梔子種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

羅光明+董艷凱+王曉云+顏升+朱玉野

摘要：為制定梔子種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)收集的55份梔子種子進(jìn)行凈度、發(fā)芽率、千粒重、含水量、生活力的測(cè)定，采用SPSS 13.0軟件，利用K類中心聚類分析方法制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，梔子種子被分為三級(jí)，以發(fā)芽率、生活力、千粒重作為主要的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，凈度和含水量作為次要的標(biāo)準(zhǔn)，其中凈度≥82.09%、發(fā)芽率≥72.75%、千粒重≥4.12 g、生活力≥97.83%、含水量≤10.24%為一級(jí)品；凈度75.65%～82.09%、發(fā)芽率66.83%～72.75%、千粒重3.30～4.12 g、生活力96.80%～97.83%、含水量10.24%～10.28%為二級(jí)品；凈度62.21%～75.65%、發(fā)芽率57.80%～66.83%、千粒重2.58～3.30 g、生活力<96.80%、含水量≥10.28%為三級(jí)品，一級(jí)、二級(jí)為合格品，三級(jí)為不合格品。

關(guān)鍵詞：梔子；種子；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

中圖分類號(hào)：S339.3；R282.71 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）19-4628-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.19.032

Quality Standards of Gardenia Seeds

LUO Guang-ming， DONG Yan-kai， WANG Xiao-yun， YAN Sheng， ZHU Yu-ye

（College of Pharmacy， Jiangxi University of Traditional Medicine， Nanchang 330004， China）

Abstract： In order to set the quality standards of the gardenia seed， 55 gardenia seeds were collected to determine the purity， germination rate， thousand-seed-weight， moisture content and viability by SPSS 13.0 software and K class cluster analysis. Results showed that gardenia was divided into three grades. Taking germination rate， viability and thousand seed weight as the main grading standards， purity and moisture content as the secondary standard， the first grade was with purity above 82.09%， germination rate above 72.75%， thousand seed weight above 4.12 g， viability no less than 97.83%， moisture content less than 10.28%. The second grade was with purity 75.65%～82.09%， germination rate 6.83%～72.75%， thousand seed weight 3.30～4.12 g， viability 96.80%～97.83%， moisture content 10.24%～10.28%. The third grade was with purity 62.21%～75.65%， germination rate 57.80%～66.83%， thousand seed weight 2.58～3.30 g， viability no less than 96.80%， moisture content no less than 10.28%. The first and second grades were qualified products， and the third grade was unqualified products.

Key words： gardenia； seed； quality standards

梔子是茜草科（Rubiaceae）植物梔子（Gardenia jasminoides Ellis）的干燥成熟果實(shí)[1]，其化學(xué)成分非常復(fù)雜，有100多種，截至目前已經(jīng)從梔子屬植物中分離鑒定出的化合物主要有環(huán)烯醚萜類、多糖類、黃酮類、醇類、有機(jī)酸酯類、長(zhǎng)鏈烷烴類和醛類等[2]。梔子果實(shí)系傳統(tǒng)中藥亦屬衛(wèi)生部頒布的第一批藥食兩用資源，具有護(hù)肝、利膽、降壓、止血、清熱等作用[3]。梔子屬植物廣泛分布于我國(guó)長(zhǎng)江以南，資源豐富，主產(chǎn)于江西、福建、浙江、湖南、湖北、廣西等地。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)梔子的需求量日益增加，其具有廣闊的市場(chǎng)前景，栽培面積不斷擴(kuò)大。梔子的主要繁殖方法為壓條或扦插，也可用種子繁殖。但目前梔子還沒有相應(yīng)的種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，會(huì)造成梔子種子質(zhì)量良莠不齊，栽培梔子藥材品質(zhì)不穩(wěn)定。為此，對(duì)收集的55份不同產(chǎn)地和不同采集時(shí)間的梔子種子進(jìn)行凈度、千粒重、含水量、發(fā)芽率、生活力等指標(biāo)的測(cè)定，用K類中心聚類分析法對(duì)梔子種子進(jìn)行質(zhì)量分級(jí)，初步制定了梔子種子的質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，以期為規(guī)范種子市場(chǎng)，提高種子質(zhì)量提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器與試劑 萬分之一電子天平（型號(hào)BS223S，北京賽多利斯儀器有限公司）、LRH-400-G型光照培養(yǎng)箱（廣東省醫(yī)療器械廠）、LRH-250-Z型振蕩培養(yǎng)箱（廣東省醫(yī)療器械廠）、GZX-9140ME型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）、培養(yǎng)皿（9 cm×3 cm）、濾紙（9 cm）、鋁盒（直徑5.5 cm）、標(biāo)準(zhǔn)篩（0.9 mm孔徑，GB/T6003.1-1997，浙江上虞市道墟張興紗篩廠）；瓊脂粉（北京索萊寶科技有限公司）、BTB（溴麝香草酚藍(lán)，北京索萊寶科技有限公司AS76-59-5）、雙蒸水（自制）。

