支氣管肺泡灌洗液中粒細胞酯酶水平與支氣管炎性疾病的相關性研究

吳 馳，黃 江，李焱鑫，于 露，鄒 俊，呂 琴，劉躍建

(四川省醫學科學院·四川省人民醫院 a.呼吸科;b.檢驗科，四川 成都 610072)

支氣管肺泡灌洗常用于肺部炎性疾病及間質性肺病的診斷與治療，支氣管肺泡灌洗液細胞計數對協助診斷與鑒別肺部炎癥有重要價值。但灌洗液中細胞計數檢查繁復耗時，而臨床醫生常需要盡早判斷氣道炎癥輕重及鑒別急慢性疾病，以便及時治療。粒細胞酯酶由中性粒細胞合成分泌，常用于泌尿系統感染篩查［1］，檢查方法成熟，但缺乏在支氣管肺疾病中應用的報道，尤其缺乏在支氣管肺泡灌洗液檢測應用的報道。本研究為探討支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶水平對支氣管肺部疾病診斷的應用價值，對我院2008年1月至2012年12月458例門診患者進行了研究，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2008年1月至2012年12月我院呼吸科門診肺部炎性疾病患者458例，其中男230例，女228例，年齡17～78歲，平均年齡69.6歲。肺炎168例，肺間質纖維化13例，肺內結節38例，肺內占位80例，胸腔積液34例，肺間質炎癥7例，慢性咳嗽65例，慢性阻塞疾病53例。入選患者相關疾病診斷標準見參考文獻［2～5］。本研究經我院倫理委員會批準，入選者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 支氣管鏡檢查評估氣道炎癥 嚴格掌握適應證、禁忌證，完善術前常規檢查，由呼吸科專業醫師按支氣管鏡檢查常規步驟進行。依據支氣管鏡下氣道黏膜充血水腫嚴重程度評估炎癥級別為正常、輕度、中度、中重度及重度并記錄。

1.2.2 支氣管肺泡灌洗液采集 具體操作和方法依據中華醫學會呼吸病學分會2002年7月制定的《支氣管肺泡灌洗液細胞學檢測技術規范(草案)》［6］。患者術前6小時禁飲禁食，術前以2%利多卡因霧化吸入局部麻醉，應用日本產的Olympus BF-260型電子支氣管鏡，灌洗部位以感染病灶部位及影像學確定，首先經活檢孔注入2%利多卡因1～2 ml，做灌洗肺段局部麻醉，然后將氣管鏡對準段或亞段支氣管開口處，再經活檢孔快速注入37℃滅菌生理鹽水。每次25～50 ml，總量100～250 ml，一般不超過300 ml;立即用50～100 mmHg負壓吸引回收灌洗液，通常回收率為60% ～80%;用雙層無菌紗布過濾除去懸浮物，保證標本清澈透明并記錄總量;裝入硅塑瓶，凍存于-70～-20℃冰箱內，避免反復凍融，3～6月內檢測。肺泡灌洗液經雙層紗布過濾后以3000r/min離心，吸取上清液置-70℃冰箱保存，以備以后的檢查。沉淀的細胞成分用Hank'S液沖洗2次后做細胞記數和分類。合格的BAL液:①達到規定的回收比例;②紅細胞數小于10%;③上皮細胞小于3%。

1.2.3 支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶檢測 由檢驗科技師采用化學法對支氣管肺泡灌洗液進行檢測，采用半定量方法記錄結果。

1.2.4 支氣管肺泡灌洗液細胞分類計數 將灌洗液裝入離心管內，在4℃下以1200 r/min離心10 min，去除上清液，將離心沉淀的細胞成分用Hank，S液重復沖洗、離心2次，每次5 min。最后加Hank'S液3～5 ml制成細胞懸液。然后在改良的Neubauer計數臺上計數BALF中的細胞總數，以1×106/L表示。采用細胞離心涂片裝置，在4℃下以1200 r/min離心10 min，將離心細胞直接平鋪于載玻片上，冷風吹干，置于無水乙醇中固定30 min后進行HE染色。在40倍光學顯微鏡下計數200個細胞，進行具體的細胞分類計數。

1.3 統計學方法 使用SPSS 18.0軟件進行統計學分析。計數資料比較采用卡方檢驗;變量之間關系分析采用Logistic回歸分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 炎癥評估及支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶測定結果 168例肺炎患者中163例支氣管鏡下有炎癥表現，中度以上炎癥表現133例，灌洗液粒細胞酯酶陽性結果166例(陽性構成比95%)。13例肺間質纖維化患者中11例支氣管鏡下有炎癥表現，灌洗液粒細胞酯酶陽性結果12例(陽性構成比76%)。7例間質性肺炎患者均有支氣管鏡下炎癥表現，肺泡灌洗液粒細胞酯酶檢測6例陽性(陽性構成比85%)。38例肺內結節患者僅有4例有鏡下輕度炎癥，無中度以上炎癥表現，其灌洗液粒細胞酯酶檢測結果均為陰性。65例慢性咳嗽患者有31例鏡下輕度炎癥表現，其肺泡灌洗液粒細胞酯酶檢測有10例陽性(陽性構成比15%)，見表1。

表1 氣管鏡炎癥評估及支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶測定結果

2.2 支氣管肺泡灌洗液細胞分類計數 見表2。因素有灌洗液粒細胞數、氣管鏡下炎癥程度及C反應蛋白，見表3。

表2 支氣管肺泡灌洗細胞分類計數 (n)

表3 粒細胞酯酶與臨床指標的Logistic回歸分析

2.3 粒細胞酯酶與臨床指標的相關性 Logistic回歸分析顯示與支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶有關的

3 討論

目前常用C反應蛋白、降鈣素原等指標評估炎癥，C反應蛋白在全身應用敏感性高但特異性不高，降鈣素原對評估感染嚴重程度較好［7］，但對評估間質性疾病以及局部氣道炎癥程度缺乏依據。粒細胞酯酶由中性粒細胞合成，與體液中性粒細胞相關［8］。本研究顯示支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶與肺泡灌洗液中性粒細胞相關，肺泡灌洗液粒細胞酯酶水平反映氣道粒細胞水平，進一步研究顯示粒細胞酯酶水平與氣管鏡下炎癥程度密切相關，通過檢測支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶有助于客觀評估支氣管肺疾病氣道炎癥程度。

支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶與患者炎癥指標C反應蛋白相關，提示粒細胞酯酶能較好反映局部的炎癥水平，是較好的炎癥評估指標。本研究提示粒細胞酯酶在間質性疾病及急性炎癥陽性構成比高，慢性疾病粒細胞酯酶陽性構成比低，檢測支氣管肺泡灌洗液粒細胞酯酶可以協助診斷急、慢性炎性疾病，部分占位疾病患者陽性考慮與合并阻塞性炎癥有關，需進一步研究明確。

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