珠、北京萬泰），人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體（抗－HIV）ELISA檢測試劑（上海科華、美國BIO－RAD），梅毒螺旋體（TP）抗體（抗－TP）ELISA檢測試劑（廈門新創、珠海麗珠）。

1.3 方法

1.3.1 廣西壯族自治區血液中心實驗室檢測質量評價 分析實行集中檢測后，廣西壯族自治區血液中心連續數年參加省級、國家級及國際級室間質評活動的結果。

1.3.2 檢測流程 采用兩種不同廠家試劑進行標本檢測，兩種試劑檢測結果均為陽性者，判為不合格；僅一種試劑檢測結果為陽性者，采用同種試劑復檢雙孔，雙孔均為陰性者，判為合格，雙孔均為陽性者，判為不合格，單孔陽性者，判為可疑。反判為不合格或可疑的標本，對其相應的血液制品進行報廢處理。在實行集中檢測前，所有檢測試劑由政府統一招標，來賓及河池中心血站均選擇經政府采購的兩種不同廠家試劑用于標本檢測。實行集中檢測后，由廣西壯族自治區血液中心建立完善的質量管理體系，除必須從通過政府招標的中標單位中選擇檢測試劑外，還同時對不同試劑進行血清盤考核，根據試劑包被片段情況，選擇具有不同互補片段的試劑進行組合，采用具有不同互補片段的不同試劑組合與隨機選擇的試劑組合對12 456例標本進行抗－HIV檢測，對10 353例標本進行HB－sAg檢測，對檢測陽性率進行比較，評價互補片段試劑組合的檢測有效性。

1.3.3 ELISA與核酸檢測結果比較 對2013年1～4月共計15 015例血液標本ELISA及核酸檢測結果進行比較，并對ELISA檢測陰性、核酸檢測陽性標本進行分類分析。

1.4 統計學處理 采用SPSS13.0統計進行數據分析。計數資料以百分率表示，組間比較采用卡方檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 參加各級室間質評活動結果分析 2010～2013年廣西壯族自治區血液中心參加廣西壯族自治區室間質評、衛生部臨檢中心室間質評及中國國際輸血感染預防和控制（CITTC）室間質評活動的結果見表1。

表1 集中檢測后廣西壯族自治區血液中心參加各級室間質評活動結果（分）

2.2 片段互補試劑組合與隨機試劑組合檢測結果比較 將12 456例標本隨機分為兩組，每組6 228例，分別采用片段互補試劑組合及隨機試劑組合進行抗－HIV檢測，兩種方法檢測陽性率比較差異統計學意義（χ2＝7.83，P＜0.05）。將10 353例標本隨機分為兩組用于HBsAg檢測，片段互補試劑組合檢測5 184例，隨機試劑組合檢測5 169例，兩種方法檢測陽性率比較差異有統計學意義（χ2＝9.15，P＜0.05）。見表2。

2.3 ELISA與核酸檢測結果比較 2013年1～4月共計15 015例標本單獨ELISA檢測陽性率為1.04%（156／15 015），聯合核酸檢測陽性率為1.40%（210／15 015），兩種方法檢測陽性率比較差異有統計學意義（χ2＝9.28，P＜0.05）。14 859例ELISA檢測陰性標本中，核酸檢測陽性54例，其中HBV陽性15例，在所有ELISA檢測陰性、核酸檢測陽性標本中占27.78%（15／54），見表3。

表2 不同組合試劑檢測抗－HIV和HBsAg陽性率［%（n／n）］

表3 ELISA檢測陰性標本核酸檢測結果［n或n（%）］

3 討 論

隨著輸血醫學的不斷發展，輸血療法已成為臨床不可替代的重要治療手段，是現代醫學的重要組成部分，科學合理的輸血可以緩解患者病情、挽救患者生命［2］。然而，輸血存在一定的風險，主要包括感染性風險與非感染性風險，感染性風險又包括輸血過程中出現的感染及血源性感染等風險。輸血安全涉及從獻血者靜脈采血到受血者靜脈輸注期間的每個環節，因此，必須采取綜合措施進行嚴格管理和監控［3］。采供血過程中，招募低危獻血者是保證輸血安全的前提和基礎［4］。另一方面，血液標本檢測以及方法學和試劑選擇也是保證血液制品安全性的重要措施。由于病原體感染后一定的“窗口期”，導致多數檢測方法存在一定的漏檢情況。例如，血清HIV標志物篩檢陰性的血液制品仍有可能導致HIV傳播。據估計，美國每5例因輸血而導致HIV感染的患者中，有1例因輸注抗－HIV陰性血液制品所致［5］。為確保血液制品安全性及質量，廣西壯族自治區血液中心積極參加廣西地區采供血機構室間質評活動、全國臨檢中心室間質評活動，并同時參加了只有血液中心才能參與的CITTC室間質評活動。表1結果顯示，廣西壯族自治區血液中心歷年參評成績優秀，說明在試劑選擇、質量管理、設備性能及操作技術方面是符合要求的。