1.1.2 試驗(yàn)藥材 樣品為2013年11～12月采自江西、浙江、四川、廣西、湖南、湖北、福建等地全國(guó)55個(gè)野生或栽培居群，具體見表1，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源學(xué)科組葛菲教授鑒定為茜草科植物梔子的成熟果實(shí)。

1.2 方法

1.2.1 凈度分析 按梔子種子檢驗(yàn)規(guī)程規(guī)定，凈度分析試驗(yàn)中送檢樣品為80 g（凈度分析試樣的大小估計(jì)至少含有2 500個(gè)種子單位的重量[4]）。采用徒手減半法從每份樣品中分取3份全試樣[5]，將試樣分離成干凈種子、廢種子及一般雜質(zhì)3種成分后分別稱重，精確至0.001 g。將分析后的各種成分重量之和與原始重量比較，如果增失差距偏離原始重量的5%必須重新再做，種子凈度=[凈種子/（凈種子+廢種子+一般雜質(zhì)）]×100%。千粒重、發(fā)芽率、生活力、水分測(cè)定均使用凈種子。

1.2.2 千粒重 選擇五百粒法測(cè)定。先將樣品充分混合，隨機(jī)從中取3份試樣，每份500粒，放在天平上稱重，精確到0.01 g，再換算成1 000粒種子的重量。

1.2.3 含水量 采用高溫法。取5 g整粒種子用于含水量的測(cè)定。先將樣品盒于130 ℃下烘干至恒重，并記下盒號(hào)，然后將試樣放入預(yù)先烘干和稱重過的樣品盒內(nèi)，將烘箱溫度保持在130～133 ℃。在千分之一天平上稱取試樣3份，然后打開盒蓋，一起放入預(yù)熱好的烘箱內(nèi)，1.5 h后取出后放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重計(jì)算水分含量。種子水分=[（烘前試樣重-烘后試樣重）/烘前試樣重]×100%。

1.2.4 發(fā)芽率 將梔子種子于25 ℃恒溫浸種1 d，采用濾紙作為發(fā)芽床，30 ℃恒溫?zé)o光照進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子，每天補(bǔ)水統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況，第21天計(jì)算發(fā)芽率。發(fā)芽率=[發(fā)芽的種子數(shù)/供檢測(cè)的種子數(shù)]×100%。

1.2.5 生活力 采用BTB法。在培養(yǎng)皿里備好0.1% BTB凝膠，將浸泡2 h之后的種子整齊地包埋于凝膠中，放入30 ℃恒溫箱中染色，40 min后觀察種子周圍出現(xiàn)黃色暈圈情況。設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)25粒種子。

2 結(jié)果與分析

2.1 凈度檢測(cè)結(jié)果

從表2可以看出，55份梔子種子的凈度差異明顯，其中凈度最高的為97.75%，產(chǎn)自浙江省溫州市平陽縣昆陽鎮(zhèn)蓮花山；最低的為33.71%，產(chǎn)自浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村的野生品種，其中產(chǎn)于江西、廣西、浙江、福建的種子凈度較高，大多在70%以上。雜質(zhì)大多為殘留的果肉和果殼，可先用篩子將較小的雜質(zhì)分離，再將較大的雜質(zhì)與種子分離[6]。

