安陽市無償獻血血液檢測陽性結(jié)果分析

冀 慧 沙瑩浩 河南安陽中心血站，河南省安陽市 455000； 河南安陽口腔醫(yī)院

為保證受血者的安全，血站在選擇ELISA試劑時一般都會選擇靈敏度高的試劑，但提高靈敏度的同時也可影響到試劑的準確度。我站規(guī)定同一位獻血者連續(xù)三次實驗室檢測為陽性則將被取消獻血資格，同時血站在向獻血者進行結(jié)果反饋時也是以實驗室檢測結(jié)果為準。其中因試劑原因?qū)е碌募訇栃越Y(jié)果不僅影響到獻血者的招募而且還增加了與獻血者產(chǎn)生糾紛的可能。經(jīng)統(tǒng)計我站因?qū)嶒炇谊栃远鴪髲U的血制品占總報廢率的73.5%。在血液資源有限的前提下如何從多方面減少實驗室陽性結(jié)果產(chǎn)生的報廢已成為我站近幾年較為突出的一項工作。現(xiàn)將我站647例實驗室陽性血液標本進行統(tǒng)計分析，為我站科學合理地開展獻血工作提供一定的數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2013年8－12月安陽市中心血站無償獻血ALT、HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒陽性標本647例。雙試劑灰區(qū)，單試劑陽性＋單試劑灰區(qū)，雙試劑陽性，ALT單試劑陽性數(shù)值≥40U／L為檢驗科實驗室陽性血液報告標準。154例HBsAg、抗－HCV實驗室陽性血液標本PCR檢測結(jié)果。

1.2 儀器與試劑 STAR全自動加樣器，F(xiàn)AME24／20全自動酶免系統(tǒng)（瑞士Hamilton），AU400全自動生化分析儀（日本奧林巴斯），MX3000R熒光定量PCR儀（美國STRATAGENE）。ALT試劑（北京倍肯、上海科華），HBsAg試劑（上海科華、珠海麗珠），抗－HCV試劑（北京科衛(wèi)、珠海麗珠），抗－HIV試劑（法國BIO－RAD），梅毒試劑（上海科華、珠海麗珠），乙肝病毒核酸擴增熒光定量試劑（深圳達安），丙肝病毒核酸擴增熒光定量試劑（深圳達安）。所用試劑均為中國生物制品鑒定所鑒定合格的產(chǎn)品，在有效期內(nèi)使用。

1.3 檢測方法 按《全血及成分血質(zhì)量要求GB18469－2012》［1］進行實驗室檢查，ALT采用1種試劑（速率法）進行檢測，HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒采用2種不同生產(chǎn)廠家ELISA試劑檢測，乙肝病毒、丙肝病毒采用1種試劑檢測病毒核酸，所有試劑均按照使用說明書操作。

2 結(jié)果

647例無償獻血實驗室陽性標本中ALT陽性率最高，占總陽性率的63.5%，HBsAg、抗－HCV陽性率是血液報廢的第二大原因，占總陽性率的23.8%，梅毒報廢率是血液報廢的第三大原因，占總陽性率的9.0%，見表1。HBsAg、抗－HCV陽性血灰區(qū)報廢率分別占57.5%、55.2%，見表2。HBsAg灰區(qū)標本核酸病毒檢出率僅3.7%，抗－HCV灰區(qū)標本核酸病毒檢出率僅3.2%，見表3。

表1 647例實驗室陽性血液標本報廢率

表2 ELISA實驗室陽性血液標本檢出率

表3 154例HBsAg、抗－HCV ELISA標本核酸陽性檢出率

3 討論

從表1可以看出因ALT高而報廢的血液是我站目前血液報廢的首要因素。隨著無償獻血工作的深入開展，我站對ALT的檢查已日趨規(guī)范，初篩統(tǒng)一采用干式生化法，實驗室統(tǒng)一采用速率法，速率法復檢陽性血液按報廢處理。以上情況表明在初篩統(tǒng)一采用干式化學法的情況下速率法仍存在很高的淘汰率，因影響ALT升高的因素很多，筆者認為主要應控制以下幾個環(huán)節(jié)：（1）在一些生理情況下如劇烈運動、通宵加班、情緒過度緊張等，也可引起一時性的輕度升高［2］，所以應首先將獻血前的健康征詢工作作為初篩工作的重點，要求體檢人員在對獻血者進行健康征詢時要給予必要的指導和溝通。（2）時刻保持干式化學儀的靈敏度，尤其是隨采血車配置的干式化學儀，要求工作人員完全掌握儀器及配套試劑的使用要求及注意事項，對儀器的維護、保養(yǎng)工作落實到人，切實保證儀器正確有效的使用。（3）因ALT在溫度＞30℃時不合格率更高［3］，所以不僅要求采血時要注意采血環(huán)境溫度的控制，而且對采血后標本的運輸及實驗室加樣過程都應全程控制溫度。

