微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題及處理

微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)的原理：在微柱凝膠介質(zhì)中，紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，利用凝膠的空間位阻，經(jīng)低速離心，凝集的紅細(xì)胞懸浮在凝膠上層，而未和抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則沉于凝膠底部（管底尖部）。

微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)：微柱凝膠實(shí)驗(yàn)（又名微柱凝膠血型卡法）有結(jié)果清楚明確、結(jié)果穩(wěn)定可保存、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可標(biāo)準(zhǔn)化操作、自動(dòng)化程度高、可檢出IgG抗體、標(biāo)本用量少、降低錯(cuò)誤發(fā)生率的優(yōu)點(diǎn)。微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題：

1主側(cè)不凝集，次側(cè)凝集

1.1微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)如果主側(cè)不凝集，而次側(cè)凝集，原因有：①患者的紅細(xì)胞已經(jīng)包被了抗體（自身抗體，直接抗人球蛋白試驗(yàn)即DAT陽(yáng)性反應(yīng)）。最常見(jiàn)的原因是患者有免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤以及骨科患者。②供血者血漿中存在針對(duì)患者紅細(xì)胞的抗體。③患者與供血者的ABO血型不合。

1.2處理

1.2.1患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)：患者05%紅細(xì)胞懸液50ul加入合血卡主側(cè)或次側(cè)，立即離心5min（900rpm2min；1500rpm3min。程序已設(shè)置好。），取出肉眼判定結(jié)果。如果為陽(yáng)性結(jié)果，則說(shuō)明患者自身紅細(xì)胞問(wèn)題，即患者紅細(xì)胞已被致敏，此袋血可以發(fā)出，但報(bào)告寫清楚：主側(cè)不凝集，次側(cè)凝集，患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性，請(qǐng)緩慢輸注。

1.2.2如果患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)為陰性結(jié)果，則查找獻(xiàn)血員血漿中是否存在不完全抗體。用獻(xiàn)血員血漿作不完全抗體篩查試驗(yàn)：08%標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各50ul(1滴)加入相應(yīng)凝膠管中，再加獻(xiàn)血員血漿50ul，37℃孵育15min，離心5min（900rpm2min；1500rpm3min。程序已設(shè)置好。），取出肉眼判斷結(jié)果。如果為陽(yáng)性結(jié)果，則說(shuō)明獻(xiàn)血員血漿中存在不完全抗體，此袋血不能發(fā)出，必須換一袋血再重新合血

1.2.3如果還查找不出原因，則請(qǐng)臨床重新抽取血液標(biāo)本，用新標(biāo)本重新合血。

2主側(cè)凝集，次側(cè)不凝集

2.1微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)如果主側(cè)凝集，次側(cè)不凝集，原因有：①患者或供血者ABO定型不正確，或二者的ABO血型不配合。②某些亞型的特異性非常強(qiáng)。③患者血清中存在同種抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原發(fā)生了反應(yīng)。④供血者紅細(xì)胞上已經(jīng)包被了抗體。⑤患者血清不正常，患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐。

2.2處理①重新鑒定血型，如屬血型錯(cuò)誤，則重新用同型血合血。②如屬亞型，則此袋血不可以發(fā)出，必須換一袋血重新合血。③如果患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐，則立即停止輸注大分子藥物，2h后重新抽取血液標(biāo)本，重新合血。

3主次側(cè)均凝集

3.1微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)如果主次側(cè)均凝集，原因主要是ABO血型的錯(cuò)誤。

3.2處理重新檢測(cè)受血者和獻(xiàn)血者的ABO血型（正反定型），必須用ABO、RHD血型定型試劑卡（單克隆抗體）（微柱凝膠卡）作血型鑒定，如果正反定型不符，要按相應(yīng)方法處理，直到結(jié)果能做出合理解釋為止。

注意事項(xiàng)：①抗人球蛋白凝膠合血卡必須標(biāo)注患者姓名和獻(xiàn)血員血袋號(hào)（后4位），一卡可以合三袋血。②微柱凝膠卡的準(zhǔn)備：合血前首先觀察微柱凝膠卡的外觀如有干膠、雜質(zhì)、氣泡不可使用，然后用專用離心機(jī)離心3~4min。③紅細(xì)胞懸液濃度不可太濃或太淡，應(yīng)以0.5%~0.8%為宜。④冬天可將生理鹽水37℃孵育后配紅細(xì)胞懸液，遇疑難情況，可用溫鹽水洗滌紅細(xì)胞后再作血型鑒定和合血。⑤血清、紅細(xì)胞懸液應(yīng)加至卡反應(yīng)室中。⑥可疑凝集時(shí)，則再離心5min，再觀察結(jié)果。⑦血清或血漿標(biāo)本必須充分去纖維蛋白，否則標(biāo)本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出，阻礙陰性紅細(xì)胞沉降，呈假陽(yáng)性反應(yīng)或出現(xiàn)混合凝集。若血漿標(biāo)本上清液有絮狀物或顆粒，可將上清液再離心使纖維蛋白下沉。配紅細(xì)胞懸液時(shí)將吸頭申入管底部，避免吸入纖維蛋白。供血者血液標(biāo)本必須離心，合血管的血漿與紅細(xì)胞交界處含有較多纖維蛋白，應(yīng)把交界處剪掉。⑧某些疾病、藥物等可導(dǎo)致交叉配血不合，應(yīng)加以區(qū)別。⑨異常血清蛋白及細(xì)菌可影響結(jié)果。⑩微柱凝膠卡應(yīng)放在18~25℃儲(chǔ)存，應(yīng)注意防重物壓、防高溫。

總之，微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有不配合（一側(cè)凝集或兩側(cè)均凝集），首先應(yīng)考慮受血者和供血者的ABO定型是否有錯(cuò)，必須重新鑒定血型，包括RH血型，必須做不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)。其次，應(yīng)注意有無(wú)特異性同種抗體、特異性未知的同種抗體存在。患者的血清若在室溫、37℃或抗人球蛋白中凝集所有其他紅細(xì)胞，造成交叉配血試驗(yàn)困難時(shí)，應(yīng)及時(shí)請(qǐng)示上級(jí)主管或主任。必要時(shí)請(qǐng)求上級(jí)血液中心指導(dǎo)和解決問(wèn)題。

編輯/孫杰