2.2 千粒重測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的種子千粒重差異明顯，這與栽培品種、遺傳因素、產(chǎn)地和采收時(shí)間等有關(guān)。浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村的野生品種千粒重最小，為1.56 g；福建省寧德市霞浦縣東安村的種子千粒重最大，為5.35 g，大部分種子的千粒重介于3.0～4.0 g之間。

2.3 含水量測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的種子含水量差異不明顯。含水量最低的是四川省資陽市雁江區(qū)的種子，為7.74%；最高的是產(chǎn)于河南省唐河縣的種子，為12.91%。大部分種子的含水量集中于9%～11%之間。

2.4 發(fā)芽率測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的梔子種子發(fā)芽率存在明顯差異。發(fā)芽率最低為36.00%，產(chǎn)于湖北省大悟縣新城鎮(zhèn)段家畈；最高的為92.00%，產(chǎn)于四川省內(nèi)江市資中縣，大部分種子的發(fā)芽率都在50%以上。采收時(shí)間的不同造成種子的成熟度不同，故發(fā)芽率存在差異。

2.5 生活力測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)采用的是新鮮采集的種子，故每個(gè)產(chǎn)地的種子都具有很高的生活力。從表2可以看出，部分產(chǎn)地的種子生活力達(dá)到了100%，分別為江西省吉安市新干縣界埠鎮(zhèn)胡家老村、江西省宜春市樟樹市義城鎮(zhèn)羅崗村、浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村（野生）、浙江省溫州市文成縣金星鄉(xiāng)等產(chǎn)地；最低的為89.33%，產(chǎn)于四川省廣元市青川縣，除此之外所有種子的生活力都達(dá)到了90%以上。

2.6 梔子種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的制定

采用SPSS 13.0軟件對(duì)55份梔子種子樣品的凈度、含水量、生活力、千粒重和發(fā)芽率5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行K類中心聚類分析，最終類中心值見表3。

以梔子種子凈度、千粒重、含水量、發(fā)芽率和生活力5項(xiàng)指標(biāo)的聚類中心值作為梔子種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的參考值，并結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)和可操作性初步制定了梔子種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（表4）。其中一級(jí)品粒大飽滿，大小均勻，有光澤，廢種子和雜質(zhì)很少，有16份；二級(jí)品顆粒較飽滿，略有光澤，大小較均勻，有一定量的廢種子和雜質(zhì)，有24份；三級(jí)品種子瘦小干癟，無光澤，大小不均勻，廢種子和雜質(zhì)較多，有15份。一級(jí)、二級(jí)為合格品，三級(jí)為不合格品，合格品占72.73%。

3 小結(jié)與討論

在分級(jí)的5項(xiàng)指標(biāo)中發(fā)芽率最重要，因其可較直接反映種子的田間出苗率；生活力可以直接反映種子的發(fā)芽率；千粒重可反映種子飽滿程度和種子成熟度等。而凈度和水分卻不同，往往可通過再加工如清選和干燥等來提高質(zhì)量[7]。因此在本研究范圍內(nèi)梔子種子分級(jí)以發(fā)芽率、生活力、千粒重為主要指標(biāo)進(jìn)行，凈度、含水量作為次要指標(biāo)，發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的，離不開凈度分析[8]，種子含水量是影響種子壽命和安全貯藏的重要因素[5]，所以同時(shí)滿足凈度和含水量?jī)身?xiàng)指標(biāo)方可定為合格品，前三項(xiàng)指標(biāo)的任何一項(xiàng)低于標(biāo)準(zhǔn)時(shí)降低一級(jí)[9]。

