2型糖尿病下肢大血管病變患者血清β淀粉樣肽40與晨尿微量白蛋白關(guān)系的探討

蘇 春，程 江，廖新華，張亞婷，肖 莉，肖體梅

(1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第七師醫(yī)院檢驗(yàn)科，新疆奎屯833200;2.新疆石河子大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，新疆石河子832008)

目前，糖尿病的發(fā)病率在全球呈明顯上升趨勢，糖尿病下肢血管病變的發(fā)生率也明顯增加，已成為糖尿病慢性并發(fā)癥之一[1]。大血管病變是糖尿病患者致殘、致死的主要原因。其中下肢血管病變會(huì)導(dǎo)致糖尿病足，甚至引起整個(gè)下肢潰瘍和壞疽，嚴(yán)重者可導(dǎo)致截肢，嚴(yán)重影響糖尿病患者的生活質(zhì)量。β淀粉樣肽 (amyloid-beta，Aβ)是一種含有39～42個(gè)氨基酸的多肽，是β淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)跨膜分泌的產(chǎn)物。正常生理狀態(tài)下，體內(nèi)APP多經(jīng)過α分泌酶和γ分泌酶作用，各產(chǎn)生Aβ片段的分泌型APP和C端片段。在病理狀態(tài)下，APP可通過β分泌酶和γ分泌酶作用，產(chǎn)生不同的氨基酸片段(Aβ40和Aβ42等)，其中約90%為 Aβ40。有研究顯示，糖尿病大血管病變患者血清Aβ40水平升高，可能參與了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用[2-4]。尿微量白蛋白(microalbumin，mAlb)已被廣泛用于評價(jià)早期腎功能損害的程度，而且越來越多的證據(jù)表明mAlb尿是動(dòng)脈粥樣硬化疾病的一項(xiàng)獨(dú)立危險(xiǎn)因子[5]。我們對2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者血清Aβ40及晨尿mAlb水平進(jìn)行檢測，旨在探討它們在糖尿病下肢血管并發(fā)癥中的作用。

材料和方法

一、研究對象

選取2013年1至10月石河子大學(xué)第一附屬醫(yī)院和新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第七師醫(yī)院內(nèi)分泌科住院及門診T2DM患者80例，按有無下肢大血管病變分為T2DM下肢大血管病變組(37例，男18例，女19例，年齡34～72歲;去除其它原因所致的下肢大血管病變)和T2DM無下肢大血管病變組(43例，男19例，女24例，年齡31～71歲)。所有患者均符合1999年世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)。下肢血管病變診斷根據(jù)彩色多普勒超聲檢查證實(shí)或下肢血管造影存在下肢動(dòng)脈硬化、斑塊形成或血管閉塞。選取同期健康志愿者40名作為正常對照組，男23例，女17例，年齡31～69歲。

二、方法

1.標(biāo)本留取 所有對象取早晨8～10時(shí)尿液5 mL(留尿期間避免劇烈活動(dòng)及高蛋白飲食)，1 500×g離心5 min，取上層尿液待測。用BD促凝分離膠真空采血管采集研究對象清晨空腹靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，1 500×g離心10 min，分離血清待測。

2.各項(xiàng)指標(biāo)的檢測 血清Aβ40測定采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assaye，ELISA)，試劑盒購自寧波美康生物科技有限公司，儀器為FAME全自動(dòng)酶標(biāo)儀(瑞士HAMILTONCS公司);晨尿mAlb測定采用免疫比濁法，試劑由英國朗道試劑公司提供，儀器為OLYMPUS AU7500全自動(dòng)生化分析儀;均嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。下肢大血管病變采用GE Systeam Five彩色多普勒超聲儀檢查。體重指數(shù)(body mass index，BMI)計(jì)算:BMI=體重(kg)/身高(m)2。晨尿mAlb陽性標(biāo)準(zhǔn)參照《診斷學(xué)》(第5版)的判斷標(biāo)準(zhǔn)(晨尿mAlb＞20 mg/L)。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料呈正態(tài)分布，采用±s表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、各組血清Aβ40及晨尿mAlb水平比較

T2DM下肢大血管病變組血清Aβ40及晨尿mAlb水平明顯高于T2DM無下肢大血管病變組和正常對照組(P＜0.01);T2DM無下肢大血管病變組血清Aβ40及晨尿mAlb水平亦高于正常對照組(P＜0.01)。3組之間年齡和BMI差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 3組之間血清Aβ40和晨尿mAlb水平的比較 (±s)

