999精品在线视频,手机成人午夜在线视频,久久不卡国产精品无码,中日无码在线观看,成人av手机在线观看,日韩精品亚洲一区中文字幕,亚洲av无码人妻,四虎国产在线观看 ?

蕨菜多糖提取條件研究

2015-01-01 03:10:56李文瓊
皖西學院學報 2015年5期
關鍵詞:實驗

張 莉,李文瓊

(1.皖西學院生物與制藥工程學院,安徽 六安237012;2.蘭州軍區疾病預防控制中心,甘肅 蘭州730020)

蕨菜又名拳頭菜,如意菜,龍爪菜等,含有多種對人體有益的營養成分[1-2]。近年來已成為深受人們熱愛的山野菜[2-4]。蕨菜中含有豐富的黃酮類物質,其含量高達7.28%[5],目前,研究發現蕨菜黃酮具有抗氧化以及增強機體免疫功能等保健作用[4-7]。目前,有關蕨菜化學成分分析,尤其是黃酮類化合物的研究較多[5-7],多糖具有生理功能[8-9],但對于蕨菜多糖的相關研究報道較少,本文以皖西大別山產出野生蕨菜為原料,對其多糖的提取條件進行相關研究,多糖提取的原料也可采用提取黃酮類化合物后的殘渣,因此本研究為蕨菜的進一步的開發,綜合利用蕨菜資源提供了依據。

1 材料和方法

1.1 材料

蕨菜:2014年4月購于安徽霍山縣。

蕨菜粉:新鮮蕨菜103℃烘箱干燥,粉碎,過40目篩。

1.2 儀器及試劑

1.2.1 儀器

TD5-2自動離心機(長沙平凡儀器表有限公司);HH-2恒溫水浴鍋(國華電器有限公司);TU-1901型紫外可見光分光光度計(北京普析通用儀器設備有限公司);101AS-2型不銹鋼數顯電熱干燥箱(上海浦東躍欣科學儀器廠);FA1004型電子天平(上海精科天平)等。

1.2.2 試劑

無水乙醚,無水乙醇,葡萄糖,濃硫酸,苯酚等均為國產分析純。

1.3 實驗方法

1.3.1 蕨菜粉的脫脂處理

取蕨菜粉放于烘箱,103℃烘至恒重,將蕨菜粉用濾紙包成濾紙包,用無水乙醚作為提取劑,水浴45℃加熱,索氏提取法脫脂。直到洗脫液無色,拿出濾紙包,放在通風處等乙醚揮發到氣味比較淡時放入烘箱,103℃烘至恒重。

1.3.2 蕨菜粉的醇處理

把脫脂后的濾紙包放入索氏提取器,用無水乙醇作為提取劑,90℃恒溫水浴加熱,直到提取筒內液體為無色,脫醇溶性雜質。拿出過濾好的紙包,放在通風處讓乙醇揮發至醇味比較淡時放進干燥箱中,103℃烘至恒重。

1.3.3 蕨菜多糖含量的測定:苯酚硫-酸法[10-11]

(1)繪制葡萄糖標準曲線[12]

葡萄糖標準品在105℃下烘干至恒定重量后,準確稱取0.100 0g置于100mL燒杯中加20mL蒸餾水溶解,轉移至100mL容量瓶中,加蒸餾水定容至刻度,搖勻備用,濃度為1mg/mL,即為儲備液。將儲備液稀釋10倍作為標準溶液,濃度為0.1mg/mL。

準確移取葡萄糖標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL于試管中,補水至2mL,分別加入1mL 6%苯酚溶液,搖勻后迅速加入5mL濃硫酸,搖勻。將各試管于40℃水浴保溫30min后取出,冷水浴冷卻至室溫,在490nm處測其吸光度,以試劑空白作參比。得到回歸方程:A=9.557 1C-0.091 9,R2=0.993 3。

(2)樣品吸光度的測定

分別從樣液中取0.5mL溶液稀釋20倍后,取1.0mL稀釋液于試管中,按標準曲線測定方法測定吸光度。計算提取率。

1.3.4 單因素實驗

(1)料液比單因素實驗[13]

分別稱取蕨菜干粉置于錐形瓶中(n=2),設定水浴溫度為70℃,提取時間為2h,并且料液比為1∶10,1∶20,1∶30,1∶40和1∶50,水浴加熱回流提取。提取結束,過濾,濾液用蒸餾水定容至100mL。分別測定其中多糖含量。

