超高壓液相色譜飛行時間質(zhì)譜法對比分析沙丁胺醇在豬尿液和血漿中的代謝產(chǎn)物

谷旭 劉義明 姚婷 石華樂 李俊 趙禎 秦玉昌

1引言

生物樣品中有大量干擾組分存在，LCMS技術(shù)由于其選擇性強、靈敏度高，目前被廣泛應用于分析藥物及其在各種復雜生物基質(zhì)（全血、血漿、尿、膽汁及生物組織）中的代謝研究。不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的樣品前處理工作，而且能分離鑒定難于辨識的痕量藥物代謝產(chǎn)物，QTOF屬于高分辨質(zhì)譜，可以提供較為可靠的母體藥物或代謝產(chǎn)物分子和碎片離子的精確分子質(zhì)量，能夠獲得其元素組成等多種結(jié)構(gòu)相關(guān)信息，結(jié)合軟件能較可靠地快速推測復雜生物機制中的代謝產(chǎn)物＼[1，2＼]。

β2受體激動劑可放松支氣管、血管、腸和子宮平滑肌，增加纖毛運動頻率，調(diào)節(jié)粘膜纖毛的清除率＼[3＼]。β2受體激動劑同時具有增加脂類分解和脂肪細胞中脂類生成，增加肝糖分解和蛋白質(zhì)的合成，減少橫紋肌纖維蛋白質(zhì)的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘寧，化學名稱1（4羥基3羥甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效選擇性的β2受體激動劑，有較強的支氣管擴張作用，臨床用于平喘＼[4＼]。動物飼養(yǎng)過程中添加微量的沙丁胺醇能促進牲畜的生長、增加瘦肉率＼[5＼]，然而殘留在動物產(chǎn)品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代謝產(chǎn)物可以通過食物鏈進入人體，嚴重影響身體健康＼[6＼]，我國農(nóng)業(yè)部于1997年做出規(guī)定，嚴禁所有β腎上腺素受體類激素在飼料和畜牧生產(chǎn)中使用[7]。

沙丁胺醇在人體內(nèi)主要發(fā)生N羥基與硫酸的結(jié)合，生成的結(jié)合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代謝產(chǎn)物，確定了4種可能的代謝物，但結(jié)果并未檢測到硫酸結(jié)合物＼[11＼]。藥物在不同種屬動物之間的代謝路徑有一定差別，同種動物不同給藥方式對藥物的代謝也不盡相同＼[10＼]。目前， 對沙丁胺醇家畜體內(nèi)的代謝研究較少，對其在家畜體內(nèi)的可能代謝產(chǎn)物和代謝路徑的報道不多，僅Montrade等利用高分辨質(zhì)譜在口服沙丁胺醇的牛尿液中發(fā)現(xiàn)了沙丁胺醇的氧化產(chǎn)物＼[12＼]。為探討豬口服給藥沙丁胺醇后的代謝物和可能代謝途徑，本研究采用UPLCQTOF MS聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合Agilent MassHunter Metabolite ID軟件，對灌胃沙丁胺醇后豬尿液和血漿中的代謝物進行分析鑒定，推斷可能代謝路徑。

1引言

生物樣品中有大量干擾組分存在，LCMS技術(shù)由于其選擇性強、靈敏度高，目前被廣泛應用于分析藥物及其在各種復雜生物基質(zhì)（全血、血漿、尿、膽汁及生物組織）中的代謝研究。不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的樣品前處理工作，而且能分離鑒定難于辨識的痕量藥物代謝產(chǎn)物，QTOF屬于高分辨質(zhì)譜，可以提供較為可靠的母體藥物或代謝產(chǎn)物分子和碎片離子的精確分子質(zhì)量，能夠獲得其元素組成等多種結(jié)構(gòu)相關(guān)信息，結(jié)合軟件能較可靠地快速推測復雜生物機制中的代謝產(chǎn)物＼[1，2＼]。

β2受體激動劑可放松支氣管、血管、腸和子宮平滑肌，增加纖毛運動頻率，調(diào)節(jié)粘膜纖毛的清除率＼[3＼]。β2受體激動劑同時具有增加脂類分解和脂肪細胞中脂類生成，增加肝糖分解和蛋白質(zhì)的合成，減少橫紋肌纖維蛋白質(zhì)的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘寧，化學名稱1（4羥基3羥甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效選擇性的β2受體激動劑，有較強的支氣管擴張作用，臨床用于平喘＼[4＼]。動物飼養(yǎng)過程中添加微量的沙丁胺醇能促進牲畜的生長、增加瘦肉率＼[5＼]，然而殘留在動物產(chǎn)品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代謝產(chǎn)物可以通過食物鏈進入人體，嚴重影響身體健康＼[6＼]，我國農(nóng)業(yè)部于1997年做出規(guī)定，嚴禁所有β腎上腺素受體類激素在飼料和畜牧生產(chǎn)中使用[7]。