HBsAg、抗－HCV陽性率是血液報廢的第二大原因，占實驗室總陽性率的23.8%。HBsAg、抗－HCV陽性血灰區(qū)報廢率分別占57.5%、55.2%，而HBsAg灰區(qū)標本核酸病毒檢出率僅3.7%，抗－HCV灰區(qū)標本核酸病毒檢出率僅3.2%。

從表2、表3可以看出HBsAg、抗－HCV灰區(qū)假陽性率很高。筆者分析引起假陽性的原因可能有以下幾個方面的因素：如個體差異引起的試劑本身的非特異性反應，試劑本身因方法學原因?qū)е碌撵`敏度高而特異性不高，標本脂血，檢驗人員的操作技術和判斷誤差等都可造成ELISA結(jié)果的假陽性。為保證受血者的安全，血站在選擇ELISA試劑時一般都會選擇靈敏度高的試劑，血制品的報廢以實驗室ELISA檢測結(jié)果為準。同時血站在向獻血者反饋結(jié)果時也是以實驗室ELISA結(jié)果為準，獻血者往往會重新再去醫(yī)院進行抽血復查，不僅重復浪費資源，還引起很多不必要的糾紛，血站還要專門組織工作人員對其進行大量的解釋工作；我站還規(guī)定同一位獻血者如連續(xù)三次實驗室檢測為陽性則將被取消獻血資格，從以上數(shù)據(jù)可以看出有很多假陽性結(jié)果的獻血者被血站采血系統(tǒng)屏蔽，無法再次獻血，也給無償獻血招募工作帶來一定的負面影響。PCR技術因所檢測對象是病原體核酸，所以準確率高、可大大降低假陽性結(jié)果的產(chǎn)生，但PCR技術試劑成本高、操作繁瑣［4］。因此筆者認為有必要對HBsAg、抗－HCV陽性標本進行核酸檢測，以核酸檢測結(jié)果對獻血者進行結(jié)果反饋，不僅可提高血站實驗室結(jié)果報告準確度，而且還可以減少糾紛，降低負面影響。

梅毒ELISA試劑假陽性率也較高［5，6］，血站為了保證血液安全另外又增加了灰區(qū)設置，這些因素也使得梅毒ELISA檢測非特異性反應大幅升高，不僅導致血液浪費，更給獻血者管理和結(jié)果反饋帶來了問題，易引起抱怨和投訴。TPPA法是美國疾病預防控制中心2002年推薦的梅毒檢測確認方法，亦是中國衛(wèi)生部頒布的性病診療規(guī)范和性病治療推薦方案中的檢測方法。TPPA法檢測的是梅毒的特異性抗體，具有很高的敏感性和特異性。但TPPA需用肉眼判讀結(jié)果，無法保留原始記錄，且經(jīng)濟昂貴、操作繁瑣，檢測時需將標本做系列稀釋不利于大批量樣本的篩查［7］。血站對獻血者梅毒結(jié)果的反饋，更是一敏感話題，應慎之又慎，筆者建議對梅毒ELISA陽性標本進行TPPA法確認試驗，并以TPPA確認結(jié)果對獻血者進行結(jié)果反饋，不僅可以減少獻血者的流失，又給獻血者一個客觀準確的結(jié)果，還可提高血站實驗室結(jié)果的準確度。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標準化管理委員會.GB18469－2012全血及成分血質(zhì)量要求〔S〕.北京：中國標準出版社，2012.

［2］汪小華，龍子淵，王英桃.獻血者ALT檢測的影響因素分析〔J〕.臨床輸血與檢驗，2005，7（1）：48.

［3］吳士定，鮑紅日.氣溫對血液中轉(zhuǎn)氨酶陽性等檢出率的影響〔J〕.中國衛(wèi)生雜志，2000，8（10）：478－479.

［4］余加宏，王南，劉林.ELISA法抗－HVC陽性獻血者分片段試劑和RT－PCR法檢測結(jié)果分析〔J〕.淮海醫(yī)藥，2008，9（26）：403－404.

［5］尚桂芳，聶冬梅，楊立新.兩種梅毒檢測試劑敏感性和特異性比較〔J〕.中國輸血雜志，2003，16（5）：333－334.

［6］孫文利，張獻清，穆士杰，等.ELISA與TRUST法在梅毒檢測中的比較〔J〕.中國輸血雜志，2002，15（3）：185.

［7］夏瑞，李殊英，陳苗水.TPPA、ELISA、TRUST 3種梅毒檢測方法的比較〔J〕.現(xiàn)代預防醫(yī)學，2008，35（24）：4864－4865.