不規則抗體篩查對提高臨床輸血安全的價值研究

蘇秀瓊，陳奕霞，藍建崇，劉麗芬（．廣東省惠州市中醫醫院 5600；．廣東省惠州市中心血站 56003）

血型免疫抗體的檢出率為0．30%～2．00%，輸血前進行相關抗體篩查可以發現不同血型的免疫抗體，對于確保臨床輸血安全至關重要，可以避免嚴重輸血不良事件的發生。隨著醫療技術的發展，血型鑒定方法已具有極高的靈敏度，大大減少了ABO血型鑒定誤差引起的速發型溶血反應的發生［1］。然而，由于疾病、妊娠或輸血等原因產生的不規則抗體引起的輸血后遲發型溶血反應還時有發生［2］。人體血型抗體可分為兩大類，一類是包括抗－A、抗－B和抗－AB在內的ABO血型規則抗體，另一類即不規則抗體。不規則抗體是指ABO血型以外的免疫性抗體，其中較為常見的為IgG抗體，也有少數 MNS系統產生的IgM抗體［3］。不規則抗體是引起臨床輸血配型困難及輸血后不良反應的主要誘因［4］。在患者接受輸血治療前進行不規則抗體篩查，不僅有助于血液制品的合理選擇，同時也有助于防止輸血反應的發生。本研究通過大樣本分析，探討了輸血前不規則血型抗體篩查對提高臨床輸血安全的意義。

1 資料與方法

1．1 一般資料 2012年1月至2013年1月于惠州市中醫醫院進行預輸血的患者2 000例，年齡3d至84歲，平均（32．7±3．2）歲，男1 573例、女427例。所有患者均為符合臨床輸血適應證的患者。納入標準：年齡小于85歲，臨床資料完整，經臨床確診，具有輸血指征，生命體征穩定。排除標準：先天畸形，急性感染，各種心肌炎、心肌病、感染性心內膜炎、風濕性心臟病，凝血功能障礙，嚴重肝、腎功能不全，近期服用糖皮質激素或免疫抑制劑，臨床資料不完整。本研究經醫院倫理委員會批準，由研究者向所有患者或其家屬介紹研究目的及方法，取得其同意后均簽署知情同意書。

1．2 方法 所有操作均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》中的方法進行。所有患者均于輸血前3d空腹采集靜脈血3～5 mL，3 000r／min離心10min，分離血清標本。正確標記篩選紅細胞及抗人球蛋白凝膠卡，用低離子溶液將預篩檢的紅細胞或譜細胞調整至0．5%～0．8%，分別加入標記好的微管中，立即向微管中加入被檢者血清，將試劑卡于37℃孵育15min后放入BYL型血型離心機離心，肉眼觀測反應結果。采用1－H號鑒定譜細胞作為對照，對抗體篩查陽性標本譜細胞應用鹽水試管法及抗人球蛋白凝膠卡進行抗體鑒定，以進一步確定抗體類型。

1．3 結果判定標準 陽性（＋）：紅細胞相互凝集，懸浮于凝膠柱上端或中間。陰性（－）：游離篩檢的紅細胞沉降至凝膠柱底部。初篩抗體顯示陽性的標本與對照譜細胞標記，二者相符則判為該種抗體陽性。

1．4 統計學處理 采用SPSS17．0軟件進行數據處理和統計學分析。計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0．05為比較差異有統計學意義。

2 結 果

2．1 不規則抗體篩查結果 在所篩查的2 000例患者中，共篩出不規則抗體陽性者8例，男6例、女2例，陽性檢出率為0．4%，見表1。8例不規則抗體陽性患者均有輸血史或妊娠史，其中血液病和腫瘤疾病患者共6例，占75．0%，其他疾病患者2例，占25．0%，二者比較差異有統計學意義（P＜0．05）。

表1 患者不規則抗體篩查結果（n＝2 000）

2．2 不規則抗體特異性鑒定 不規則抗體陽性患者中，Rh系統抗體陽性5例（62．5%），其中抗－E抗體陽性2例（25．0%），抗－DC抗體、抗－D抗體和抗－e抗體陽性各1例，分別占12．5%。另檢出 MNS系統抗－M抗體陽性3例，占37．5%。見表2。

表2 不規則抗體特異性鑒定結果（n＝8）

2．3 不規則抗體陽性患者輸血治療情況 8例不規則抗體陽性患者中，6例患者延期手術，并在術前經篩選配血檢測獲得配型相合的血液，手術順利進行，未發生輸血后不良反應；其余2例患者中，1例為溶血性貧血患者，因存在自身抗體而導致篩選結果為假陽性，輸注洗滌紅細胞后無不良反應，另1例患者無合適配血者，未能進行輸血。

