AVE—763B型自動尿沉渣分析儀檢測紅細胞影響因素的分析

2014-10-11 09:06:48張麗麗

中國醫學創新 2014年25期

張麗麗

【摘要】目的：分析用AVE-763B型自動尿沉渣分析儀檢測紅細胞的影響因素。方法：采用AVE-763B型自動尿沉渣分析儀和顯微鏡檢測法分析了545份住院患者的尿液標本，并將二者結果進行比較。結果：AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀檢測標本紅細胞的假陽性率為15.2%，假陰性率為0，靈敏度為100%，特異度為84.8%。與顯微鏡檢測法相比，差異有統計學意義（P<0.05）。結晶、上皮細胞核、酵母菌等是影響AVE-763B型自動尿沉渣分析儀檢測結果的主要因素。結論：為獲得準確可靠的尿紅細胞檢測結果，應以AVE-763B型自動尿沉渣分析儀進行篩查并結合顯微鏡檢查。

【關鍵詞】尿沉渣；紅細胞；尿沉渣分析儀

【Abstract】 Objective： To analyze the influencing factors regarding determination of urine red blood cells by AVE-763B automated urinalysis analyzer. Method： 545 samples of urine from hospitalized patients were tested by AVE-763B automated urinalysis analyzer and microscopic examination. The results were compared with statistics method. Result： The false-positive rate， false-negative rate， sensitivity and specificity of determination of urine red blood cells by AVE-763B automated urinalysis analyzer were 15.2%， 0，1%， 84.8% respectively. When compared with the microscopic examination group， the results were statistic difference （P<0.05）. The results showed that the crystal， epithelial cells， yeast were main factors of affecting the detected results by AVE-763B automated urinalysis analyzer. Conclusion： Discussion AVE-763B automated urinalysis analyzer must combine microscope examination in order to improve the urine examination quality.

【Key words】 Urinalysis； Erythrocytes； Urinalysis analyzer

First-authors address： Peoples Hospital of Yanjiang District， Ziyang 641300， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.25.045

尿液紅細胞（RBC）檢測對于泌尿系統疾病的診斷和鑒別診斷有重要的參考價值，因此血尿檢測的準確性非常重要。AVE-763自動尿沉渣分析儀的問世，給尿沉渣篩選帶來了許多方便。它采用機器視覺技術對尿液有形成分進行定量分析，樣本不需離心，通過擴大計數面積提高陽性檢出率。但由于尿中多種有形成分十分復雜，因此在實際工作中該儀器常出現不能識別或誤判的現象，從而造成尿液紅細胞出現假陽性結果。筆者的實驗對這些影響因素進行了觀察，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源隨機收集本院住院患者晨尿545份，其中男284份，女261份。

1.2 儀器及試劑 AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀及其配套試劑（湖南愛威公司）。

1.3 實驗方法用一次性尿杯收集住院患者潔凈中段晨尿，充分混勻后倒入干凈試管約10 mL，每份標本一分為二，其中一份用AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀作沉渣分析和干化學分析，另一份留作顯微鏡復檢對照用。嚴格按照AVE-763操作方法進行尿液分析，所有標本在取樣后2 h內完成。鏡檢尿液以1000 g，離心5 min，留沉渣約0.2 mL，作顯微鏡檢查。AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀結果男RBC>4個/μL、女RBC>6個/μL為陽性；顯微鏡檢查結果RBC>3個/HP為陽性。

1.4 統計學處理使用SPSS 14.0統計軟件包進行分析，數據采用McNemar 字2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

在545份住院患者的標本中，AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀提示紅細胞異常者132份，而顯微鏡檢查紅細胞陽性者58份，兩者符合率44%，差異具統計學意義（P<0.05）。按美國NCCLS文件規定[1]，尿沉渣細胞計數以顯微鏡檢查為標準，AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀檢測標本紅細胞的假陽性率為15.2%，假陰性率為0，靈敏度為100%，特異度為84.8%。AVE-763型尿沉渣全自動檢測儀與顯微鏡檢測結果的比較見表1。