(2)提取時間單因素實驗[13]

分別稱取蕨菜干粉置于錐形瓶中(n=2),設定料液比為1∶20,提取溫度70℃,分別設定提取時間為1h,2h,3h,4h,5h,水浴加熱浸提。提取結束,過濾,濾液用蒸餾水定容至100mL。分別測定其中多糖含量。

(3)浸提溫度單因素實驗[13]

分別稱蕨粉干粉置于錐形瓶中(n=2),設定固液比為1∶20,提取時間2h,分別設定提取溫度為50℃、60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃,2小時后,提取結束,過濾,濾液用蒸餾水定容至100mL。分別測定其中多糖含量。

1.3.5 正交試驗因素水平[14-15]

在單因素實驗的基礎上,選用L9(33)正交實驗,正交因素水平如下:

表1 正交試驗因素水平

2 結果與分析

2.1 蕨菜粉預處理去雜質分析

在對蕨菜粉進行預處理時,經過無水乙醚脫脂,無水乙醇去除醇溶性雜質,由公式:醇溶性物質含量(%)=(未脫去醇溶性物質濾紙包質量-已脫去醇溶性物質濾紙包質量)÷蕨菜粉質量×100%

表2 蕨菜粉醇溶性雜質

從表2知,蕨菜內含有醇溶性物質,經過無水乙醇的處理,蕨菜包的質量明顯減少,經過計算,得出醇溶性物質含量為2.76%。

2.2 單因素實驗結果

2.2.1 料液比對蕨菜多糖提取率的影響

由圖1可知,隨料液比的加大,多糖提取率漸漸提高,固液比從1∶10到1∶20增長快速直至料液比1∶20之后,多糖提取率提高不明顯。且考慮到溶劑量的加大為后續的濃縮等步驟增加負擔,因此,最合適的料液比為1∶20。

2.2.2 提取時間對多糖提取率的影響

由圖2可知,提取時間小于3h時,隨著提取時間的增加,提取率明顯提高,3h后整個曲線慢慢平穩,最后趨于穩定,接著增加提取時間,但曲線還是趨于平緩,由此得出提取時間最優為3h。

圖1 料液比對多糖提取率的影響

圖2 提取時間對多糖提取率的影響

2.2.3 提取溫度對多糖提取率的影響

由圖3可知,從50℃到80℃,隨著提取溫度的升高,多糖得率呈現出先增加后下降的上升趨勢,從80℃到90℃,提取溫度升高,多糖得率出現下降,因此,蕨菜多糖提取的最佳溫度為80℃。

圖3 提取溫度對多糖提取率的影響

2.3 正交試驗結果與分析

根據表3、4知,極差R剖析得出,蕨菜多糖的提取率影響因素主順序為A>B>C。即固液比對蕨菜多糖的提取率影響最小,浸提時間其次,而浸提溫度對蕨菜多糖的提取率影響最大,對提取效果影響顯著。最優提取工藝:A3B3C2,提取率:6.23%。

表3 L9(34)正交試驗結果分析表

表4 L9(34)正交方差分析

2.4 驗證實驗

用正交試驗得出的最佳條件A3B3C2,即提取溫度為90℃,提取時間為4h,固液比為1∶20,進行驗證實驗。樣品量1.000 0g,平行實驗3組。

表5 驗證實驗結果

3次重復實驗表明,該方法重現性好,結果穩定可靠。

3 小結

通過正交試驗法優化蕨菜多糖的提取工藝條件,對蕨菜多糖提取率的影響因素進行了排序為:A>B>C,即最佳提取工藝為A3B3C2,浸提溫度為90℃,浸提時間為4h,固液比為1∶20,提取率為6.23%。

[1]安徽植物志協作組.安徽植物志(第1卷)[M].合肥:安徽科學技術書出版,1985.

[2]李海燕,王立川,唐偉斌.栽培蕨菜與野生蕨菜和常見栽培蔬菜營養成分的對比分析[J].安徽農業科學,2008,36(14):2868-2869.

[3]張莉,陳乃富,吳美.蕨根莖及老嫩葉中黃酮含量的比較[J].食品與發酵工業,2006,32(11):43-46.

[4]陳乃富.蕨菜黃酮類化合物的提取及其抗氧化作用[J].食品與發酵工業,2003,29(11):63-66.