表1 3組之間血清Aβ40和晨尿mAlb水平的比較 (±s)

注:與正常對照組比較，*P＜0.01;與T2DM無下肢大血管病變組比較，#P＜0.01

組別 例數(shù) 年齡(歲) BMI(kg/m2) Aβ40(pmol/L) mAlb(mg/L)T2DM 下肢大血管病變組 37 53 ±7 25.6 ±2.6 23.21 ±8.15*# 89.43 ±7.25*#T2DM 無下肢大血管病變組 43 52 ±5 26.2 ±2.7 12.35 ±9.50* 34.17 ±10.21*正常對照組40 49 ±6 24.3 ±2.5 4.38 ±2.50 8.12 ±7.25

二、晨尿mAlb陽性組及晨尿mAlb陰性組血清Aβ40水平比較

晨尿mAlb陽性組血清Aβ40水平明顯高于晨尿mAlb陰性組(P＜0.01)。見表2。

表2 晨尿mAlb陽性組和陰性組血清Aβ40水平及下肢大血管病變發(fā)生率的比較

討 論

T2DM患者大多數(shù)存在胰島素抵抗，它可以使組織中糖原合酶激酶-3活性增強(qiáng)，從而引起Aβ40表達(dá)增強(qiáng)[6]。此外，胰島素也可加強(qiáng) Aβ40的表達(dá)，因此在胰島素抵抗和高胰島素血癥的狀態(tài)下，Aβ40表達(dá)明顯增多[7]。Aβ40 可以和內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生作用，產(chǎn)生較多的超氧化物，使內(nèi)皮細(xì)胞的功能發(fā)生改變。此外，超氧化物自由基還可以和一氧化氮反應(yīng)，生成過氧化亞硝酸鹽，它對過氧化膜、平滑肌細(xì)胞有一定的損傷，引起血管壁淀粉樣蛋白纖維堆積[2]。

本研究結(jié)果顯示，正常對照組、T2DM無下肢大血管病變組、T2DM下肢大血管病變組血清Aβ40水平依次升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。說明了Aβ40可能與血糖、血脂及體重等這些糖尿病大血管病變的危險(xiǎn)因素一樣在糖尿病下肢血管病變的發(fā)生、發(fā)展中起重要的作用。因此，早期檢測Aβ40水平可以為T2DM合并下肢血管病提供預(yù)測，為早期干預(yù)治療提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，晨尿mAlb陽性的T2DM患者下肢大血管病變的發(fā)生率明顯增加，表明晨尿mAlb水平與Aβ40水平有一定的關(guān)系，mAlb也可能是糖尿病患者大血管病變的危險(xiǎn)因素[8]。因此應(yīng)加強(qiáng)對晨尿mAlb及血清Aβ40的篩查，早期發(fā)現(xiàn)大血管病變并給予積極的治療，從而減少或延緩糖尿病下肢大血管病變的發(fā)生和發(fā)展，提高糖尿病患者的生活質(zhì)量。

[1]李唐瑛，李偉，張旭日，等.2型糖尿病下肢血管病變的發(fā)生率及相關(guān)危險(xiǎn)因素分析[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2008，8(2):254-256.

[2]許靜宜.糖尿病血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷與β淀粉樣肽的相關(guān)性研究[D].大連:大連醫(yī)科大學(xué)，2012.

[3]許娜.β淀粉樣肽40與糖尿病大血管病變的關(guān)系[D].大連:大連醫(yī)科大學(xué)，2008.

[4]廖新華，馮罡.血清β淀粉樣肽40與糖尿病下肢大血管病變[J].中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè))，2011，13(31):207.

[5]蘇冬月，張韓，李丹丹.2型糖尿病下肢血管病變患者C反應(yīng)蛋白與晨尿微量白蛋白的關(guān)系[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2010，29(3):213-215.

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[7]SU Y，Ryder J，LIU B，et al.Lithium，a common drug for bipolar disorder treatment，regulates amyloid-beta precursor protein processing[J].Biochemistry，2004，43(22):6899-6908.

[8]張曉旸.2型糖尿病脂聯(lián)素及尿微量白蛋白與大血管病變的關(guān)系[D].太原:山西醫(yī)科大學(xué)，2011.