乳酸菌陰道膠囊用于恢復陰道正常菌群380例療效評價

楊 英，邱偉芬

(浙江省龍泉市中醫院，浙江 龍泉 323700)

陰道乳酸桿菌是健康婦女陰道內的優勢菌，經過抗生素或抗真菌藥物陰道局部治療的陰道炎患者，其乳酸桿菌含量明顯降低，陰道內正常菌群及微環境遭到不同程度的破壞，導致陰道炎反復發作及耐藥或出現繼發性其他病原菌感染。筆者通過比較乳酸菌陰道膠囊鞏固陰道乳酸桿菌的含量，產H2O2桿菌比例的變化，以及兩組患者陰道炎的復發率，觀察乳酸菌陰道膠囊恢復陰道正常菌群的作用，為陰道炎的微生態治療提供依據。

1 資料與方法

1．1 一般資料

選擇2010年至2012年在我院門診就診的陰道炎患者752例，年齡21～52歲，其中外陰陰道假絲酵母菌病207例，滴蟲性陰道炎183例，菌性陰道病175例，萎縮性陰道炎187例，在全身及局部用藥對癥治療后，復查病原體轉陰的患者。納入標準:初診以外陰瘙癢及陰道分泌物增多為主訴的患者，確診陰道炎，經陰道局部或全身用藥，臨床癥狀及體征好轉或消失，月經干凈或停藥后3～5 d復查陰道分泌物病原菌陰性;復查陰道分泌物高倍鏡檢提示陰道清潔度Ⅰ～Ⅱ度，但乳酸桿菌低于1個“+”或未檢出。排除標準:陰道炎經治療臨床癥狀并未好轉或加重者;復查感染病原體持續陽性者;淋病奈瑟菌、衣原體及人乳頭瘤病毒(HPV)感染者;有重要臟器疾病;宮頸上皮內瘤變或宮頸癌患者。隨機分為試驗組380例和對照組372例，接受口頭知情同意。

1．2 方法

治療方法:試驗組于月經干凈或停藥后3～5 d給予乳酸菌陰道膠囊(西安正浩生物制藥有限公司，國藥準字H10980293，規格為每枚0．25 g)，每次2枚，每晚1次，清洗外陰后放置陰道深處，10 d為1個療程，共l～3個療程，于療程結束后3～5 d復查，并取陰道分泌物檢測乳酸桿菌。告知患者治療及觀察期間避免性生活及勿用抗生素。對照組門診隨訪，作陰道分泌物乳酸桿菌檢測。隨訪觀察6個月，觀察陰道分泌物乳酸桿菌和陰道炎復發情況。

試驗方法:標本采集窺器暴露宮頸以厭氧菌采集專用拭子于陰道上1/3側壁順時針旋轉取樣，插入拭子套中，送實驗室，接種于乳酸桿菌選擇性培養基(LBS)[1]中，37℃ 10%CO2培養箱中培養48 h，以乳酸桿菌在培養基生長的面積來進行半定量計算乳酸桿菌的量，再將選出的乳酸桿菌接種到H2O2鑒定培養基(MRS瓊脂培養基中加入0．25 g/L I'MB和過氧化物酶0．01 g/L，遇H2O2后菌落呈藍色)。另以無菌棉拭子定量(0．1 mL)取陰道上1/3側壁分泌物，以1 mL 0．9%氯化鈉注射液稀釋涂片革蘭染色，于超高倍鏡下計數乳酸桿菌。

陰道乳酸桿菌鑒定標準:革蘭染色陽性，無芽孢，細長彎曲或呈球桿狀、桿狀單個或雙鏈狀，無動力;微需氧，5% ～10%CO2環境下或厭氧環境下生長，pH為5．6～6．2，觸酶陰性，細胞色素缺失，分解葡萄糖，終產物為乳酸。在超高倍鏡檢下計數1 000倍鏡下每視野乳酸桿菌的數量，參照Nugent陰道分泌物評分標準[2]，即 0～1個/1 000 F記為“+”;1～4個/1 000 F記為“++”;5～30個/1 000 F記為“+++”;＞30個 /1 000 F記為“++++”。正常人群陰道乳酸桿菌數量超過“++”。

1．3 統計學處理

所得數據采用SPSS 10．0統計軟件，不同組間乳酸桿菌數量分布比較采用 χ2檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 陰道乳酸桿菌檢出率與陽性菌株產H2O2乳酸桿菌的比例

結果見表1。可見，試驗組乳酸桿菌檢出率明顯高于對照組(χ2=112．3，P ＜0．05);試驗組培養乳酸桿菌菌落占培養基面積1/2 以上者明顯高于對照組(χ2=52．86，P ＜ 0．01);試驗組培養乳酸桿菌菌落產 H2O2，陽性率明顯高于對照組(χ2=74．63，P ＜ 0．01)。

表1 兩組陰道乳酸桿菌檢出率及培養菌株中產H2O2乳酸桿菌陽性率比較[例(%)]