3 討 論

危重癥患者搶救過程中往往需要輸注大量的血液以維持患者的生命，因而輸血安全是臨床輸血治療的關鍵。近年來臨床血型鑒定技術不斷發展，因常規血型鑒定誤差而導致的輸血反應已較少發生，然而，因其他血型系統的不規則抗體導致的輸血不良反應卻仍未能得到有效控制［5］。據統計，不規則抗體在臨床輸血患者中的檢出率較低，一般僅為0．30%～2．00%［6］。但由于輸血前未能進行有效篩查，往往引發遲發性輸血反應等不良反應，嚴重時甚至危及患者的生命［7］。血型免疫抗體是導致輸血不良反應的主要原因，尤其是溶血反應。因此，輸血前確定患者體內是否存在不規則抗體對于保證輸血安全十分重要。

大部分遲發性溶血反應由Rh血型抗體所致。Rh陰性者在輸注Rh陽性血液后，大部分會在數月之內產生抗－D抗體。研究顯示，患者每輸注1U含非D抗原血液后，出現抗－D抗體的概率為1．00%～1．60%，多次輸血后產生抗體的概率更高，可達20．00%以上。除輸血之外，不規則抗體的產生與妊娠母體和胎兒Rh血型不合亦有一定的關系。因此，女性體內產生Rh血型抗體的概率顯著高于男性。

一般情況下，預輸血者需在輸血前一天進行不規則抗體篩查，以便有充足的時間鑒定患者體內抗體的特異性而準確配血。常用的配血方法一般有兩種，即酶介質法和抗人球蛋白介質法［8－9］。酶介質法主要應用于Rh系統免疫性抗體的檢測，適用有妊娠史或輸血史的患者。抗人球蛋白介質法則主要適用于有流產史和多次輸血史患者的血型抗體檢測。抗人球蛋白介質法可以排除血漿中特異性蛋白的干擾，使準確、快速配血成為可能。通過對患者血型不規則抗體的檢測，有助于進一步確定抗體特異性，從而可以為患者找到更合適的血液，避免了輸血后溶血反應的發生，保證了輸血安全［10－11］。

除ABO血型系統外，產生Rh系統、MNS系統不規則抗體的原因均為妊娠和輸血。其共同的特征為可以導致紅細胞致敏而發生溶血，使紅細胞不能在鹽水介質中凝集。常見的血型免疫性抗體包括Rh系統的抗－E抗體、抗－DC抗體、抗－D抗體和抗－e抗體，以及MNS系統的抗－M抗體。由于Rh抗原中的E抗原陽性率低于D抗原等其他抗原，因此，抗－E抗體的檢出率高于抗－DC抗體、抗－D抗體和抗－e抗體。因輸血而產生的免疫性抗體的效價會在輸血后1～2周內達到高峰，進而引起溶血反應的發生，而溶血反應的強度與抗體效價呈正相關關系，必須引起臨床的重視。對于其他少見的抗體，如抗－Lea抗體等，也可以引起嚴重的輸血后溶血反應，因此輸血前也應嚴格檢查。

本研究共篩出不規則抗體陽性者8例，陽性檢出率為0．4%。8例患者中，血液系統疾病和腫瘤患者共6例，占75．0%，所占比例高于其他疾病患者（2例，25．0%），且比較差異有統計學意義（P＜0．05）。不規則抗體陽性患者的抗體特異性鑒定結果顯示，Rh系統抗體占62．5%，MNS系統抗體占37．5%。2 000例輸血患者不規則抗體篩查陽性率僅為0．4%，提示不規則抗體在臨床輸血患者中的檢出率較低。然而，不規則抗體的特異性較為復雜，以Rh系統的不規則抗體較為常見（62．5%），其中抗－E抗體檢出2例（25．0%），是 Rh系統中較為常見的抗體類型。輸血或妊娠過程中，患者因受到E抗原的刺激，常導致抗－E抗體的產生。抗－M抗體的檢出率較低，為37．5%，抗－M抗體常以IgM形式存在，在自身免疫疾病患者中較為常見［12－13］。因此，對患者進行輸血前不規則抗體篩查，有助于提高配血的準確率，避免輸血不良反應的發生，提高輸血治療的安全性。《臨床輸血技術規程》中規定：輸血科為患者輸血時，應復查受血者和供血者ABO血型，并常規檢查患者Rh（D）血型，確定正確無誤后方可進行交叉配血。對于交叉配血不合者，以及有輸血史、妊娠史或短期內需要接受多次輸血者，均需要進行抗體篩查。本研究結果提示應擴大對患者進行不規則抗體篩查的范圍，將不規則抗體篩查作為輸血治療前的常規檢查項目之一。

綜上所述，不規則抗體常見于ABO系統之外的Rh系統和MNS系統，妊娠和輸血是誘導其產生的主要原因。常見的抗體包括Rh系統的抗－E抗體、抗－DC抗體、抗－D抗體和抗－e抗體，以及 MNS系統的抗－M抗體。輸血前對患者進行不規則抗體檢測，有利于選擇適合患者的血液，有效減少或避免溶血性輸血反應的發生，保證了患者的輸血安全。

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