PAA/PAAm雙網絡關節軟骨修復水凝膠的制備和性能研究

梅奕++熊黨生

摘 要：根據“雙網絡水凝膠”設計思路，以紫外光引發自由基聚合的原理，制備了高強度聚丙烯酸/丙烯酰胺雙網絡水凝膠，并添加SiO2對DN凝膠進行改性，系統研究了SiO2的加入量對DN復合凝膠微觀形貌、力學性能和粘彈性特征的影響。結果表明，DN凝膠中添加適量SiO2會提高凝膠的壓縮強度，當SiO2含量超過一定程度時，繼續增大SiO2含量會導致材料壓縮強度下降。這對其應用于軟骨修復有重要意義。

關鍵詞：關節 凝膠 雙網絡

中圖分類號：TH117.1 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（a）-0028-02

人體關節軟骨主要功能是緩沖載荷，以及減少相鄰兩骨間的摩擦[1]。天然的關節軟骨作為一種承重材料，具備較高的強度、沖擊韌性以及極為潤滑的表面，同時有高達75%的含水量，是性能優良的“軟而濕”的材料[2]。然而，天然軟骨的周圍缺乏血液供應，損傷后難以再生，將嚴重影響關節的功能。尋找理想的人工合成軟材料以替代損傷的天然軟骨，是目前生物醫學領域所面臨的一個重要問題。

對于軟骨修復材料的選擇，要綜合考慮機械強度、生物相容性、降解速率等多種因素，近年來研究表明，水凝膠材料作為一種含有大量水分的三維網絡聚合物，有著類似于人體軟組織的力學特征，同時其三維網絡多孔結構便于小分子在其中自由擴散，使其生物相容性優良，因此水凝膠被認為是用于軟骨替代的較為理想的材料。然而大部分水凝膠十分脆弱，為了改善水凝膠的力學性能，近年來研究者提出了很多思路，其中比較成功的一種是雙網絡水凝膠（Double network hydrogel，DN）的概念，其設計思路是首先用交聯度較高的聚電解質合成第一層網絡，以此為模板，在其中引入中性低交聯度第二層網絡，以形成雙網絡結構。第一層網絡為DN凝膠提供了剛性骨架，保持凝膠外形，而柔性的第二層網絡填補其中，很好地起到吸收應力的作用。研究表明，DN凝膠在保持了高含水量的同時，其壓縮強度為兆帕級別，彈性模量為0.14～0.19MPa，接近于天然軟骨。

目前關于DN凝膠的研究尚處于起步階段，高強度DN凝膠的體系種類較少，本文針對此問題，制備了一種新體系的丙烯酸/丙烯酰胺（PAA/PAAm）DN凝膠，選用PAA作為第一網絡，主要是由于PAA作為一種聚電解質大分子，能在第二網絡的單體溶液中充分溶脹，便于第二網絡單體大量進入；且聚丙烯酸本身無毒，在人體生理學環境中對蛋白質有抗性，因此在體內不易發生免疫排斥反應，適用于生物醫用材料；選用AAm中性聚合物分子作為第二網絡，和AA形成的PAA/PAAm的體系也滿足Gong提出的雙網絡體系組分的組成原則。同時向DN凝膠中添加一定粒徑的SiO2微粒，制備DN-SiO2復合凝膠，探討了SiO2的含量對凝膠微觀形貌及力學性能的影響。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

丙烯酸單體（AA）、丙烯酰胺單體（AAm）、SiO2粉末，分析純，均購自天津科密歐化學試劑有限公司；α-酮戊二酸，2-羥基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮、三乙二醇二甲基丙烯酸酯（TEGDMA），分析純，購自上海晶純實業有限公司。

微量移液器，WKYⅢ-100，上海佳安分析儀器公司；磁力攪拌器，big squid，德國 IKA 實驗實驗技術有限公司；超聲細胞破碎儀，XO-1200，南京先歐儀器制造有限公司；自制紫外燈；環境掃描電子顯微鏡（ESEM），XL-30，荷蘭飛利浦公司；動態力學熱分析儀（DMTA Q800，USA）。