梔子種子的生活力會(huì)隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，因而考慮到貯藏年限的問題，故將生活力≥96.80%的種子劃分為合格品。梔子種子的含水量在9%～11%之間，為了防止種子發(fā)霉變質(zhì)，保證種子質(zhì)量，將合格品的含水量定為10.24%及以內(nèi)。不同產(chǎn)地的種子中廢種子所占比例差異明顯，是影響凈度的主要原因，有些產(chǎn)地的種子中廢種子占了大部分，在一定程度上影響了種子的質(zhì)量。不同來源梔子種子最重要的指標(biāo)發(fā)芽率相差懸殊，說明梔子種子的質(zhì)量波動(dòng)較大，千粒重是種子活力的重要指標(biāo)，凡粒大飽滿充實(shí)的種子，其內(nèi)部貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多，發(fā)芽整齊，出芽率高，幼苗健壯[10]，但千粒重大的種子也有發(fā)芽率較低的，這可能與梔子種子本身遺傳差異大的特性有關(guān)，遺傳差異表現(xiàn)在種子形態(tài)大小上，造成千粒重的差異[9]，藥材種植后能否獲得穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)并且達(dá)到國(guó)家部門規(guī)定的可控指標(biāo)在很大程度上取決于種子的優(yōu)劣，因此加強(qiáng)梔子種子繁育和建立梔子種子質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)體系，培育優(yōu)質(zhì)的品種非常重要。此質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于盡快實(shí)現(xiàn)梔子種子的標(biāo)準(zhǔn)化，從源頭保證梔子的質(zhì)量和規(guī)范化種植具有現(xiàn)實(shí)可行的指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2] 顏 升，董艷凱，陳 建，等.中藥梔子的研究現(xiàn)狀[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（18）：7759-7760.

[3] 廖夫生.中藥梔子研究進(jìn)展[J].廣州化工，2013，41（1）：12-13.

[4] 顏啟傳.種子學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001.

[5] 楊成民，張 爭(zhēng)，魏建和，等.桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2012，35（5）：679-682.

[6] 郭巧生，厲彥森，王長(zhǎng)林.明黨參種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志，2007，32（6）：478-480.

[7] 趙 鑫，凱撒·蘇來曼，朱國(guó)強(qiáng)，等.新疆阿魏種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2010，33（9）：1366-1367.

[8] 郭巧生，張賢秀，王艷茹，等.夏枯草種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J].中國(guó)中藥雜志，2009，34（7）：812-815.

[9] 徐 榮，周 峰，陳 君，等.肉蓯蓉種子質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)與分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2009，32（4）：475-478.

[10] 劉艷秋.黃芩種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].科技信息，2008（36）：372-374.

1.1.2 試驗(yàn)藥材 樣品為2013年11～12月采自江西、浙江、四川、廣西、湖南、湖北、福建等地全國(guó)55個(gè)野生或栽培居群，具體見表1，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源學(xué)科組葛菲教授鑒定為茜草科植物梔子的成熟果實(shí)。

1.2 方法

1.2.1 凈度分析 按梔子種子檢驗(yàn)規(guī)程規(guī)定，凈度分析試驗(yàn)中送檢樣品為80 g（凈度分析試樣的大小估計(jì)至少含有2 500個(gè)種子單位的重量[4]）。采用徒手減半法從每份樣品中分取3份全試樣[5]，將試樣分離成干凈種子、廢種子及一般雜質(zhì)3種成分后分別稱重，精確至0.001 g。將分析后的各種成分重量之和與原始重量比較，如果增失差距偏離原始重量的5%必須重新再做，種子凈度=[凈種子/（凈種子+廢種子+一般雜質(zhì)）]×100%。千粒重、發(fā)芽率、生活力、水分測(cè)定均使用凈種子。

1.2.2 千粒重 選擇五百粒法測(cè)定。先將樣品充分混合，隨機(jī)從中取3份試樣，每份500粒，放在天平上稱重，精確到0.01 g，再換算成1 000粒種子的重量。

1.2.3 含水量 采用高溫法。取5 g整粒種子用于含水量的測(cè)定。先將樣品盒于130 ℃下烘干至恒重，并記下盒號(hào)，然后將試樣放入預(yù)先烘干和稱重過的樣品盒內(nèi)，將烘箱溫度保持在130～133 ℃。在千分之一天平上稱取試樣3份，然后打開盒蓋，一起放入預(yù)熱好的烘箱內(nèi)，1.5 h后取出后放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重計(jì)算水分含量。種子水分=[（烘前試樣重-烘后試樣重）/烘前試樣重]×100%。

1.2.4 發(fā)芽率 將梔子種子于25 ℃恒溫浸種1 d，采用濾紙作為發(fā)芽床，30 ℃恒溫?zé)o光照進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子，每天補(bǔ)水統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況，第21天計(jì)算發(fā)芽率。發(fā)芽率=[發(fā)芽的種子數(shù)/供檢測(cè)的種子數(shù)]×100%。

