楊春 欒新杰 劉國峰 周興璐 王建 胡效亞
1引言
在蛋白質組學研究中,人們已經積累了大量關于已知蛋白質的數據。 目前的研究重點主要集中在發現具有新功能、或與疾病診斷和治療相關的蛋白質方面\[1\]。為了從復雜樣品里提取和鑒定未知的低豐度蛋白質,樣品分離或高豐度蛋白質的脫除是十分必要的\[2~4\]。在各種蛋白質脫除方法中,使用抗體、染料或者配基的親和技術是最常用的方法\[5~10\],其它方法還包括多維分離\[11\]、限進介質(Restrictedaccess)材料\[12\]或者集成方法\[13,14\]。
印跡材料廣泛涉及分子識別、分離及催化等領域\[15~21\],其中,冰膠(Cryogel)聚合物是一種大孔親水性材料,具有良好的穩定性及傳質性能,適于大分子(如蛋白質)的印跡研究,也可用于高豐度蛋白質的脫除\[22\]。本研究組曾報道了處理復雜樣品的冰膠材料,其中“待定模板”印跡聚合物起著關鍵作用,印跡位點的種類及數量可通過改變模板的濃度進行調節\[23,24\]。這類聚合物可將樣品拆分為兩部分。一部分吸附在聚合物上,一部分保留在溶液中。根據這種方法,理論上可用n個聚合物將復雜樣品分成任意n+1份,充分降低樣品的復雜性,從而有利于蛋白質組學研究或生物標記物的發現。
本研究合成了4個冰膠聚合物,其中3個印跡聚合物均顯示出高豐度蛋白質的脫除能力。在去除部分高豐度組分之后,流出液仍有3組蛋白質的信號。硼酸吸附實驗表明,它們可能是糖基化成分。“待定模板”印跡聚合物在脫除高豐度蛋白質的同時,能夠保留從而富集翻譯后修飾蛋白質(如糖蛋白等)。
2實驗部分
2.1材料與試劑
1引言
在蛋白質組學研究中,人們已經積累了大量關于已知蛋白質的數據。 目前的研究重點主要集中在發現具有新功能、或與疾病診斷和治療相關的蛋白質方面\[1\]。為了從復雜樣品里提取和鑒定未知的低豐度蛋白質,樣品分離或高豐度蛋白質的脫除是十分必要的\[2~4\]。在各種蛋白質脫除方法中,使用抗體、染料或者配基的親和技術是最常用的方法\[5~10\],其它方法還包括多維分離\[11\]、限進介質(Restrictedaccess)材料\[12\]或者集成方法\[13,14\]。
印跡材料廣泛涉及分子識別、分離及催化等領域\[15~21\],其中,冰膠(Cryogel)聚合物是一種大孔親水性材料,具有良好的穩定性及傳質性能,適于大分子(如蛋白質)的印跡研究,也可用于高豐度蛋白質的脫除\[22\]。本研究組曾報道了處理復雜樣品的冰膠材料,其中“待定模板”印跡聚合物起著關鍵作用,印跡位點的種類及數量可通過改變模板的濃度進行調節\[23,24\]。這類聚合物可將樣品拆分為兩部分。一部分吸附在聚合物上,一部分保留在溶液中。根據這種方法,理論上可用n個聚合物將復雜樣品分成任意n+1份,充分降低樣品的復雜性,從而有利于蛋白質組學研究或生物標記物的發現。
本研究合成了4個冰膠聚合物,其中3個印跡聚合物均顯示出高豐度蛋白質的脫除能力。在去除部分高豐度組分之后,流出液仍有3組蛋白質的信號。硼酸吸附實驗表明,它們可能是糖基化成分。“待定模板”印跡聚合物在脫除高豐度蛋白質的同時,能夠保留從而富集翻譯后修飾蛋白質(如糖蛋白等)。
2實驗部分
2.1材料與試劑
1引言
在蛋白質組學研究中,人們已經積累了大量關于已知蛋白質的數據。 目前的研究重點主要集中在發現具有新功能、或與疾病診斷和治療相關的蛋白質方面\[1\]。為了從復雜樣品里提取和鑒定未知的低豐度蛋白質,樣品分離或高豐度蛋白質的脫除是十分必要的\[2~4\]。在各種蛋白質脫除方法中,使用抗體、染料或者配基的親和技術是最常用的方法\[5~10\],其它方法還包括多維分離\[11\]、限進介質(Restrictedaccess)材料\[12\]或者集成方法\[13,14\]。
印跡材料廣泛涉及分子識別、分離及催化等領域\[15~21\],其中,冰膠(Cryogel)聚合物是一種大孔親水性材料,具有良好的穩定性及傳質性能,適于大分子(如蛋白質)的印跡研究,也可用于高豐度蛋白質的脫除\[22\]。本研究組曾報道了處理復雜樣品的冰膠材料,其中“待定模板”印跡聚合物起著關鍵作用,印跡位點的種類及數量可通過改變模板的濃度進行調節\[23,24\]。這類聚合物可將樣品拆分為兩部分。一部分吸附在聚合物上,一部分保留在溶液中。根據這種方法,理論上可用n個聚合物將復雜樣品分成任意n+1份,充分降低樣品的復雜性,從而有利于蛋白質組學研究或生物標記物的發現。
本研究合成了4個冰膠聚合物,其中3個印跡聚合物均顯示出高豐度蛋白質的脫除能力。在去除部分高豐度組分之后,流出液仍有3組蛋白質的信號。硼酸吸附實驗表明,它們可能是糖基化成分。“待定模板”印跡聚合物在脫除高豐度蛋白質的同時,能夠保留從而富集翻譯后修飾蛋白質(如糖蛋白等)。
2實驗部分
2.1材料與試劑