1.2 凝膠制備

步驟一：取AA 10mL，交聯劑三乙二醇二甲基丙烯酸酯（TEGDMA）400 μL，適量的去離子水，一起倒入燒杯中攪拌30 min，至溶液呈無色透明狀態。再取一定質量的SiO2微粒，加入去離子水，置于冰浴中超聲攪拌30 min，將超聲后的SiO2水溶液倒入上述AA單體溶液中，經計算后配置成20%v/v的AA溶液，向此溶液中加入水溶性光引發劑2-羥基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮100 μL，繼續攪拌5 min，然后將溶液倒在事先置于玻璃片上的硅膠環模具中（硅膠環厚度5 mm，直徑12 mm，硅膠環涂以凡士林以防止溶液滲出），再用玻璃片蓋住，將兩塊玻璃片用夾子夾緊，置于寬范圍波長的燈下（燈的波長范圍200～2500 nm，其中包含紫外部分）輻照5 min，形成不溶于水的PAA-SiO2單網絡復合水凝膠。

步驟二：將以上制備好的凝膠從模具中取出，泡在一定濃度的AAm單體溶液中（AAm溶液體積至少為PAA凝膠體積的5倍以上，此AAm單體溶液中，已事先加入了光引發劑α-酮戊二酸，其中，α-酮戊二酸的質量為AAm單體的1wt%），浸泡24 h后，PAA凝膠達到溶脹平衡狀態，取出凝膠，置于相同的燈下輻照5 h，使PAAm網絡在PAA凝膠的內部發生交聯，制備出PAA -PAAm DN-SiO2復合凝膠。

1.3 復合凝膠的表面形貌表征

本實驗中采用環境掃描電鏡（ESEM）觀察水凝膠橫截面的真實形貌。將制備好的每個凝膠取中間部分，切一2 cm×2 cm大小的正方形小樣本，用ESEM直接觀察其含水狀態的表面形貌。

1.4 力學性能

用力學實驗機測試PAA單網絡凝膠和DN復合凝膠的單向壓縮性能。以20%應變/min 的壓縮速率對水凝膠樣品的進行壓縮，若過程中樣本無斷裂，則最大壓至0.95應變。由于應力-應變曲線在0～0.2應變內趨于直線，所以選取此段區間的斜率作為彈性壓縮模量。所有測試都在室溫下進行，樣本從水中取出后立即進行測試，以最小化水的損失。壓縮應變的定義為：

ε=（h-h0）/h0

其中，h0為樣本初始厚度，h是壓縮后的厚度。

壓縮應力的定義為：

σc=F/R2

其中，F為施加載荷，R為材料原始半徑。

2 結果與討論

2.1 復合凝膠形貌

如圖1所示，凝膠樣本為含大量孔洞的三維網絡狀結構，（a）和（b）中均為單網絡的凝膠，其平均孔徑大小約50～80 μm，大于圖（c）和（d）中雙網絡凝膠。由（c）和（d）比較可知，SiO2微粒的加入會顯著減小凝膠的孔徑大小。

2.2 雙網絡復合凝膠的力學性能

圖2所示的為DN凝膠和單網絡（SN）凝膠的壓縮應力-應變曲線。PAA SN凝膠在很低的應變（0.4）即發生斷裂，然而PAA/PAAm DN凝膠的最大抗壓應力達到了3.6MPa，是PAA的12倍以上，DN凝膠的最大壓縮應變達到了94%，明顯大于PAA SN凝膠的39%。

3 結語

結合雙網絡凝膠（DN）的設計思路，利用紫外輻照引發自由基聚合原理制備了一種新體系的PAA/PAAm-SiO2 DN復合凝膠。用環境掃描電子顯微鏡觀察了凝膠的微觀結構，復合凝膠單向壓縮力學性能。壓縮實驗表明，PAA/PAAm體系組合可以形成高強度DN凝膠。這對其應用于軟骨修復有重要意義。

參考文獻

[1] Wong M，Carter D R.Articular cartilage functional histomorphology and mechanobiology：a research perspective[J].Bone，2003，33（1）：1.

[2] Mow V C，Ratcliffe A，Robin Poole A.Cartilage and diarthrodial joints as paradigms for hierarchical materials and structures[J].Biomaterials，1992，13（2）：67-97.