1.2.5 生活力 采用BTB法。在培養(yǎng)皿里備好0.1% BTB凝膠，將浸泡2 h之后的種子整齊地包埋于凝膠中，放入30 ℃恒溫箱中染色，40 min后觀察種子周圍出現(xiàn)黃色暈圈情況。設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)25粒種子。

2 結(jié)果與分析

2.1 凈度檢測(cè)結(jié)果

從表2可以看出，55份梔子種子的凈度差異明顯，其中凈度最高的為97.75%，產(chǎn)自浙江省溫州市平陽縣昆陽鎮(zhèn)蓮花山；最低的為33.71%，產(chǎn)自浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村的野生品種，其中產(chǎn)于江西、廣西、浙江、福建的種子凈度較高，大多在70%以上。雜質(zhì)大多為殘留的果肉和果殼，可先用篩子將較小的雜質(zhì)分離，再將較大的雜質(zhì)與種子分離[6]。

2.2 千粒重測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的種子千粒重差異明顯，這與栽培品種、遺傳因素、產(chǎn)地和采收時(shí)間等有關(guān)。浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村的野生品種千粒重最小，為1.56 g；福建省寧德市霞浦縣東安村的種子千粒重最大，為5.35 g，大部分種子的千粒重介于3.0～4.0 g之間。

2.3 含水量測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的種子含水量差異不明顯。含水量最低的是四川省資陽市雁江區(qū)的種子，為7.74%；最高的是產(chǎn)于河南省唐河縣的種子，為12.91%。大部分種子的含水量集中于9%～11%之間。

2.4 發(fā)芽率測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的梔子種子發(fā)芽率存在明顯差異。發(fā)芽率最低為36.00%，產(chǎn)于湖北省大悟縣新城鎮(zhèn)段家畈；最高的為92.00%，產(chǎn)于四川省內(nèi)江市資中縣，大部分種子的發(fā)芽率都在50%以上。采收時(shí)間的不同造成種子的成熟度不同，故發(fā)芽率存在差異。

2.5 生活力測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)采用的是新鮮采集的種子，故每個(gè)產(chǎn)地的種子都具有很高的生活力。從表2可以看出，部分產(chǎn)地的種子生活力達(dá)到了100%，分別為江西省吉安市新干縣界埠鎮(zhèn)胡家老村、江西省宜春市樟樹市義城鎮(zhèn)羅崗村、浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村（野生）、浙江省溫州市文成縣金星鄉(xiāng)等產(chǎn)地；最低的為89.33%，產(chǎn)于四川省廣元市青川縣，除此之外所有種子的生活力都達(dá)到了90%以上。

2.6 梔子種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的制定

采用SPSS 13.0軟件對(duì)55份梔子種子樣品的凈度、含水量、生活力、千粒重和發(fā)芽率5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行K類中心聚類分析，最終類中心值見表3。

以梔子種子凈度、千粒重、含水量、發(fā)芽率和生活力5項(xiàng)指標(biāo)的聚類中心值作為梔子種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的參考值，并結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)和可操作性初步制定了梔子種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（表4）。其中一級(jí)品粒大飽滿，大小均勻，有光澤，廢種子和雜質(zhì)很少，有16份；二級(jí)品顆粒較飽滿，略有光澤，大小較均勻，有一定量的廢種子和雜質(zhì)，有24份；三級(jí)品種子瘦小干癟，無光澤，大小不均勻，廢種子和雜質(zhì)較多，有15份。一級(jí)、二級(jí)為合格品，三級(jí)為不合格品，合格品占72.73%。

3 小結(jié)與討論

在分級(jí)的5項(xiàng)指標(biāo)中發(fā)芽率最重要，因其可較直接反映種子的田間出苗率；生活力可以直接反映種子的發(fā)芽率；千粒重可反映種子飽滿程度和種子成熟度等。而凈度和水分卻不同，往往可通過再加工如清選和干燥等來提高質(zhì)量[7]。因此在本研究范圍內(nèi)梔子種子分級(jí)以發(fā)芽率、生活力、千粒重為主要指標(biāo)進(jìn)行，凈度、含水量作為次要指標(biāo)，發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的，離不開凈度分析[8]，種子含水量是影響種子壽命和安全貯藏的重要因素[5]，所以同時(shí)滿足凈度和含水量?jī)身?xiàng)指標(biāo)方可定為合格品，前三項(xiàng)指標(biāo)的任何一項(xiàng)低于標(biāo)準(zhǔn)時(shí)降低一級(jí)[9]。