AVE-763型自動尿沉渣分析儀和顯微鏡檢測不符合的74份標本中，經顯微鏡鏡檢確認由結晶引起的紅細胞假陽性標本有31份；因上皮細胞核引起的紅細胞假陽性標本有17份；因細菌引起的紅細胞假陽性標本有14份；因霉菌引起的紅細胞假陽性標本有9份；因脂肪滴引起的紅細胞假陽性標本3份。

3 討論

尿液中的有形成分是診斷泌尿系統疾病，尤其是腎臟疾病的重要檢測指標[2]。尤其是尿液中的紅細胞，更是在腎臟疾病的診斷、治療、病情進展以及預后判斷中有著非常重要的意義[3]。尿沉渣的檢測方法包括傳統離心法、標準鏡檢法、熒光染色流式細胞分析法和智能顯微鏡-圖像分析處理系統等[4]，其中尿沉渣檢查的經典方法是標本離心后在顯微鏡下進行人工鏡檢。為了規范實驗方法學，中華醫學會檢驗分會推薦了尿沉渣規范化的檢測方法，即取10 mL尿液放入離心管內，RCF400×g下離心5 min，準確留取0.2 mL沉渣混勻，滴入細胞計數板內，先用低倍鏡觀察，后用高倍鏡，計數細胞或管型，按XX/μL報告[5]。但是，人工鏡檢操作繁瑣、速度慢，容易出現人工誤差，且標本有形成分達到一定濃度時將嚴重影響測定結果[4]。近年來，為了實現尿液有形成分檢測的標準化、快速化和自動化，其檢測方法已由人工檢查發展到了自動化檢測。智能成像分析技術、流式細胞術等已用于尿液分析，使得全自動尿沉渣分析儀的應用越來越廣泛。目前，臨床使用的尿沉渣分析儀器種類較多，其檢測原理也不盡相同?；谥悄艹上穹治黾夹g技術的湖南愛威公司的AVE系列全自動尿沉渣分析儀是目前國內使用較為廣泛的一種尿沉渣分析儀。AVE-763型自動尿沉渣分析儀按照經典的顯微鏡鏡檢方法的流程來設計，工作時通過低倍鏡以多于人工鏡檢檢查量對樣品進行掃描過篩，然后以低倍鏡抓取目標定位后轉高倍鏡采集目標（如細胞，管行，結晶等）的特征參數（如大小、軸比、形狀、紋理、梯度、顏色、灰度等），運用計算機對其各種特征參數進行統計，聚類，擬和，參照建立模型，自動識別出該圖像所代表的實物[6]。此儀器前端配有自動送樣裝置，在進行尿沉渣定量分析時，操作者將樣本置入樣本架后，從進樣、采集圖像、低倍過篩、低倍目標跟蹤到高倍圖像處理全部由儀器自動完成，檢測速度為40～80個樣本/h，因而具備了使用簡單、高效、快速和標本不需離心等優點。目前，AVE-763型自動尿沉渣分析儀的可靠性即精密度、線性、互染、準確性等方面的評價已有報道[7]。國內也有學者對AVE-763尿沉渣分析儀檢測白細胞結果的影響因素及措施進行了研究[8]，然而關于該儀器在檢測紅細胞準確性方面的文章較少報道。