[3] Hootman J M，Helmick C G.Projections of US prevalence of arthritis and associated activity limitations[J].Arthritis & Rheumatism，2006，54（1）：226-229.endprint

摘 要：根據“雙網絡水凝膠”設計思路，以紫外光引發自由基聚合的原理，制備了高強度聚丙烯酸/丙烯酰胺雙網絡水凝膠，并添加SiO2對DN凝膠進行改性，系統研究了SiO2的加入量對DN復合凝膠微觀形貌、力學性能和粘彈性特征的影響。結果表明，DN凝膠中添加適量SiO2會提高凝膠的壓縮強度，當SiO2含量超過一定程度時，繼續增大SiO2含量會導致材料壓縮強度下降。這對其應用于軟骨修復有重要意義。

關鍵詞：關節 凝膠 雙網絡

中圖分類號：TH117.1 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（a）-0028-02

人體關節軟骨主要功能是緩沖載荷，以及減少相鄰兩骨間的摩擦[1]。天然的關節軟骨作為一種承重材料，具備較高的強度、沖擊韌性以及極為潤滑的表面，同時有高達75%的含水量，是性能優良的“軟而濕”的材料[2]。然而，天然軟骨的周圍缺乏血液供應，損傷后難以再生，將嚴重影響關節的功能。尋找理想的人工合成軟材料以替代損傷的天然軟骨，是目前生物醫學領域所面臨的一個重要問題。

對于軟骨修復材料的選擇，要綜合考慮機械強度、生物相容性、降解速率等多種因素，近年來研究表明，水凝膠材料作為一種含有大量水分的三維網絡聚合物，有著類似于人體軟組織的力學特征，同時其三維網絡多孔結構便于小分子在其中自由擴散，使其生物相容性優良，因此水凝膠被認為是用于軟骨替代的較為理想的材料。然而大部分水凝膠十分脆弱，為了改善水凝膠的力學性能，近年來研究者提出了很多思路，其中比較成功的一種是雙網絡水凝膠（Double network hydrogel，DN）的概念，其設計思路是首先用交聯度較高的聚電解質合成第一層網絡，以此為模板，在其中引入中性低交聯度第二層網絡，以形成雙網絡結構。第一層網絡為DN凝膠提供了剛性骨架，保持凝膠外形，而柔性的第二層網絡填補其中，很好地起到吸收應力的作用。研究表明，DN凝膠在保持了高含水量的同時，其壓縮強度為兆帕級別，彈性模量為0.14～0.19MPa，接近于天然軟骨。

目前關于DN凝膠的研究尚處于起步階段，高強度DN凝膠的體系種類較少，本文針對此問題，制備了一種新體系的丙烯酸/丙烯酰胺（PAA/PAAm）DN凝膠，選用PAA作為第一網絡，主要是由于PAA作為一種聚電解質大分子，能在第二網絡的單體溶液中充分溶脹，便于第二網絡單體大量進入；且聚丙烯酸本身無毒，在人體生理學環境中對蛋白質有抗性，因此在體內不易發生免疫排斥反應，適用于生物醫用材料；選用AAm中性聚合物分子作為第二網絡，和AA形成的PAA/PAAm的體系也滿足Gong提出的雙網絡體系組分的組成原則。同時向DN凝膠中添加一定粒徑的SiO2微粒，制備DN-SiO2復合凝膠，探討了SiO2的含量對凝膠微觀形貌及力學性能的影響。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

丙烯酸單體（AA）、丙烯酰胺單體（AAm）、SiO2粉末，分析純，均購自天津科密歐化學試劑有限公司；α-酮戊二酸，2-羥基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮、三乙二醇二甲基丙烯酸酯（TEGDMA），分析純，購自上海晶純實業有限公司。

微量移液器，WKYⅢ-100，上海佳安分析儀器公司；磁力攪拌器，big squid，德國 IKA 實驗實驗技術有限公司；超聲細胞破碎儀，XO-1200，南京先歐儀器制造有限公司；自制紫外燈；環境掃描電子顯微鏡（ESEM），XL-30，荷蘭飛利浦公司；動態力學熱分析儀（DMTA Q800，USA）。

