2型糖尿病下肢大血管病變患者血清β淀粉樣肽40與晨尿微量白蛋白關(guān)系的探討

蘇 春，程 江，廖新華，張亞婷，肖 莉，肖體梅

(1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第七師醫(yī)院檢驗科，新疆奎屯833200;2.新疆石河子大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，新疆石河子832008)

目前，糖尿病的發(fā)病率在全球呈明顯上升趨勢，糖尿病下肢血管病變的發(fā)生率也明顯增加，已成為糖尿病慢性并發(fā)癥之一[1]。大血管病變是糖尿病患者致殘、致死的主要原因。其中下肢血管病變會導致糖尿病足，甚至引起整個下肢潰瘍和壞疽，嚴重者可導致截肢，嚴重影響糖尿病患者的生活質(zhì)量。β淀粉樣肽 (amyloid-beta，Aβ)是一種含有39～42個氨基酸的多肽，是β淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)跨膜分泌的產(chǎn)物。正常生理狀態(tài)下，體內(nèi)APP多經(jīng)過α分泌酶和γ分泌酶作用，各產(chǎn)生Aβ片段的分泌型APP和C端片段。在病理狀態(tài)下，APP可通過β分泌酶和γ分泌酶作用，產(chǎn)生不同的氨基酸片段(Aβ40和Aβ42等)，其中約90%為 Aβ40。有研究顯示，糖尿病大血管病變患者血清Aβ40水平升高，可能參與了內(nèi)皮細胞的損傷作用[2-4]。尿微量白蛋白(microalbumin，mAlb)已被廣泛用于評價早期腎功能損害的程度，而且越來越多的證據(jù)表明mAlb尿是動脈粥樣硬化疾病的一項獨立危險因子[5]。我們對2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者血清Aβ40及晨尿mAlb水平進行檢測，旨在探討它們在糖尿病下肢血管并發(fā)癥中的作用。

材料和方法

一、研究對象

選取2013年1至10月石河子大學第一附屬醫(yī)院和新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第七師醫(yī)院內(nèi)分泌科住院及門診T2DM患者80例，按有無下肢大血管病變分為T2DM下肢大血管病變組(37例，男18例，女19例，年齡34～72歲;去除其它原因所致的下肢大血管病變)和T2DM無下肢大血管病變組(43例，男19例，女24例，年齡31～71歲)。所有患者均符合1999年世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)T2DM診斷標準。下肢血管病變診斷根據(jù)彩色多普勒超聲檢查證實或下肢血管造影存在下肢動脈硬化、斑塊形成或血管閉塞。選取同期健康志愿者40名作為正常對照組，男23例，女17例，年齡31～69歲。

二、方法

1.標本留取 所有對象取早晨8～10時尿液5 mL(留尿期間避免劇烈活動及高蛋白飲食)，1 500×g離心5 min，取上層尿液待測。用BD促凝分離膠真空采血管采集研究對象清晨空腹靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，1 500×g離心10 min，分離血清待測。

2.各項指標的檢測 血清Aβ40測定采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assaye，ELISA)，試劑盒購自寧波美康生物科技有限公司，儀器為FAME全自動酶標儀(瑞士HAMILTONCS公司);晨尿mAlb測定采用免疫比濁法，試劑由英國朗道試劑公司提供，儀器為OLYMPUS AU7500全自動生化分析儀;均嚴格按照試劑盒說明書操作。下肢大血管病變采用GE Systeam Five彩色多普勒超聲儀檢查。體重指數(shù)(body mass index，BMI)計算:BMI=體重(kg)/身高(m)2。晨尿mAlb陽性標準參照《診斷學》(第5版)的判斷標準(晨尿mAlb＞20 mg/L)。

三、統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料呈正態(tài)分布，采用±s表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

一、各組血清Aβ40及晨尿mAlb水平比較

T2DM下肢大血管病變組血清Aβ40及晨尿mAlb水平明顯高于T2DM無下肢大血管病變組和正常對照組(P＜0.01);T2DM無下肢大血管病變組血清Aβ40及晨尿mAlb水平亦高于正常對照組(P＜0.01)。3組之間年齡和BMI差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 3組之間血清Aβ40和晨尿mAlb水平的比較 (±s)

表1 3組之間血清Aβ40和晨尿mAlb水平的比較 (±s)