梔子種子的生活力會(huì)隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，因而考慮到貯藏年限的問題，故將生活力≥96.80%的種子劃分為合格品。梔子種子的含水量在9%～11%之間，為了防止種子發(fā)霉變質(zhì)，保證種子質(zhì)量，將合格品的含水量定為10.24%及以內(nèi)。不同產(chǎn)地的種子中廢種子所占比例差異明顯，是影響凈度的主要原因，有些產(chǎn)地的種子中廢種子占了大部分，在一定程度上影響了種子的質(zhì)量。不同來源梔子種子最重要的指標(biāo)發(fā)芽率相差懸殊，說明梔子種子的質(zhì)量波動(dòng)較大，千粒重是種子活力的重要指標(biāo)，凡粒大飽滿充實(shí)的種子，其內(nèi)部貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多，發(fā)芽整齊，出芽率高，幼苗健壯[10]，但千粒重大的種子也有發(fā)芽率較低的，這可能與梔子種子本身遺傳差異大的特性有關(guān)，遺傳差異表現(xiàn)在種子形態(tài)大小上，造成千粒重的差異[9]，藥材種植后能否獲得穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)并且達(dá)到國(guó)家部門規(guī)定的可控指標(biāo)在很大程度上取決于種子的優(yōu)劣，因此加強(qiáng)梔子種子繁育和建立梔子種子質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)體系，培育優(yōu)質(zhì)的品種非常重要。此質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于盡快實(shí)現(xiàn)梔子種子的標(biāo)準(zhǔn)化，從源頭保證梔子的質(zhì)量和規(guī)范化種植具有現(xiàn)實(shí)可行的指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2] 顏 升，董艷凱，陳 建，等.中藥梔子的研究現(xiàn)狀[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（18）：7759-7760.

[3] 廖夫生.中藥梔子研究進(jìn)展[J].廣州化工，2013，41（1）：12-13.

[4] 顏啟傳.種子學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001.

[5] 楊成民，張 爭(zhēng)，魏建和，等.桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2012，35（5）：679-682.

[6] 郭巧生，厲彥森，王長(zhǎng)林.明黨參種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志，2007，32（6）：478-480.

[7] 趙 鑫，凱撒·蘇來曼，朱國(guó)強(qiáng)，等.新疆阿魏種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2010，33（9）：1366-1367.

[8] 郭巧生，張賢秀，王艷茹，等.夏枯草種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J].中國(guó)中藥雜志，2009，34（7）：812-815.

[9] 徐 榮，周 峰，陳 君，等.肉蓯蓉種子質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)與分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2009，32（4）：475-478.

[10] 劉艷秋.黃芩種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].科技信息，2008（36）：372-374.

1.1.2 試驗(yàn)藥材 樣品為2013年11～12月采自江西、浙江、四川、廣西、湖南、湖北、福建等地全國(guó)55個(gè)野生或栽培居群，具體見表1，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源學(xué)科組葛菲教授鑒定為茜草科植物梔子的成熟果實(shí)。

1.2 方法

1.2.1 凈度分析 按梔子種子檢驗(yàn)規(guī)程規(guī)定，凈度分析試驗(yàn)中送檢樣品為80 g（凈度分析試樣的大小估計(jì)至少含有2 500個(gè)種子單位的重量[4]）。采用徒手減半法從每份樣品中分取3份全試樣[5]，將試樣分離成干凈種子、廢種子及一般雜質(zhì)3種成分后分別稱重，精確至0.001 g。將分析后的各種成分重量之和與原始重量比較，如果增失差距偏離原始重量的5%必須重新再做，種子凈度=[凈種子/（凈種子+廢種子+一般雜質(zhì)）]×100%。千粒重、發(fā)芽率、生活力、水分測(cè)定均使用凈種子。