1.2 凝膠制備

步驟一：取AA 10mL，交聯劑三乙二醇二甲基丙烯酸酯（TEGDMA）400 μL，適量的去離子水，一起倒入燒杯中攪拌30 min，至溶液呈無色透明狀態。再取一定質量的SiO2微粒，加入去離子水，置于冰浴中超聲攪拌30 min，將超聲后的SiO2水溶液倒入上述AA單體溶液中，經計算后配置成20%v/v的AA溶液，向此溶液中加入水溶性光引發劑2-羥基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮100 μL，繼續攪拌5 min，然后將溶液倒在事先置于玻璃片上的硅膠環模具中（硅膠環厚度5 mm，直徑12 mm，硅膠環涂以凡士林以防止溶液滲出），再用玻璃片蓋住，將兩塊玻璃片用夾子夾緊，置于寬范圍波長的燈下（燈的波長范圍200～2500 nm，其中包含紫外部分）輻照5 min，形成不溶于水的PAA-SiO2單網絡復合水凝膠。

步驟二：將以上制備好的凝膠從模具中取出，泡在一定濃度的AAm單體溶液中（AAm溶液體積至少為PAA凝膠體積的5倍以上，此AAm單體溶液中，已事先加入了光引發劑α-酮戊二酸，其中，α-酮戊二酸的質量為AAm單體的1wt%），浸泡24 h后，PAA凝膠達到溶脹平衡狀態，取出凝膠，置于相同的燈下輻照5 h，使PAAm網絡在PAA凝膠的內部發生交聯，制備出PAA -PAAm DN-SiO2復合凝膠。

1.3 復合凝膠的表面形貌表征

本實驗中采用環境掃描電鏡（ESEM）觀察水凝膠橫截面的真實形貌。將制備好的每個凝膠取中間部分，切一2 cm×2 cm大小的正方形小樣本，用ESEM直接觀察其含水狀態的表面形貌。

1.4 力學性能

用力學實驗機測試PAA單網絡凝膠和DN復合凝膠的單向壓縮性能。以20%應變/min 的壓縮速率對水凝膠樣品的進行壓縮，若過程中樣本無斷裂，則最大壓至0.95應變。由于應力-應變曲線在0～0.2應變內趨于直線，所以選取此段區間的斜率作為彈性壓縮模量。所有測試都在室溫下進行，樣本從水中取出后立即進行測試，以最小化水的損失。壓縮應變的定義為：

ε=（h-h0）/h0

其中，h0為樣本初始厚度，h是壓縮后的厚度。

壓縮應力的定義為：

σc=F/R2

其中，F為施加載荷，R為材料原始半徑。

2 結果與討論

2.1 復合凝膠形貌

如圖1所示，凝膠樣本為含大量孔洞的三維網絡狀結構，（a）和（b）中均為單網絡的凝膠，其平均孔徑大小約50～80 μm，大于圖（c）和（d）中雙網絡凝膠。由（c）和（d）比較可知，SiO2微粒的加入會顯著減小凝膠的孔徑大小。

2.2 雙網絡復合凝膠的力學性能

圖2所示的為DN凝膠和單網絡（SN）凝膠的壓縮應力-應變曲線。PAA SN凝膠在很低的應變（0.4）即發生斷裂，然而PAA/PAAm DN凝膠的最大抗壓應力達到了3.6MPa，是PAA的12倍以上，DN凝膠的最大壓縮應變達到了94%，明顯大于PAA SN凝膠的39%。

3 結語

結合雙網絡凝膠（DN）的設計思路，利用紫外輻照引發自由基聚合原理制備了一種新體系的PAA/PAAm-SiO2 DN復合凝膠。用環境掃描電子顯微鏡觀察了凝膠的微觀結構，復合凝膠單向壓縮力學性能。壓縮實驗表明，PAA/PAAm體系組合可以形成高強度DN凝膠。這對其應用于軟骨修復有重要意義。

參考文獻

[1] Wong M，Carter D R.Articular cartilage functional histomorphology and mechanobiology：a research perspective[J].Bone，2003，33（1）：1.

[2] Mow V C，Ratcliffe A，Robin Poole A.Cartilage and diarthrodial joints as paradigms for hierarchical materials and structures[J].Biomaterials，1992，13（2）：67-97.