2．2 乳酸桿菌數量分布

試驗組超高倍鏡下乳酸桿菌計數超過“++”的308例，明顯高于對照組的 38 例(χ2=377．09，P ＜0．05)。見表 2。

表2 兩組陰道分泌物涂片超高倍鏡下陰道乳酸桿菌分布比較[例(%)]

2．3 各類陰道炎復發率

見表3。可見，試驗組總復發率明顯低于對照組(χ2=65．50，P ＜ 0．01)。

表3 兩組不同類型陰道炎的復發情況比較[例(%)]

3 討論

健康婦女陰道內存在著多種微生物群落，它們之間或共生或拮抗，構成了相互制約、相互協調、動態的陰道微生態平衡，其中兼性厭氧乳酸桿菌作為陰道內正常菌群，在維持陰道微生態平衡中發揮了重要作用。

陰道乳酸桿菌具有抵抗內源性及外源性病原菌生長繁殖的作用[3]，機制包括:競爭黏附作用，乳酸桿菌可黏附于陰道壁，通過占位作用抑制病原菌的黏附和感染;產生乳酸，降低陰道pH，抑制多種病原菌的繁殖;分泌H2O2，殺滅病原菌;產生抑制物如細菌素、細菌素樣物質、表面活性物質，抑制革蘭陽性菌、革蘭陰性菌及真菌;與病原菌競爭營養物質;免疫防御功能，對不良免疫反應有下調作用。研究發現，乳酸桿菌對多種抗菌藥物敏感，經陰道局部或全身應用抗生素的陰道炎患者，其陰道乳酸桿菌檢出率明顯降低[4]。目前，臨床上對于各種類型陰道炎(細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、外陰陰道假絲酵母菌病、淋菌性陰道炎、泌尿系感染等)的治療主要采用抗菌、抗真菌藥物等，由此引起陰道內乳酸桿菌數量下降、生理防御功能減退，導致陰道炎反復發作甚至耐藥，以及繼發性混合性感染。

乳酸菌陰道膠囊是有益菌乳酸菌的活菌制劑，其主要成分為活腸鏈球菌，在陰道內通過分解陰道上皮的糖原產生大量的乳酸、乙酸等有機酸，實現維持陰道處于低pH的作用;其代謝產物H2O2、細菌因子等具有殺、抑病原菌的作用;實現了提高陰道局部抵抗力和恢復微環境平衡及抑菌制菌的目的，起到了有效防止復發的效果。有研究表明，在陰道炎治療后給予乳酸菌陰道膠囊進行陰道局部微環境調整的鞏固治療，可縮短治療周期，降低復發率[5]。

通過對752例陰道炎治療后患者陰道內乳酸桿菌的分離、培養及半定量，發現經治療后，患者雖臨床癥狀消失，病原體檢查陰性，陰道清潔度好轉，但伴有陰道內乳酸桿菌比例的明顯下降，經過乳酸菌膠囊鞏固治療的試驗組乳酸桿菌檢出率，較對照組顯著提高。通過陰道桿菌數量分布的比較，發現對照組陰道桿菌的數量分布明顯下降，鞏固治療后陰道乳酸桿菌數量分布升高，接近正常水平。陰道內乳酸桿菌中以產H2O2的乳酸菌為活性菌，通過篩選產H2O2陽性菌落以確定乳酸桿菌活性比例。結果發現，試驗組陽性率較對照組明顯升高，說明乳酸菌陰道膠囊在提升陰道乳酸菌數量的同時，其活性亦同時提高。隨訪過程中試驗組陰道炎復發率明顯低于對照組(P＜0．05)，表明在陰道炎治療后給予乳酸菌陰道膠囊鞏固治療，在預防復發方面的效果肯定。本試驗結果表明，在臨床治療陰道炎后，給予微生態制劑——活菌制劑后續鞏固治療，有助于恢復陰道正常菌群，維持生態平衡，從而鞏固療效減少陰道炎復發。

[1]鄭佳音，劉佳明，王忠勇，等．不同人群陰道乳桿菌分離比較的研究[J]．中國微生態學雜志，2008，20(6):580－581．

[2]Nugent RP，Krohn MA，Hillers L．Reliability of diagonosing bacterial vaginosisis improved by a standardized method of gram stain interpretation[J]．J Clin Microbiol，1991，29(2):297 － 301．

[3]鄭晶晶，宋靜慧．乳酸桿菌及陰道微生態制劑[J]．內蒙古醫學院學報，2008，30(12):141 －144．

[4]肖冰冰，劉朝暉，廖秦平，等．影響女性陰道乳酸桿菌數量分布的相關因素分析[J]．中國實用婦科與產科雜志，2008，24(6):427－429．

[5]楊 毅，王友芳，郎景和，等．陰道乳酸桿菌活菌制劑對復發性外陰陰道念珠菌病鞏固治療的初步臨床探討[J]．實用婦產科雜志，2007，23(12):749－750．