丙泊酚對肺缺血再灌注損傷大鼠炎性反應機制的影響

朱梅（荊州市傳染病（胸科）醫院麻醉科，湖北 荊州434000）

萬紹華（長江大學醫學院，湖北 荊州434023）

肺缺血再灌注損傷常見于肺移植、體外循環、肺動脈切除重建、失血性休克等，炎性反應在肺缺血再灌注損傷中起重要作用［1］。丙泊酚是常用的鎮靜催眠藥、麻醉藥，在臨床上被廣泛應用于各種麻醉。研究表明，丙泊酚可影響多種細胞因子和炎癥反應通路，具有抗氧自由基、抗脂質過氧化反應的功能及減輕炎癥反應的作用［2］。本實驗通過觀察丙泊酚對肺組織中炎性介質和脂質過氧化的變化，進一步探討丙泊酚對肺缺血再灌注損傷炎性反應的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雄性SD大鼠30只，體質量210～280g，由長江大學醫學院實驗動物中心提供。丙泊酚注射液由AstraZeneca公司提供。腫瘤壞死因子－α（TNF－α）、IL－6、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）測定試劑盒購自博士德公司。722型光柵分光光度計。

1.2 方法

1.2.1 模型建立 依照文獻［3］，3%戊巴比妥鈉25mg／kg腹腔注射麻醉，氣管切開插管后接小動物呼吸機，通氣頻率60～70次／min，潮氣量10ml／kg，呼吸比2∶1。持續心電監測。于左第5肋間左前側開胸，暴露左肺門，肝素2mg／kg腹腔注射，5min后，用微血管夾夾閉左肺門，同時潮氣量減少1／3。缺血90min后開放，恢復原潮氣量，再灌注2h后處死動物，提取肺泡灌洗液（BALF），留取左肺組織標本。

1.2.2 動物分組 隨機將實驗大鼠分為3組，每組10只。假手術對照組（A組）：左肺門游離后不夾閉；肺缺血再灌注組（B組）：夾閉左肺門90min后開放，機械通氣2h；丙泊酚預處理組（C組）：左肺門夾閉前20min，經尾靜脈注射丙泊酚20mg／kg。肺缺血再灌注組給予同體積的生理鹽水。

1.2.3 指標測定 采用酶聯免疫吸附（ELISA）測定BALF中的TNF－α、IL－6的含量；選取部分肺組織置于玻璃勻漿器制備肺組織勻漿，采用722型光柵分光光度計測定SOD、MDA含量。剩下肺組織稱重，80℃下烘干24h再稱其重量，兩者之比為肺組織濕干質量比（W／D）。

1.3 統計學分析

計量資料以（±s）表示，兩樣本均數比較采用t檢驗。P＜0.05代表差異有統計學意義。

2 結果

與假手術組（A組）比較，肺缺血再灌注組（B組）BALF中TNF－α、IL－6和肺組織 W／D均增高，SOD含量明顯下降，MDA含量明顯上升，差異均有統計學意義（P＜0.01）。給予丙泊酚預處理（C組），與肺缺血再灌注組相比，BALF中TNF－α、IL－6和肺組織 W／D均降低，肺組織SOD含量明顯升高，MDA含量明顯下降，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠BALF中TNF－α、IL－6以及肺組織W／D、SOD和MDA的比較

3 討論

研究表明，在肺缺血再灌注損傷中，細胞因子等炎性介質的異常釋放是重要環節［4］。TNF－α和IL－6的作用極為重要，TNF－α是主要炎性介質，IL－6是由單核巨噬細胞分泌的多效應細胞因子，它能引起其他炎性介質如TNF－α等進一步釋放，加重全身性炎癥反應。本研究觀察到肺缺血再灌注組BALF中TNF－α、IL－6較假手術組增高，也表明再灌注期間炎性反應增強。

目前認為肺缺血再灌注損傷與血管內皮細胞功能的失調密切有關，表現為損傷后血管通透性增加［4］。肺W／D用來評價肺水含量，其增高反映血管通透性的增加。本研究發現肺缺血再灌注損傷和丙泊酚預處理組肺W／D明顯增高，亦表明再灌注期間肺血管損傷后通透性增加，肺水腫加重。

在缺血和再灌注時，機體或細胞內自由基的產生和抗氧化防御之間嚴重失衡，導致活性氧在機體或細胞內蓄積而引起細胞毒性反應，從而導致組織損傷的過程［5］。本研究觀察到再灌注后肺組織SOD含量明顯下降，MDA含量明顯上升，與文獻［2］一致。表明缺血再灌注后肺組織內氧自由基的產生與清除的動態平衡遭到破壞，進而破壞肺內皮細胞及細胞器膜結構和功能，最終引起肺水腫、出血、滲出等損害。

本研究觀察到，丙泊酚能夠降低再灌大鼠BALF中TNF－α、IL－6含量和肺組織W／D比值，提高肺組織中SOD水平，降低MDA含量，表明丙泊酚能夠減輕缺血再灌注損傷后的炎性反應，發揮對缺血再灌注后肺損傷的保護作用。有研究表明，丙泊酚可調節FMLP受體而抑制細胞內鈣離子濃度增加，也可直接抑制電壓依賴性鈣離子通道或內質網儲備的鈣離子釋放［6－7］。目前普遍認為丙泊酚具有抗自由基、抑制脂質過氧化反應的作用，降低自由基損害，丙泊酚可能通過抗擊腦缺血再灌注后自由基損傷而起到保護作用。還有實驗證明丙泊酚能抑制缺血再灌注后神經元凋亡，阻止延遲性神經元死亡［8］。此外，丙泊酚的大豆油溶劑－長鏈甘油三酯（LCT）也可參與丙泊酚的抑制作用，LCT可能利用其脂溶特性，直接與膜NADPH結合，延遲NADPH氧化酶復合物形成，抑制黏附、吞噬作用和呼吸爆發［9］。

綜上所述，缺血再灌注肺損傷實質是一種炎癥損傷。丙泊酚主要通過抑制缺血再灌注過程中TNF－α、IL－6等炎性介質的釋放，減輕肺血管損傷，降低肺毛細血管的通透性，降低脂質過氧化水平，減輕炎癥反應及肺水腫，從而對肺缺血再灌注產生保護作用。

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