1.2.2 千粒重 選擇五百粒法測(cè)定。先將樣品充分混合，隨機(jī)從中取3份試樣，每份500粒，放在天平上稱重，精確到0.01 g，再換算成1 000粒種子的重量。

1.2.3 含水量 采用高溫法。取5 g整粒種子用于含水量的測(cè)定。先將樣品盒于130 ℃下烘干至恒重，并記下盒號(hào)，然后將試樣放入預(yù)先烘干和稱重過的樣品盒內(nèi)，將烘箱溫度保持在130～133 ℃。在千分之一天平上稱取試樣3份，然后打開盒蓋，一起放入預(yù)熱好的烘箱內(nèi)，1.5 h后取出后放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重計(jì)算水分含量。種子水分=[（烘前試樣重-烘后試樣重）/烘前試樣重]×100%。

1.2.4 發(fā)芽率 將梔子種子于25 ℃恒溫浸種1 d，采用濾紙作為發(fā)芽床，30 ℃恒溫?zé)o光照進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子，每天補(bǔ)水統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況，第21天計(jì)算發(fā)芽率。發(fā)芽率=[發(fā)芽的種子數(shù)/供檢測(cè)的種子數(shù)]×100%。

1.2.5 生活力 采用BTB法。在培養(yǎng)皿里備好0.1% BTB凝膠，將浸泡2 h之后的種子整齊地包埋于凝膠中，放入30 ℃恒溫箱中染色，40 min后觀察種子周圍出現(xiàn)黃色暈圈情況。設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)25粒種子。

2 結(jié)果與分析

2.1 凈度檢測(cè)結(jié)果

從表2可以看出，55份梔子種子的凈度差異明顯，其中凈度最高的為97.75%，產(chǎn)自浙江省溫州市平陽縣昆陽鎮(zhèn)蓮花山；最低的為33.71%，產(chǎn)自浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村的野生品種，其中產(chǎn)于江西、廣西、浙江、福建的種子凈度較高，大多在70%以上。雜質(zhì)大多為殘留的果肉和果殼，可先用篩子將較小的雜質(zhì)分離，再將較大的雜質(zhì)與種子分離[6]。

2.2 千粒重測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的種子千粒重差異明顯，這與栽培品種、遺傳因素、產(chǎn)地和采收時(shí)間等有關(guān)。浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村的野生品種千粒重最小，為1.56 g；福建省寧德市霞浦縣東安村的種子千粒重最大，為5.35 g，大部分種子的千粒重介于3.0～4.0 g之間。

2.3 含水量測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的種子含水量差異不明顯。含水量最低的是四川省資陽市雁江區(qū)的種子，為7.74%；最高的是產(chǎn)于河南省唐河縣的種子，為12.91%。大部分種子的含水量集中于9%～11%之間。

2.4 發(fā)芽率測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，不同產(chǎn)地的梔子種子發(fā)芽率存在明顯差異。發(fā)芽率最低為36.00%，產(chǎn)于湖北省大悟縣新城鎮(zhèn)段家畈；最高的為92.00%，產(chǎn)于四川省內(nèi)江市資中縣，大部分種子的發(fā)芽率都在50%以上。采收時(shí)間的不同造成種子的成熟度不同，故發(fā)芽率存在差異。

2.5 生活力測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)采用的是新鮮采集的種子，故每個(gè)產(chǎn)地的種子都具有很高的生活力。從表2可以看出，部分產(chǎn)地的種子生活力達(dá)到了100%，分別為江西省吉安市新干縣界埠鎮(zhèn)胡家老村、江西省宜春市樟樹市義城鎮(zhèn)羅崗村、浙江省溫州市永嘉縣下橋鎮(zhèn)吳垟村（野生）、浙江省溫州市文成縣金星鄉(xiāng)等產(chǎn)地；最低的為89.33%，產(chǎn)于四川省廣元市青川縣，除此之外所有種子的生活力都達(dá)到了90%以上。

2.6 梔子種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的制定

采用SPSS 13.0軟件對(duì)55份梔子種子樣品的凈度、含水量、生活力、千粒重和發(fā)芽率5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行K類中心聚類分析，最終類中心值見表3。

