臨床免疫檢驗質量影響因素分析

繆希莉（華中科技大學同濟醫學院附屬普愛醫院，武漢 430033）

臨床免疫檢驗主要包括化學發光免疫檢驗、酶聯免疫吸附法檢驗、免疫原以及抗體制備等多方面工作。臨床免疫檢驗的結果是診斷疾病的主要依據，檢驗結果的準確程度直接影響著患者的診治。臨床免疫檢驗質量控制的目的是盡可能地提高檢測結果的準確性。據統計，在實驗誤差中，分析前誤差占71%，因此做好分析前質量控制是確保檢測結果準確性的重要前提，加強臨床免疫檢驗分析前質量控制，對提高檢驗質量具有極其重要的意義［1］。為了分析影響臨床免疫檢驗質量的因素，筆者從本院臨床免疫檢驗標本中隨機抽取200例，并對其進行回顧性分析，探討保證臨床免疫檢驗質量的措施。

1 資料與方法

1．1 一般資料 隨機抽取本院2012年6月至2013年4月臨床免疫檢驗標本200例，檢驗項目主要包括人類免疫缺陷病毒抗體、丙型肝炎病毒抗體以及5種乙型肝炎病毒血清標志物。

1．2 方法

1．2．1 數據調查 本研究涉及的數據包括免疫檢驗的結果以及影響檢測結果的實驗室各個環節的因素。所調查的主要內容包括：儀器設備（按規定操作、更換洗液、維修故障）、實驗室條件（溫度、濕度）、實驗室人員綜合素質（學歷、專業資質、從業時間）、試劑處理方法（存儲、室溫平衡時間）及標本質量等。

1．2．2 檢驗方法 對需要檢驗的標本，在標本接收、離心以及標本處理等整個過程中的每個環節進行質量控制。乙型肝炎病毒血清標志物、丙型肝炎病毒抗體以及人類免疫缺陷病毒抗體檢測均采用第三代夾心法酶聯免疫吸附法檢測試劑盒。對全部需要檢測的項目進行初檢，對初檢結果為陽性或者疑似陽性的標本進行復檢，每次標本檢測的同時都同時進行室內質控血清的檢測。每個季度檢測一次衛生部臨床檢驗中心和湖北省臨床檢驗中心發放的室間質評質控品，按照實驗要求對質控品進行檢驗，并定期參加室間質評活動。

1．3 統計學處理 采用SPSS17．0統計學軟件對所有調查數據進行統計分析，以多元逐步回歸法計算的回歸方程和以此為基礎構建的多元線性回歸模型反映應變量和自變量之間的關系。

2 結 果

通過對200例標本對應的調查數據進行逐步多元線性回歸分析，計算回歸方程，結果證實實驗室人員素質、標本質量、實驗室環境（濕度、溫度）、洗液更換情況等都會對檢驗結果產生一定程度的影響（P＜0．05），見表1。

表1 不同因素多元線性回歸分析結果

3 討 論

臨床免疫檢驗質量控制的目的在于對整個檢測過程中的誤差進行分析、判斷，并采取適當的措施以預防各類差錯所導致的檢驗結果誤差。室內質量控制是指對常規檢驗工作中的檢測結果精密度和準確度進行監測和控制，從而提高常規工作中的標本檢測結果一致性和準確性，便于及時、準確地為臨床醫生、患者等提供相應的檢驗結果報告。對于臨床免疫檢驗工作人員而言，必須在工作實踐中牢固樹立質量、服務、責任意識，不斷提高自身業務水平和能力，認真履行檢驗工作中每一個環節的職責，并在實踐過程中不斷培養分析問題以及解決問題的能力，從而才能確保臨床免疫檢驗的工作質量。

標本采集過程中的差錯所導致的標本檢測結果的誤差是標本檢測結果總誤差的關鍵來源。由于不同檢查項目對于標本采集有不同的嚴格要求，因此護士應在標本采集前明確告知患者各方面注意事項。這首先要求醫護人員熟悉各種注意事項，并認真、明確地告知患者，以確保檢測結果準確可靠。在標本采集前，也應同時向患者說明所需標本的采集方法。護士應根據檢查項目選擇正確的容器，掌握采集標本的正確方法及順序。如果檢驗項目受晝夜節律影響較大，則應根據要求選擇適當的時間進行標本采集。外周血標本的采集應盡量在患者接受其他檢查之前完成。采集外周血標本時應正確選擇真空采血管的種類，避免抗凝劑使用不當導致的檢測結果誤差，確保血液標本和抗凝劑的比例符合要求，并在采集過程中注意避免交叉感染的發生和標本溶血。外周血標本采集完成后，應采取正確的標本保存方法，對溫度、濕度等有特殊要求的標本應尤為注意。