[3] Hootman J M，Helmick C G.Projections of US prevalence of arthritis and associated activity limitations[J].Arthritis & Rheumatism，2006，54（1）：226-229.endprint

摘 要：根據“雙網絡水凝膠”設計思路，以紫外光引發自由基聚合的原理，制備了高強度聚丙烯酸/丙烯酰胺雙網絡水凝膠，并添加SiO2對DN凝膠進行改性，系統研究了SiO2的加入量對DN復合凝膠微觀形貌、力學性能和粘彈性特征的影響。結果表明，DN凝膠中添加適量SiO2會提高凝膠的壓縮強度，當SiO2含量超過一定程度時，繼續增大SiO2含量會導致材料壓縮強度下降。這對其應用于軟骨修復有重要意義。

關鍵詞：關節 凝膠 雙網絡

中圖分類號：TH117.1 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（a）-0028-02

人體關節軟骨主要功能是緩沖載荷，以及減少相鄰兩骨間的摩擦[1]。天然的關節軟骨作為一種承重材料，具備較高的強度、沖擊韌性以及極為潤滑的表面，同時有高達75%的含水量，是性能優良的“軟而濕”的材料[2]。然而，天然軟骨的周圍缺乏血液供應，損傷后難以再生，將嚴重影響關節的功能。尋找理想的人工合成軟材料以替代損傷的天然軟骨，是目前生物醫學領域所面臨的一個重要問題。

對于軟骨修復材料的選擇，要綜合考慮機械強度、生物相容性、降解速率等多種因素，近年來研究表明，水凝膠材料作為一種含有大量水分的三維網絡聚合物，有著類似于人體軟組織的力學特征，同時其三維網絡多孔結構便于小分子在其中自由擴散，使其生物相容性優良，因此水凝膠被認為是用于軟骨替代的較為理想的材料。然而大部分水凝膠十分脆弱，為了改善水凝膠的力學性能，近年來研究者提出了很多思路，其中比較成功的一種是雙網絡水凝膠（Double network hydrogel，DN）的概念，其設計思路是首先用交聯度較高的聚電解質合成第一層網絡，以此為模板，在其中引入中性低交聯度第二層網絡，以形成雙網絡結構。第一層網絡為DN凝膠提供了剛性骨架，保持凝膠外形，而柔性的第二層網絡填補其中，很好地起到吸收應力的作用。研究表明，DN凝膠在保持了高含水量的同時，其壓縮強度為兆帕級別，彈性模量為0.14～0.19MPa，接近于天然軟骨。

目前關于DN凝膠的研究尚處于起步階段，高強度DN凝膠的體系種類較少，本文針對此問題，制備了一種新體系的丙烯酸/丙烯酰胺（PAA/PAAm）DN凝膠，選用PAA作為第一網絡，主要是由于PAA作為一種聚電解質大分子，能在第二網絡的單體溶液中充分溶脹，便于第二網絡單體大量進入；且聚丙烯酸本身無毒，在人體生理學環境中對蛋白質有抗性，因此在體內不易發生免疫排斥反應，適用于生物醫用材料；選用AAm中性聚合物分子作為第二網絡，和AA形成的PAA/PAAm的體系也滿足Gong提出的雙網絡體系組分的組成原則。同時向DN凝膠中添加一定粒徑的SiO2微粒，制備DN-SiO2復合凝膠，探討了SiO2的含量對凝膠微觀形貌及力學性能的影響。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

丙烯酸單體（AA）、丙烯酰胺單體（AAm）、SiO2粉末，分析純，均購自天津科密歐化學試劑有限公司；α-酮戊二酸，2-羥基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮、三乙二醇二甲基丙烯酸酯（TEGDMA），分析純，購自上海晶純實業有限公司。

微量移液器，WKYⅢ-100，上海佳安分析儀器公司；磁力攪拌器，big squid，德國 IKA 實驗實驗技術有限公司；超聲細胞破碎儀，XO-1200，南京先歐儀器制造有限公司；自制紫外燈；環境掃描電子顯微鏡（ESEM），XL-30，荷蘭飛利浦公司；動態力學熱分析儀（DMTA Q800，USA）。

