陳亮,李儀(浙江省杭州市蕭山區第一人民醫院檢驗科 311200)
手足口病(HFMD)是由多種腸道病毒(EV)引起的常見傳染病,好發于嬰幼兒,可引起發熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹等癥狀,嚴重時可導致心肌炎、無菌性腦膜腦炎等并發癥[1]。HFMD 常見病原體包括EV71及柯薩奇病毒(Cox)A4、A5、A16、B1、B3等,其中以EV71和CoxA16最為常見[2-3]。EV71能夠引起中樞神經系統病變,在亞太地區的流行呈上升趨勢;CoxA16則極易導致心肌炎、心包炎等疾病[4-6]。本研究對208例HFMD 疑似患兒實驗室指標檢測結果和各類臨床資料進行了回顧性分析,旨在了解杭州地區HFDM 病原譜及臨床特征。
1.1 一般資料2012年5月至2013年7月本院就診的HFDM 疑似患兒208例,男116例、女92例,年齡10個月至7歲,平均(2.65±1.56)歲。
1.2 試劑和儀器 Qiagen公司QIAamp病毒RNA 小量提取試劑盒,江蘇默樂生物科技有限公司熒光定量反轉錄聚合酶鏈反應法(RT-PCR)EV71、CA16及通用型EV 核酸檢測試劑盒;美國ABI公司7500型PCR 擴增儀。
1.3 方法
1.3.1 標本采集208例患兒共采集標本253份,包括咽拭子標本45份、糞便標本208份。
1.3.2 RNA 提取按照試劑盒說明書的要求提取標本RNA。RNA 提取液終體積為50μL,-80℃保存備用。
1.3.3 熒光定量RT-PCR 檢測熒光定量RT-PCR 反應體系:RT-PCR緩沖液12.5μL,Taq 酶0.5μL,反轉錄酶0.5μL,引物和探針各6.5μL,RNA 核酸提取液5μL。反應條件:45℃15min,95℃2min,94℃10s、60℃10s循環40次。每批臨床標本檢測的同時檢測試劑盒自帶質控品,質控品檢測結果均在控制范圍內。
1.4 統計學處理采用SPSS13.0軟件進行數據處理和統計學分析。計數資料以例數或百分率表示,組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為比較差異有統計學意義。
2.1 不同性別和年齡患兒病原體檢測結果……