受血液標本檢測成本的影響，不同地區有可能采用不同的檢測試劑，尤其是部分中小型血站，資金來源緊張，技術人員技術水平和理念存在一定的局限性，一般采用在滿足政府招標要求的試劑中隨機選擇兩種ELISA試劑進行檢測的工作模式。與隨機選擇兩種ELISA試劑進行檢測相比，集中檢測中采用的聯合使用兩種具有不同包被片段的試劑進行檢測，可形成有效的互補。表2結果顯示，采用兩種不同模式進行標本檢測，在抗－HIV和HBsAg檢測陽性率方面，二者間比較差異有統計學意義（P＜0.05），說明集中檢測更有利于保證的血液制品的安全性。本研究中，15 015例標本經ELISA試劑檢測，共檢出不合格標本156例，增加核酸檢測后，共檢出不合格標本210例，兩種不同方法的檢測陽性率比較差異有統計學意義（P＜0.05）。ELISA技術檢測抗－HIV的“窗口期”為22d，檢測P24抗原可縮短至16d；檢測HBsAg的“窗口期”為56d，檢測抗－HCV的“窗口期”為71d。使用核酸檢測技術，HIV、HBV、HCV檢測“窗口期”分別縮短至11、20、21d［6］，采用單人份檢測時，“窗口期”更短。然而，核酸檢測設備較貴，中小血站很難普遍開展，集中檢測則可以合理配置資源，使參與集中檢測的中小血站利用血液中心的優勢開展核酸檢測，從而有效縮短病原體檢測的“窗口期”，確保臨床輸血的安全性。為更好地評估血液集中檢測的優勢，本研究對14 859例ELISA雙試劑檢測陰性的標本進行核酸檢測，結果共檢出HBV陽性15例，比例達1.01‰（15／14 859），高于黃健國等［7］的報道。由于HBV極易發生變異，存在隱匿性HBV感染現象，導致0.3%～1.7%的ELISA檢測陰性血液仍有可能導致受血者感染HBV［8］。由此可見，在集中檢測工作中引入核酸檢測技術十分必要，能夠為血液制品安全性提供有效的保障。資料顯示：對獻血者標本進行病原體核酸檢測，HBV殘留風險降至200萬分之一，HCV殘留風險降至114.9萬分之一，HIV殘留風險降至146.7萬分之一，部分地區甚至可降至（5～7）百萬分之一［6］。另有報道：集中檢測前后，抗－HCV、HBsAg等指標陽性檢出率比較差異有統計學意義（P＜0.05），估計與集中檢測采用互補片段試劑組合，檢測特異性升高，全自動酶免分析儀的使用避免了手工操作誤差等因素有關；集中檢測優化了檢測試劑，使用先進的儀器設備，最大限度地降低了輸血感染性疾病的傳播［9］。以上資料說明：在適當的地區建立集中檢測工作模式，有利于避免因中小血站工作條件有限導致的血液制品安全性問題，有效提高血液制品的質量和臨床輸血的安全性。有研究顯示，通過從低危獻血者中采集血液，結合使用靈敏度較高的檢測技術，可以逐步減少和消除HCV經輸血途徑感染［10］。通過參加各類室間質評活動，加強日常室內質控工作的管理，嚴格按要求規范各項技術操作，強化技術人員的業務學習和技術培訓，系統地開展實驗室質量管理，按要求對檢測設備進行定期維護、校準以確保設備穩定性和準確性，有利于保證血液制品的質量，進一步保障血液制品及臨床輸血的安全性。

［1］叢玉隆，王前.臨床實驗室管理［M］.2版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：105－108.

［2］陳小伍，于新發，田兆松.臨床輸血學［M］.2版.北京：科學出版社，2012：32－56.

［3］余晉林，朱業華，田兆嵩.血站質量管理培訓教程［M］.北京：科學出版社，2009：6－10，25－35.

［4］丘艷.安全獻血和輸血管理［M］／／高峰.輸血與輸血技術.北京：人民衛生出版社，2003：16－58.

［5］Barbara JAJ，Dow BC.Retroviruses and other Viruses［M］／／Simon TL，Snyder EL，Solheim BG，et al.Rossi′s Principles of Transfusion Medicine.4th ed.Chichester，British：Wileyblackwell，2009：746－759.

［6］江朝富，孫啟鳳，付涌水.血站管理學［M］.北京：人民衛生出版社，2012：1－29，821－855.

［7］黃建國，謝秀華，歐陽玲，等.HBsAg陰性獻血者人群HBV感染的檢測和輸血殘余風險分析［J］.檢驗醫學與臨床，2011，8（7）：774－776.

［8］馬書章，紀英姿，趙世紅，等.輸血傳播肝炎的預防與控制研究［J］.醫學動物防治，2011，27（1）：67－68.

［9］張艷麗，朱雪梅，吳振軍.對建立血液集中檢測體系的體會［J］.臨床血液學雜志，2007，4（4）：181－182.

［10］陳興智，譚慶芬，黃雁.多民族無償獻血者 HCV感染狀況調查研究［J］.重慶醫學，2009，38（12）：1443－1445.