注:與正常對照組比較，*P＜0.01;與T2DM無下肢大血管病變組比較，#P＜0.01

組別 例數(shù) 年齡(歲) BMI(kg/m2) Aβ40(pmol/L) mAlb(mg/L)T2DM 下肢大血管病變組 37 53 ±7 25.6 ±2.6 23.21 ±8.15*# 89.43 ±7.25*#T2DM 無下肢大血管病變組 43 52 ±5 26.2 ±2.7 12.35 ±9.50* 34.17 ±10.21*正常對照組40 49 ±6 24.3 ±2.5 4.38 ±2.50 8.12 ±7.25

二、晨尿mAlb陽性組及晨尿mAlb陰性組血清Aβ40水平比較

晨尿mAlb陽性組血清Aβ40水平明顯高于晨尿mAlb陰性組(P＜0.01)。見表2。

表2 晨尿mAlb陽性組和陰性組血清Aβ40水平及下肢大血管病變發(fā)生率的比較

討 論

T2DM患者大多數(shù)存在胰島素抵抗，它可以使組織中糖原合酶激酶-3活性增強，從而引起Aβ40表達增強[6]。此外，胰島素也可加強 Aβ40的表達，因此在胰島素抵抗和高胰島素血癥的狀態(tài)下，Aβ40表達明顯增多[7]。Aβ40 可以和內(nèi)皮細胞發(fā)生作用，產(chǎn)生較多的超氧化物，使內(nèi)皮細胞的功能發(fā)生改變。此外，超氧化物自由基還可以和一氧化氮反應(yīng)，生成過氧化亞硝酸鹽，它對過氧化膜、平滑肌細胞有一定的損傷，引起血管壁淀粉樣蛋白纖維堆積[2]。

本研究結(jié)果顯示，正常對照組、T2DM無下肢大血管病變組、T2DM下肢大血管病變組血清Aβ40水平依次升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。說明了Aβ40可能與血糖、血脂及體重等這些糖尿病大血管病變的危險因素一樣在糖尿病下肢血管病變的發(fā)生、發(fā)展中起重要的作用。因此，早期檢測Aβ40水平可以為T2DM合并下肢血管病提供預(yù)測，為早期干預(yù)治療提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，晨尿mAlb陽性的T2DM患者下肢大血管病變的發(fā)生率明顯增加，表明晨尿mAlb水平與Aβ40水平有一定的關(guān)系，mAlb也可能是糖尿病患者大血管病變的危險因素[8]。因此應(yīng)加強對晨尿mAlb及血清Aβ40的篩查，早期發(fā)現(xiàn)大血管病變并給予積極的治療，從而減少或延緩糖尿病下肢大血管病變的發(fā)生和發(fā)展，提高糖尿病患者的生活質(zhì)量。

[1]李唐瑛，李偉，張旭日，等.2型糖尿病下肢血管病變的發(fā)生率及相關(guān)危險因素分析[J].中國熱帶醫(yī)學，2008，8(2):254-256.

[2]許靜宜.糖尿病血管內(nèi)皮細胞損傷與β淀粉樣肽的相關(guān)性研究[D].大連:大連醫(yī)科大學，2012.

[3]許娜.β淀粉樣肽40與糖尿病大血管病變的關(guān)系[D].大連:大連醫(yī)科大學，2008.

[4]廖新華，馮罡.血清β淀粉樣肽40與糖尿病下肢大血管病變[J].中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學專業(yè))，2011，13(31):207.

[5]蘇冬月，張韓，李丹丹.2型糖尿病下肢血管病變患者C反應(yīng)蛋白與晨尿微量白蛋白的關(guān)系[J].河南大學學報:醫(yī)學版，2010，29(3):213-215.

[6]RING DB，JOHNSON KW，HENRIKSEN EJ，et al.Seletive glycogen synthase kinase 3 inhibitors potentiate insulin activtion of glucose transport and utilization in vitro and in vivo[J].Diabetes，2003，52(3):588-595.

[7]SU Y，Ryder J，LIU B，et al.Lithium，a common drug for bipolar disorder treatment，regulates amyloid-beta precursor protein processing[J].Biochemistry，2004，43(22):6899-6908.

[8]張曉旸.2型糖尿病脂聯(lián)素及尿微量白蛋白與大血管病變的關(guān)系[D].太原:山西醫(yī)科大學，2011.