有學者研究認為，AVE-763B檢測標本出現偏差的原因是，形態不規則、處在不同平面和角度的細胞，被儀器拍攝時的形態與機器內部儲存的典型細胞形態相比不一致，造成機器誤認[9]。同時，還有學者研究發現，尿液中大量的紅細胞、白細胞、管型、上皮細胞、黏液絲等對AVE-763B尿沉渣分析儀的檢測結果影響較大[10-11]。筆者的研究結果顯示，AVE-763尿沉渣分析儀檢測紅細胞的假陰性率為0，靈敏度為100%，該結果提示當紅細胞檢測結果為陰性時不必復檢。然而，研究結果同樣顯示，AVE-763尿沉渣分析儀檢測紅細胞的假陽性率為15.2%，特異度為84.8%。其中造成假陽性的主要因素有：（1）在影響檢測尿紅細胞準確性的因素中結晶占首位。其原因可能因為草酸鈣結晶、非晶形鹽類和藥物結晶增多時，其大小、形態與紅細胞類似而被誤判，以草酸鈣結晶最為多見。草酸鈣結晶是尿中最常見的有形結晶之一，在酸性尿液中形態有啞鈴形、球形及折光性強的八面體，有時也在中性或堿性尿中出現，不溶于乙酸。（2）住院患者，尤其是糖尿病患者和腦梗死患者，尿中?？沙霈F大量酵母菌。酵母菌的形態和大小與紅細胞類似，也容易被儀器誤判為紅細胞。（3）大量上皮細胞、細菌、脂肪滴等存在于尿液中時也容易造成儀器識別錯誤。常見于被白帶污染的尿液標本、細菌性尿路感染患者的尿液標本以及經婦科外用藥后患者的尿液標本。

研究結果表明，AVE-763B全自動尿沉渣分析儀采用不離心、多數量的計數方式，具有較高的靈敏度，用于尿液有形成分快速篩選是可取的，但它在準確辨認有形成分的能力方面有一定局限性，這一研究與國內很多學者的研究一致[12-14]。為了提高儀器的準確性，應重視儀器的日常維護保養工作，包括調好顯微鏡的焦距、保持流動池清潔等，以提高儀器的識別率，減少對檢測結果的影響。由于顯微鏡鏡檢是形態學檢查的金標準。因此，在臨床工作中當尿沉渣分析儀測定結果出現上述成分且紅細胞結果異常時，先采用儀器審核程序取消誤判結果，同時進行顯微鏡復檢。又因尿中紅細胞的形態常受尿的pH值、比重、尿液放置時間以及病理情況的影響而呈現很大的變化，有時單純用顯微鏡復檢也難以辨認，必須結合尿干化學試紙法結果綜合判斷[15]，從而提高檢測準確性，為臨床診斷與治療提供有力依據。

參考文獻

[1]中華人民共和國衛生部醫政司編.全國臨床檢驗操作規程[M].第2版.南京：東南大學出版社，1997：133-134.

[2]熊立凡.臨床檢驗基礎[M].第3版.北京：人民衛生出版社，2005：190-194.

[3]肖敘平.尿液紅細胞形態學檢測在臨床中的應用與分析[J].中國醫學工程，2012，12（12）：152.

[4]叢玉隆，馬駿龍，張時民，等.尿液細胞成份定量分析方法學研究[J].中華檢驗醫學雜志，2006，29（3）：2ll-214.

[5]叢玉隆.尿液沉渣檢查標準化建議[J].中華檢驗醫學雜志，2002，25（1）：249-250.

[6]叢玉隆，馬俊龍，岳秀玲，等.中國健康人尿液顯微鏡檢測法有形成分結果調查[J].臨床檢驗雜志，2006，24（2）：81-83.

[7]楊艷麗，任健康.AVE-763全自動尿沉渣儀應用性能評價[J].國際檢驗醫學雜志，2006，27（8）：8.

[8]劉莉.AVE-763尿沉渣分析儀檢測白細胞結果的影響因素及措施[J].國際檢驗醫學雜志，2009，30（2）：159.

[9]梁騎，李君安，王東生，等.四種全自動尿沉渣分析儀對尿液中紅細胞和白細胞的檢測性能研究[J].中國全科醫學，2012，15（11）：3741.

[10]丁邦勝，孔建新，馬筱玲，等.兩種尿沉渣自動分析儀的結果比較[J].檢驗醫學，2010，25（8）：615-617.

[11]于海濤，楊麗華，李偉，等.AVE-763尿沉渣分析儀在臨床檢測中的應用[J].甘肅科學學報，2011，23（2）：48-50.