[5]陳乃富,黃新華,季洪武.蕨菜黃酮對小鼠體內丙二醛含量的影響[J].生物學雜志,2006,23(4):30-33.

[6]張莉,陳乃富,谷仿麗,等.蕨菜黃酮提取物的免疫調節作用[J].中國中醫藥科技,2009(1):30-31.

[7]張莉,陳乃富,王晨.敗醬黃酮類化合物的提取條件研究[J].中國林副特產,2007,03:14-16.

[8]趙國華,陳宗道,李至孝,等.活性多糖的研究進展[J].食品與發酵工業,2001,27(7):45-45.

[9]張曉靜,劉會東.植物多糖提取分離及藥理作用的研究進展[J].時珍國醫國藥,2003,14(8):495-496.

[10]馬紅櫻,張德祿,胡春香,等.植物活性多糖的研究進展[J].西北師范大學學報,2004,40(3):12-14.

[11]鄔衛東,張曉文.硫酸-苯酚法測定枸杞多糖含量[J].中草藥,2003,(3):38-39.

[12]陳靖,鄒艷麗,徐成東,等.方稈蕨中多糖含量的測定安徽農業科學[J].2012,40(6):3280-3281.

[13]段文昌,趙海泉,張莉,等.鹽膚木果實多糖提取工藝研究[J].皖西學院學報,2012,28(5):6-7.

猜你喜歡
實驗
我做了一項小實驗
記住“三個字”,寫好小實驗
我做了一項小實驗
我做了一項小實驗
記一次有趣的實驗
有趣的實驗
小主人報(2022年4期)2022-08-09 08:52:06
微型實驗里看“燃燒”
做個怪怪長實驗
NO與NO2相互轉化實驗的改進
實踐十號上的19項實驗
太空探索(2016年5期)2016-07-12 15:17:55
主站蜘蛛池模板: 波多野吉衣一区二区三区av| 91福利国产成人精品导航| 婷婷午夜天| 亚洲国产成人综合精品2020 | 99视频精品在线观看| 中文字幕无码中文字幕有码在线| 亚洲福利一区二区三区| 自拍偷拍欧美日韩| 福利视频一区| 久青草免费在线视频| 中文字幕天无码久久精品视频免费 | 日韩成人高清无码| 国产精品无码AⅤ在线观看播放| 国产人前露出系列视频| 亚洲伊人久久精品影院| 日韩区欧美区| 欧美色亚洲| 91国内在线视频| 国产欧美日韩资源在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 91精品最新国内在线播放| 国内精品小视频福利网址| 久草网视频在线| 免费无码在线观看| 亚洲av无码成人专区| 成人亚洲天堂| 精品午夜国产福利观看| 亚洲色图欧美激情| 日韩精品一区二区深田咏美 | 欧美精品黑人粗大| 国内精品久久久久久久久久影视 | 国产剧情无码视频在线观看| 欧美在线三级| 久久久久国产一级毛片高清板| 欧日韩在线不卡视频| 日本手机在线视频| yjizz国产在线视频网| 成人午夜网址| 爆操波多野结衣| 成人午夜网址| 成人免费网站在线观看| 久久一级电影| 国产男女免费完整版视频| 亚洲中文字幕国产av| 国产午夜福利在线小视频| 综合久久久久久久综合网| 日本人妻一区二区三区不卡影院 | 91久久夜色精品国产网站| 青草国产在线视频| 久久午夜夜伦鲁鲁片不卡| 亚洲激情99| 伊在人亞洲香蕉精品區| 永久在线精品免费视频观看| 日韩在线2020专区| 亚洲色欲色欲www网| 青青青国产视频手机| 国产国语一级毛片在线视频| 在线观看免费人成视频色快速| 亚洲无码高清一区二区| 亚洲三级片在线看| 欧美三级自拍| 国产麻豆精品在线观看| 亚洲成人精品在线| 国产a v无码专区亚洲av| 思思99热精品在线| 国产色网站| 免费aa毛片| 四虎国产在线观看| 中文字幕人妻av一区二区| 欧美日韩免费在线视频| 国产综合欧美| h网址在线观看| 凹凸国产熟女精品视频| 亚洲开心婷婷中文字幕| 国产在线视频福利资源站| 香蕉蕉亚亚洲aav综合| 十八禁美女裸体网站| 日韩精品成人在线| 中文字幕永久视频| 久久99国产视频| 国产手机在线ΑⅤ片无码观看| 亚洲天堂网在线视频|