1.2 凝膠制備

步驟一：取AA 10mL，交聯劑三乙二醇二甲基丙烯酸酯（TEGDMA）400 μL，適量的去離子水，一起倒入燒杯中攪拌30 min，至溶液呈無色透明狀態。再取一定質量的SiO2微粒，加入去離子水，置于冰浴中超聲攪拌30 min，將超聲后的SiO2水溶液倒入上述AA單體溶液中，經計算后配置成20%v/v的AA溶液，向此溶液中加入水溶性光引發劑2-羥基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮100 μL，繼續攪拌5 min，然后將溶液倒在事先置于玻璃片上的硅膠環模具中（硅膠環厚度5 mm，直徑12 mm，硅膠環涂以凡士林以防止溶液滲出），再用玻璃片蓋住，將兩塊玻璃片用夾子夾緊，置于寬范圍波長的燈下（燈的波長范圍200～2500 nm，其中包含紫外部分）輻照5 min，形成不溶于水的PAA-SiO2單網絡復合水凝膠。

步驟二：將以上制備好的凝膠從模具中取出，泡在一定濃度的AAm單體溶液中（AAm溶液體積至少為PAA凝膠體積的5倍以上，此AAm單體溶液中，已事先加入了光引發劑α-酮戊二酸，其中，α-酮戊二酸的質量為AAm單體的1wt%），浸泡24 h后，PAA凝膠達到溶脹平衡狀態，取出凝膠，置于相同的燈下輻照5 h，使PAAm網絡在PAA凝膠的內部發生交聯，制備出PAA -PAAm DN-SiO2復合凝膠。

1.3 復合凝膠的表面形貌表征

本實驗中采用環境掃描電鏡（ESEM）觀察水凝膠橫截面的真實形貌。將制備好的每個凝膠取中間部分，切一2 cm×2 cm大小的正方形小樣本，用ESEM直接觀察其含水狀態的表面形貌。

1.4 力學性能

用力學實驗機測試PAA單網絡凝膠和DN復合凝膠的單向壓縮性能。以20%應變/min 的壓縮速率對水凝膠樣品的進行壓縮，若過程中樣本無斷裂，則最大壓至0.95應變。由于應力-應變曲線在0～0.2應變內趨于直線，所以選取此段區間的斜率作為彈性壓縮模量。所有測試都在室溫下進行，樣本從水中取出后立即進行測試，以最小化水的損失。壓縮應變的定義為：

ε=（h-h0）/h0

其中，h0為樣本初始厚度，h是壓縮后的厚度。

壓縮應力的定義為：

σc=F/R2

其中，F為施加載荷，R為材料原始半徑。

2 結果與討論

2.1 復合凝膠形貌

如圖1所示，凝膠樣本為含大量孔洞的三維網絡狀結構，（a）和（b）中均為單網絡的凝膠，其平均孔徑大小約50～80 μm，大于圖（c）和（d）中雙網絡凝膠。由（c）和（d）比較可知，SiO2微粒的加入會顯著減小凝膠的孔徑大小。

2.2 雙網絡復合凝膠的力學性能

圖2所示的為DN凝膠和單網絡（SN）凝膠的壓縮應力-應變曲線。PAA SN凝膠在很低的應變（0.4）即發生斷裂，然而PAA/PAAm DN凝膠的最大抗壓應力達到了3.6MPa，是PAA的12倍以上，DN凝膠的最大壓縮應變達到了94%，明顯大于PAA SN凝膠的39%。

3 結語

結合雙網絡凝膠（DN）的設計思路，利用紫外輻照引發自由基聚合原理制備了一種新體系的PAA/PAAm-SiO2 DN復合凝膠。用環境掃描電子顯微鏡觀察了凝膠的微觀結構，復合凝膠單向壓縮力學性能。壓縮實驗表明，PAA/PAAm體系組合可以形成高強度DN凝膠。這對其應用于軟骨修復有重要意義。

參考文獻

[1] Wong M，Carter D R.Articular cartilage functional histomorphology and mechanobiology：a research perspective[J].Bone，2003，33（1）：1.

[2] Mow V C，Ratcliffe A，Robin Poole A.Cartilage and diarthrodial joints as paradigms for hierarchical materials and structures[J].Biomaterials，1992，13（2）：67-97.

[3] Hootman J M，Helmick C G.Projections of US prevalence of arthritis and associated activity limitations[J].Arthritis & Rheumatism，2006，54（1）：226-229.endprint