檢測結果的精密度反映的是在相同檢測條件下，對同一標本進行連續多次檢測后所得到的檢測結果之間的一致性，又稱重復性。精密度所評價的是檢測方法、程序或設備總的不精確度，即測量系統在一定時間內的變異性［2］。酶聯免疫吸附法檢測是臨床免疫檢驗中應用最為廣泛的檢驗方法，其檢測基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。多種因素可對酶聯免疫吸附法檢測產生不同程度的影響，從而導致假陽性或者假陰性結果。這類干擾因素可以分為內源性和外源性兩類［3－4］。內源性干擾因素主要包括補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體以及類風濕因子等。如果臨床血清標本中上述干擾物質的濃度達到一定水平，即可對檢測結果帶來一定的影響，進而導致檢測結果呈現假陽性或假陰性。為了避免類風濕因子對酶聯免疫吸附檢測結果的干擾，一般采用稀釋標本的方法，盡可能地降低標本中非特異類風濕因子的濃度，從而減少其對檢測結果的干擾。外源性干擾因素主要包括標本溶血、標本儲存時間過長、標本凝固不全、標本被細菌污染等各個方面。其中避免標本溶血是保證標本質量的重要步驟。就本研究中的數據分析結果而言，影響檢驗結果的因素主要有：實驗室人員素質、標本質量、實驗室環境、洗液更換情況以及試劑室溫平衡時間。實驗室人員素質對實驗室的發展具有非常重要的影響，不同素質的實驗室人員即使在相同條件下進行標本檢測，也有可能得到不同的檢測結果。因此，在進行臨床免疫檢驗質量控制的同時，有必要不斷提高實驗室人員的業務水平，強化質量意識。要保證臨床檢驗結果的質量，必須使用穩定的檢測系統，并確保檢測結果誤差在可接受的范圍內［5］。其次，實驗室環境條件也應受到高度的重視。一般情況下，需要把實驗室內的溫度調整至22℃左右，濕度調整至31%～63%，以便獲得更為準確的檢驗結果。有研究顯示，當實驗室濕度小于40%時，即實驗室的濕度太低，溫度過低或者過高時，有可能發生明顯的靜電作用，導致塑料器皿極易吸附周圍的帶電粒子，對檢測所用設備和材料產生一定的影響［6－7］。因此，在檢測過程中，需要控制實驗室的溫度和濕度。此外，臨床免疫檢驗所使用的試劑應在符合要求的室溫條件下平衡至少30min，使試劑溫度充分恢復至和室溫一致。標本檢測工作完成后，應及時處理洗液，并用蒸餾水將洗液桶沖洗干凈，避免因洗滌微孔板時洗液分布不充分而導致的假陽性結果。Westgard多規則質量控制法是指在常規條件下，同時測定兩份定值質控血清，并要求質控血清所含測定物的濃度最好分別為醫學決定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法檢測線性范圍的上限和下限［8－10］。將檢測結果分別繪制成兩張不同濃度的質控圖，當有一份質控血清測定結果處于質控圖上2s至3s范圍內，發出“警報”信號時，應及時采用其余各條規則對質控圖進行全面檢查，若符合其中一條，就應將該批次的檢測結果判為“失控”。操作者在對質控品檢測結果進行分析時，如發現質控數據違背了質控規則，應填寫失控報告單，并對失控結果進行回顧、檢查和再次檢測指控品，或另取新的質控品進行檢測，或對儀器、試劑和操作方法等進行核對和檢查，以糾正失控。室間質量評價是通過實驗室間的比對，分析各實驗室對相同標本檢測結果的準確性、一致性，并采取一定措施，使各實驗室的檢測結果漸趨一致。能力比對分析則是室間質量評價所采用的技術方案之一，已成為全球性室間質量保證系統的主要內容。

綜上所述，標本的采集質量、儀器設備的質量、室內質量控制措施、實驗室人員素質對臨床免疫檢驗結果都會產生一定的影響，采取科學的方法對影響檢驗質量的相關因素進行控制，能夠有效提高檢驗結果的準確性，對臨床診斷以及患者的診治具有重要的影響。

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