咪唑斯汀治療尋常型銀屑病前后血清及皮損中可溶性細(xì)胞間粘附分子-1含量的變化

劉琬椿，熊心猜，段 茜，劉 婷，張 浩

(川北醫(yī)院學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚科，四川 南充 637000)

銀屑病是以表皮角質(zhì)形成細(xì)胞過(guò)度增殖，白細(xì)胞局部浸潤(rùn)為特征的慢性炎癥性皮膚病。細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)是粘附分子免疫球蛋白超家族成員之一，在炎癥反應(yīng)部位的血管內(nèi)皮有強(qiáng)表達(dá)，同時(shí)在角質(zhì)形成細(xì)胞也有表達(dá)。已有較多研究對(duì)銀屑病患者血清及皮損中ICAM-1進(jìn)行了研究，顯示其與銀屑病的炎癥、活動(dòng)性及嚴(yán)重度有關(guān)，可作為判斷藥物治療有效性的綜合指標(biāo)之一［1～5］。2012年3～7月，我們采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)及免疫組化染色檢測(cè)了56例尋常型銀屑病患者咪唑斯汀治療前后血清sICAM-1及皮損中ICAM-1的變化情況，使用銀屑病疾病活動(dòng)嚴(yán)重指數(shù)(PASI)評(píng)價(jià)治療效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年3～月在我科就診的56例銀屑病患者，男38例，女 18例，年齡17～60歲［(31.52±9.75)歲］，病程 10 月至 16 年［(10.18±2.27)年］。所有病例均符合尋常型銀屑病(皮損面積占體表面積20% ～50%)診斷標(biāo)準(zhǔn)并知情同意，簽署知情同意書(shū)，入選前1月未服用抗組胺藥、免疫調(diào)節(jié)劑或糖皮質(zhì)激素，排除患有扁平苔癬、慢性濕疹、變態(tài)反應(yīng)性疾病及皮膚腫瘤。使用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組各28例。兩組年齡、性別、病情分級(jí)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。兩組均給予鹵米松軟膏外擦，每日2次。試驗(yàn)組在此基礎(chǔ)上給予咪唑斯汀10 mg，每日一次。療程6周。使用PASI評(píng)價(jià)療效。

1.2 標(biāo)本采集及方法 分別在治療前及治療6周后抽取患者肘靜脈血2 ml，離心收集血清，－80℃下保存。采用雙抗體夾心ELISA法，嚴(yán)格按sICAM-1試劑盒(medgenix diagnostics，belgium)操作步驟進(jìn)行。采用常規(guī)活檢方法，對(duì)治療前及治療6周后的同一患者，選取皮損內(nèi)緣進(jìn)行取材，立即置于－80℃下保存，進(jìn)行SP免疫組化染色。鼠抗人ICAM-1單克隆抗體及過(guò)氧化酶標(biāo)記的鏈霉卵白素(SP)試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司(Zymed，USA)。恒冷箱切片機(jī)制成6～8 μm厚冰凍切片，冷丙酮固定后以5%山羊血清封閉10分鐘，吸去血清，滴加ICAM-1一抗(每次均設(shè)陰性對(duì)照)，40 ℃過(guò)夜，滴加1%BSA-PBS 1︰300稀釋的二抗，37℃孵育30分鐘，37℃下DAB-H2O2顯色15～30分鐘，自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染，中性樹(shù)膠封片。以上各步驟間均用pH 7.4的PBS液沖片3次。置顯微鏡下觀察，在胞漿或胞膜處有棕黃色或棕紅色顆粒狀物質(zhì)沉積為陽(yáng)性細(xì)胞。參照文獻(xiàn)［1］的方法進(jìn)行染色、判斷。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 13.0軟件包處理。計(jì)量數(shù)據(jù)檢測(cè)結(jié)果呈正態(tài)分布，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn);等級(jí)資料比較采用秩和檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后血清sICAM-1比較 治療6周后，兩組患者血清sICAM-1均有明顯下降，且試驗(yàn)組下降幅度更明顯，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者血清sICAM-1及皮損ICAM-1染色結(jié)果比較