以梔子種子凈度、千粒重、含水量、發(fā)芽率和生活力5項(xiàng)指標(biāo)的聚類中心值作為梔子種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的參考值，并結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)和可操作性初步制定了梔子種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（表4）。其中一級(jí)品粒大飽滿，大小均勻，有光澤，廢種子和雜質(zhì)很少，有16份；二級(jí)品顆粒較飽滿，略有光澤，大小較均勻，有一定量的廢種子和雜質(zhì)，有24份；三級(jí)品種子瘦小干癟，無光澤，大小不均勻，廢種子和雜質(zhì)較多，有15份。一級(jí)、二級(jí)為合格品，三級(jí)為不合格品，合格品占72.73%。

3 小結(jié)與討論

在分級(jí)的5項(xiàng)指標(biāo)中發(fā)芽率最重要，因其可較直接反映種子的田間出苗率；生活力可以直接反映種子的發(fā)芽率；千粒重可反映種子飽滿程度和種子成熟度等。而凈度和水分卻不同，往往可通過再加工如清選和干燥等來提高質(zhì)量[7]。因此在本研究范圍內(nèi)梔子種子分級(jí)以發(fā)芽率、生活力、千粒重為主要指標(biāo)進(jìn)行，凈度、含水量作為次要指標(biāo)，發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的，離不開凈度分析[8]，種子含水量是影響種子壽命和安全貯藏的重要因素[5]，所以同時(shí)滿足凈度和含水量?jī)身?xiàng)指標(biāo)方可定為合格品，前三項(xiàng)指標(biāo)的任何一項(xiàng)低于標(biāo)準(zhǔn)時(shí)降低一級(jí)[9]。

梔子種子的生活力會(huì)隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，因而考慮到貯藏年限的問題，故將生活力≥96.80%的種子劃分為合格品。梔子種子的含水量在9%～11%之間，為了防止種子發(fā)霉變質(zhì)，保證種子質(zhì)量，將合格品的含水量定為10.24%及以內(nèi)。不同產(chǎn)地的種子中廢種子所占比例差異明顯，是影響凈度的主要原因，有些產(chǎn)地的種子中廢種子占了大部分，在一定程度上影響了種子的質(zhì)量。不同來源梔子種子最重要的指標(biāo)發(fā)芽率相差懸殊，說明梔子種子的質(zhì)量波動(dòng)較大，千粒重是種子活力的重要指標(biāo)，凡粒大飽滿充實(shí)的種子，其內(nèi)部貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多，發(fā)芽整齊，出芽率高，幼苗健壯[10]，但千粒重大的種子也有發(fā)芽率較低的，這可能與梔子種子本身遺傳差異大的特性有關(guān)，遺傳差異表現(xiàn)在種子形態(tài)大小上，造成千粒重的差異[9]，藥材種植后能否獲得穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)并且達(dá)到國(guó)家部門規(guī)定的可控指標(biāo)在很大程度上取決于種子的優(yōu)劣，因此加強(qiáng)梔子種子繁育和建立梔子種子質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)體系，培育優(yōu)質(zhì)的品種非常重要。此質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于盡快實(shí)現(xiàn)梔子種子的標(biāo)準(zhǔn)化，從源頭保證梔子的質(zhì)量和規(guī)范化種植具有現(xiàn)實(shí)可行的指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2] 顏 升，董艷凱，陳 建，等.中藥梔子的研究現(xiàn)狀[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（18）：7759-7760.

[3] 廖夫生.中藥梔子研究進(jìn)展[J].廣州化工，2013，41（1）：12-13.

[4] 顏啟傳.種子學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001.

[5] 楊成民，張 爭(zhēng)，魏建和，等.桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2012，35（5）：679-682.

[6] 郭巧生，厲彥森，王長(zhǎng)林.明黨參種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志，2007，32（6）：478-480.

[7] 趙 鑫，凱撒·蘇來曼，朱國(guó)強(qiáng)，等.新疆阿魏種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2010，33（9）：1366-1367.

[8] 郭巧生，張賢秀，王艷茹，等.夏枯草種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J].中國(guó)中藥雜志，2009，34（7）：812-815.

[9] 徐 榮，周 峰，陳 君，等.肉蓯蓉種子質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)與分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2009，32（4）：475-478.

[10] 劉艷秋.黃芩種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].科技信息，2008（36）：372-374.