沙丁胺醇在人體內(nèi)主要發(fā)生N羥基與硫酸的結(jié)合，生成的結(jié)合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代謝產(chǎn)物，確定了4種可能的代謝物，但結(jié)果并未檢測到硫酸結(jié)合物＼[11＼]。藥物在不同種屬動物之間的代謝路徑有一定差別，同種動物不同給藥方式對藥物的代謝也不盡相同＼[10＼]。目前， 對沙丁胺醇家畜體內(nèi)的代謝研究較少，對其在家畜體內(nèi)的可能代謝產(chǎn)物和代謝路徑的報道不多，僅Montrade等利用高分辨質(zhì)譜在口服沙丁胺醇的牛尿液中發(fā)現(xiàn)了沙丁胺醇的氧化產(chǎn)物＼[12＼]。為探討豬口服給藥沙丁胺醇后的代謝物和可能代謝途徑，本研究采用UPLCQTOF MS聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合Agilent MassHunter Metabolite ID軟件，對灌胃沙丁胺醇后豬尿液和血漿中的代謝物進行分析鑒定，推斷可能代謝路徑。

1引言

生物樣品中有大量干擾組分存在，LCMS技術(shù)由于其選擇性強、靈敏度高，目前被廣泛應用于分析藥物及其在各種復雜生物基質(zhì)（全血、血漿、尿、膽汁及生物組織）中的代謝研究。不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的樣品前處理工作，而且能分離鑒定難于辨識的痕量藥物代謝產(chǎn)物，QTOF屬于高分辨質(zhì)譜，可以提供較為可靠的母體藥物或代謝產(chǎn)物分子和碎片離子的精確分子質(zhì)量，能夠獲得其元素組成等多種結(jié)構(gòu)相關(guān)信息，結(jié)合軟件能較可靠地快速推測復雜生物機制中的代謝產(chǎn)物＼[1，2＼]。

β2受體激動劑可放松支氣管、血管、腸和子宮平滑肌，增加纖毛運動頻率，調(diào)節(jié)粘膜纖毛的清除率＼[3＼]。β2受體激動劑同時具有增加脂類分解和脂肪細胞中脂類生成，增加肝糖分解和蛋白質(zhì)的合成，減少橫紋肌纖維蛋白質(zhì)的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘寧，化學名稱1（4羥基3羥甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效選擇性的β2受體激動劑，有較強的支氣管擴張作用，臨床用于平喘＼[4＼]。動物飼養(yǎng)過程中添加微量的沙丁胺醇能促進牲畜的生長、增加瘦肉率＼[5＼]，然而殘留在動物產(chǎn)品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代謝產(chǎn)物可以通過食物鏈進入人體，嚴重影響身體健康＼[6＼]，我國農(nóng)業(yè)部于1997年做出規(guī)定，嚴禁所有β腎上腺素受體類激素在飼料和畜牧生產(chǎn)中使用[7]。

沙丁胺醇在人體內(nèi)主要發(fā)生N羥基與硫酸的結(jié)合，生成的結(jié)合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代謝產(chǎn)物，確定了4種可能的代謝物，但結(jié)果并未檢測到硫酸結(jié)合物＼[11＼]。藥物在不同種屬動物之間的代謝路徑有一定差別，同種動物不同給藥方式對藥物的代謝也不盡相同＼[10＼]。目前， 對沙丁胺醇家畜體內(nèi)的代謝研究較少，對其在家畜體內(nèi)的可能代謝產(chǎn)物和代謝路徑的報道不多，僅Montrade等利用高分辨質(zhì)譜在口服沙丁胺醇的牛尿液中發(fā)現(xiàn)了沙丁胺醇的氧化產(chǎn)物＼[12＼]。為探討豬口服給藥沙丁胺醇后的代謝物和可能代謝途徑，本研究采用UPLCQTOF MS聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合Agilent MassHunter Metabolite ID軟件，對灌胃沙丁胺醇后豬尿液和血漿中的代謝物進行分析鑒定，推斷可能代謝路徑。