2.2 治療前后皮損ICAM-1比較 在真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞及角質(zhì)形成細(xì)胞上均可見(jiàn)ICAM-1表達(dá)。治療6周后，兩組患者皮損處的ICAM-1原位表達(dá)均下調(diào)，且試驗(yàn)組下調(diào)更明顯(試驗(yàn)組:Z=4.83，P＜0001;對(duì)照組:Z=3.29，P ＜0.001)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=1.9，P＜0.05)，見(jiàn)表1。

2.3 血清sICAM-1及皮損ICAM-1與疾病活動(dòng)指數(shù)(PASI)的相關(guān)性 血清 sICAM-1水平、皮損ICAM-1水平與PASI指數(shù)的相關(guān)系數(shù)分別為0.658和0.692(P＜0.05)，說(shuō)明血清 sICAM-1及皮損ICAM-1均與PASI呈正相關(guān)。

2.4 不良反應(yīng) 所有患者均未發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)?？赡芘c藥物有關(guān)的不良事件:試驗(yàn)組出現(xiàn)3例嗜睡、1例口干，占14.29%;對(duì)照組出現(xiàn)3例皮膚紅斑、瘙癢加重，均1周后消失。

3 討論

ICAM-1又稱CD54，是淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原特異的配體，屬于免疫球蛋白超家族的一種粘附分子，通過(guò)與淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原(LFA-1)相結(jié)合，可介導(dǎo)一系列炎癥反應(yīng)，特別是起著相互間傳遞信息和調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的作用，對(duì)炎癥細(xì)胞向炎癥部位的浸潤(rùn)起著非常重要的作用。它在很多疾病的發(fā)病及預(yù)后中均起重要作用，如腫瘤、自身免疫性疾病(甲亢、銀屑病、皮膚黏膜淋巴結(jié)綜合癥、1型糖尿病、過(guò)敏性紫癜、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等等)。咪唑斯汀是一種H1受體拮抗劑，為既有抗組織胺又有抗過(guò)敏性炎癥作用的第二代新型抗組織胺藥，其抗過(guò)敏機(jī)制包括［6～8］:①?gòu)?qiáng)效、高選擇性組胺H1受體拮抗作用;②抑制活化的肥大細(xì)胞釋放組胺及炎癥細(xì)胞的趨化作用;③抑制變態(tài)反應(yīng)時(shí)細(xì)胞間粘附分子的釋放。目前已有觀察咪唑斯汀治療尋常型銀屑病的報(bào)道［9，10］，但是罕有對(duì)其治療銀屑病的機(jī)制方面的研究。我們?cè)谝汛_定ICAM-1與銀屑病炎癥活動(dòng)性和嚴(yán)重度有關(guān)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用PASI評(píng)分對(duì)咪唑斯汀應(yīng)用于銀屑病治療進(jìn)行觀察，并從血清和皮損中ICAM-1水平變化分析其可能作用機(jī)制。結(jié)果表明，口服咪唑斯汀配合外用鹵米松軟膏較單用外用制劑在減輕瘙癢、改善皮損紅斑、浸潤(rùn)程度等方面更為有效，對(duì)應(yīng)的反映炎癥的指標(biāo)(ICAM-1)也下降的更低，說(shuō)明咪唑斯汀可用于尋常型銀屑病的治療，可降低PASI評(píng)分和緩解瘙癢等。其作用機(jī)制可能為降低血管內(nèi)皮細(xì)胞及皮損處角質(zhì)細(xì)胞中ICAM-1水平，進(jìn)而或同時(shí)抑制白三烯、TNF-α以及中性粒細(xì)胞游走等，從而減輕炎癥反應(yīng)。

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