超高壓液相色譜飛行時間質譜法對比分析沙丁胺醇在豬尿液和血漿中的代謝產物

谷旭 劉義明 姚婷 石華樂 李俊 趙禎 秦玉昌

1引言

生物樣品中有大量干擾組分存在，LCMS技術由于其選擇性強、靈敏度高，目前被廣泛應用于分析藥物及其在各種復雜生物基質（全血、血漿、尿、膽汁及生物組織）中的代謝研究。不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的樣品前處理工作，而且能分離鑒定難于辨識的痕量藥物代謝產物，QTOF屬于高分辨質譜，可以提供較為可靠的母體藥物或代謝產物分子和碎片離子的精確分子質量，能夠獲得其元素組成等多種結構相關信息，結合軟件能較可靠地快速推測復雜生物機制中的代謝產物＼[1，2＼]。

β2受體激動劑可放松支氣管、血管、腸和子宮平滑肌，增加纖毛運動頻率，調節粘膜纖毛的清除率＼[3＼]。β2受體激動劑同時具有增加脂類分解和脂肪細胞中脂類生成，增加肝糖分解和蛋白質的合成，減少橫紋肌纖維蛋白質的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘寧，化學名稱1（4羥基3羥甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效選擇性的β2受體激動劑，有較強的支氣管擴張作用，臨床用于平喘＼[4＼]。動物飼養過程中添加微量的沙丁胺醇能促進牲畜的生長、增加瘦肉率＼[5＼]，然而殘留在動物產品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代謝產物可以通過食物鏈進入人體，嚴重影響身體健康＼[6＼]，我國農業部于1997年做出規定，嚴禁所有β腎上腺素受體類激素在飼料和畜牧生產中使用[7]。

沙丁胺醇在人體內主要發生N羥基與硫酸的結合，生成的結合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代謝產物，確定了4種可能的代謝物，但結果并未檢測到硫酸結合物＼[11＼]。藥物在不同種屬動物之間的代謝路徑有一定差別，同種動物不同給藥方式對藥物的代謝也不盡相同＼[10＼]。目前， 對沙丁胺醇家畜體內的代謝研究較少，對其在家畜體內的可能代謝產物和代謝路徑的報道不多，僅Montrade等利用高分辨質譜在口服沙丁胺醇的牛尿液中發現了沙丁胺醇的氧化產物＼[12＼]。為探討豬口服給藥沙丁胺醇后的代謝物和可能代謝途徑，本研究采用UPLCQTOF MS聯用技術，結合Agilent MassHunter Metabolite ID軟件，對灌胃沙丁胺醇后豬尿液和血漿中的代謝物進行分析鑒定，推斷可能代謝路徑。

1引言

生物樣品中有大量干擾組分存在，LCMS技術由于其選擇性強、靈敏度高，目前被廣泛應用于分析藥物及其在各種復雜生物基質（全血、血漿、尿、膽汁及生物組織）中的代謝研究。不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的樣品前處理工作，而且能分離鑒定難于辨識的痕量藥物代謝產物，QTOF屬于高分辨質譜，可以提供較為可靠的母體藥物或代謝產物分子和碎片離子的精確分子質量，能夠獲得其元素組成等多種結構相關信息，結合軟件能較可靠地快速推測復雜生物機制中的代謝產物＼[1，2＼]。

β2受體激動劑可放松支氣管、血管、腸和子宮平滑肌，增加纖毛運動頻率，調節粘膜纖毛的清除率＼[3＼]。β2受體激動劑同時具有增加脂類分解和脂肪細胞中脂類生成，增加肝糖分解和蛋白質的合成，減少橫紋肌纖維蛋白質的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘寧，化學名稱1（4羥基3羥甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效選擇性的β2受體激動劑，有較強的支氣管擴張作用，臨床用于平喘＼[4＼]。動物飼養過程中添加微量的沙丁胺醇能促進牲畜的生長、增加瘦肉率＼[5＼]，然而殘留在動物產品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代謝產物可以通過食物鏈進入人體，嚴重影響身體健康＼[6＼]，我國農業部于1997年做出規定，嚴禁所有β腎上腺素受體類激素在飼料和畜牧生產中使用[7]。

沙丁胺醇在人體內主要發生N羥基與硫酸的結合，生成的結合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代謝產物，確定了4種可能的代謝物，但結果并未檢測到硫酸結合物＼[11＼]。藥物在不同種屬動物之間的代謝路徑有一定差別，同種動物不同給藥方式對藥物的代謝也不盡相同＼[10＼]。目前， 對沙丁胺醇家畜體內的代謝研究較少，對其在家畜體內的可能代謝產物和代謝路徑的報道不多，僅Montrade等利用高分辨質譜在口服沙丁胺醇的牛尿液中發現了沙丁胺醇的氧化產物＼[12＼]。為探討豬口服給藥沙丁胺醇后的代謝物和可能代謝途徑，本研究采用UPLCQTOF MS聯用技術，結合Agilent MassHunter Metabolite ID軟件，對灌胃沙丁胺醇后豬尿液和血漿中的代謝物進行分析鑒定，推斷可能代謝路徑。

1引言

生物樣品中有大量干擾組分存在，LCMS技術由于其選擇性強、靈敏度高，目前被廣泛應用于分析藥物及其在各種復雜生物基質（全血、血漿、尿、膽汁及生物組織）中的代謝研究。不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的樣品前處理工作，而且能分離鑒定難于辨識的痕量藥物代謝產物，QTOF屬于高分辨質譜，可以提供較為可靠的母體藥物或代謝產物分子和碎片離子的精確分子質量，能夠獲得其元素組成等多種結構相關信息，結合軟件能較可靠地快速推測復雜生物機制中的代謝產物＼[1，2＼]。

β2受體激動劑可放松支氣管、血管、腸和子宮平滑肌，增加纖毛運動頻率，調節粘膜纖毛的清除率＼[3＼]。β2受體激動劑同時具有增加脂類分解和脂肪細胞中脂類生成，增加肝糖分解和蛋白質的合成，減少橫紋肌纖維蛋白質的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘寧，化學名稱1（4羥基3羥甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效選擇性的β2受體激動劑，有較強的支氣管擴張作用，臨床用于平喘＼[4＼]。動物飼養過程中添加微量的沙丁胺醇能促進牲畜的生長、增加瘦肉率＼[5＼]，然而殘留在動物產品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代謝產物可以通過食物鏈進入人體，嚴重影響身體健康＼[6＼]，我國農業部于1997年做出規定，嚴禁所有β腎上腺素受體類激素在飼料和畜牧生產中使用[7]。

沙丁胺醇在人體內主要發生N羥基與硫酸的結合，生成的結合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代謝產物，確定了4種可能的代謝物，但結果并未檢測到硫酸結合物＼[11＼]。藥物在不同種屬動物之間的代謝路徑有一定差別，同種動物不同給藥方式對藥物的代謝也不盡相同＼[10＼]。目前， 對沙丁胺醇家畜體內的代謝研究較少，對其在家畜體內的可能代謝產物和代謝路徑的報道不多，僅Montrade等利用高分辨質譜在口服沙丁胺醇的牛尿液中發現了沙丁胺醇的氧化產物＼[12＼]。為探討豬口服給藥沙丁胺醇后的代謝物和可能代謝途徑，本研究采用UPLCQTOF MS聯用技術，結合Agilent MassHunter Metabolite ID軟件，對灌胃沙丁胺醇后豬尿液和血漿中的代謝物進行分析鑒定，推斷可能代謝路徑。