尿路感染病原菌監測及耐藥性分析

候素君，李建新，尹盟盟，程美嬌

日照市中醫醫院檢驗科，山東日照2768000

尿路感染病原菌監測及耐藥性分析

候素君，李建新，尹盟盟，程美嬌

日照市中醫醫院檢驗科，山東日照2768000

目的探討尿路感染常見病原菌分布及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據。方法回顧分析2012年1月—2014年12月連續三年送檢的中段尿標本中分離的1017株病原菌的分布及耐藥性。應用美國BD-Phoenix 100全自動細菌分析儀及對應藥敏板進行菌種鑒定及藥敏試驗，應用WHONET5.6軟件進行耐藥性統計分析。結果1017株病原菌中，革蘭陽性球菌196株占19.27%，革蘭陰性桿菌722株占70.99%，真菌99株占9.74%；排在前五位的細菌是大腸埃希氏菌、腸球菌、肺炎克雷伯氏菌、白色假絲酵母菌、凝固酶陰性葡萄球菌；革蘭陽性球菌以糞腸球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、屎腸球菌為主，未發現萬古霉素耐藥株；革蘭陰性桿菌以大腸埃希氏菌為主，對亞胺培南、美洛培南敏感率100%。結論尿路感染病原菌以腸桿菌和腸球菌為主，耐藥性普遍提高，掌握醫院內尿培養病原菌的分布及耐藥性，可以指導臨床合理選擇抗菌藥物。

尿路感染；病原菌；耐藥性；抗菌藥物

尿路感染是社區和院內常見的感染性疾病，在醫院感染中僅次于呼吸道感染，居第2位[1-2]。隨著抗菌藥物、免疫抑制劑的廣泛使用，以及各種侵入性操作的增多，細菌的耐藥性日趨嚴重[3]。為了解該院尿路感染的病原菌分布、變遷及其耐藥性，指導臨床抗菌藥物的合理應用，對2012年1月—2014年12月醫院尿路感染病原菌的監測數據及病原菌耐藥性進行分析，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

2012年1月—2014年12月醫院門診和住院患者送檢的3491份清潔中段尿中分離的1017株病原菌，并剔除同一患者同一部位重復分離菌株。

1.2 方法

留取清潔中段尿，每份標本分別用無菌定量接種環接種10 uL于血平板、麥康凱平板，35℃培養18～48 h,獲得純培養后，細菌經革蘭染色，挑取無污染且革蘭陰性菌菌落計數≧105CFU/mL，革蘭陽性菌菌落計數≧104 CFU/mL的細菌進行菌種鑒定和藥敏試驗，應用美國BD-Phoenix 100全自動細菌分析儀及對應藥敏板進行分析，嚴格按儀器要求操作，藥敏結果判斷符合美國臨床實驗室標準化研究所（CLSI）2010版的標準。

1.3 質控菌株

大腸埃希氏菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黃色葡萄球菌ATCC25923（購自山東省臨床檢驗中心）和白色假絲酵母菌ATCC90028（青島大學醫學院附屬醫院贊助）。

1.4 統計分析

利用BD-Phoenix 100全自動細菌分析儀中的數據儲存系統的統計軟件進行統計；采用細菌耐藥性監測網提供的WHONET5.6軟件進行耐藥性統計分析，計數資料用百分數表示。

2 結果

2.1 病原菌分布及構成比

2012—2014年自尿路感染患者中段尿標本中分離出病原菌1017株，革蘭陽性球菌196株（19.27%）；革蘭陰性桿菌722株（70.99%）；真菌99株（9.74%）；各病原菌株數逐年增高；排在前五位的病原一菌是大腸埃希氏菌、腸球菌、肺炎克雷伯氏菌、白色假絲酵母菌、凝固酶陰性葡萄球菌；分別占47.10%、11.01%、9.73%、5.02%、5.01%，見表1。

表1 2012—2014年尿培養病原菌分布及構成比[n（%）]

2.2 病原菌各科室分布及構成比

2012—2014年尿培養病原菌主要分布在風濕腎病科，占43.66%、腦病三科占11.70%、泌尿外科占10.82%、腦病二科占7.67%、內分泌科占5.01%、心二科占4.42%、腦病一科占3.44%、呼吸科占2.65%、感染科占1.08%、其他科占9.53%，見表2。

2.3 主要革蘭陽性球菌對20種抗菌藥物的耐藥率

2012—2014年尿路感染患者分離的革蘭陽性球菌中屎腸球菌和糞腸球菌對四環素、紅霉素耐藥率>90%,凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌對青霉素、氨芐西林耐藥率100%，耐甲氧西林的凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）檢出率77.6%；耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率17.6%；見表3。

2.4 主要革蘭陰性桿菌對21種抗菌藥物的耐藥率

2012—2014年尿路感染患者分離的革蘭陰性桿菌以大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌和奇異變形桿菌居多，超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）產生率分別是52.8%（253/479）、42.4%（42/99）、27.9%（19/68），見表4。

表2 2012—2014年尿病感染患者尿培養病原菌各科室分布[n（%）]

3 討論

泌尿系統感染是臨床上常見的感染性疾病，三年來，該院3491份清潔中段尿中分離出病原菌1017株，主要分布在風濕腎病科占43.66%、腦病三科占11.70%、泌尿外科占10.82%、腦病二科占7.67%、內分泌科占5.01%、心二科占4.42%、腦病一科占3.44%、呼吸科占2.65%、感染科占1.08%，與上述科室住院老年患者較多免疫力低下，抗菌藥物、免疫抑制劑的廣泛使用，患有嚴重基礎疾病，住院時間長，侵入性操作增多有關。病原菌以革蘭陰性桿菌（70.99%）為主，以大腸埃希氏菌（47.10%）居多，與文獻[4]報道接近；革蘭陽性球菌(19.27%)中，糞腸球菌（6.98%）、凝固酶陰性葡萄球菌（5.01%）、屎腸球菌（4.03%）為主；真菌以白色假絲酵母菌（5.02%）和光滑假絲酵母菌（2.46%）為主，對氟康唑、兩性霉素B均敏感，三代頭孢菌素、碳青霉烯類藥物等廣譜抗菌藥物長期、反復使用以及免疫抑制劑的廣泛使用是引起真菌感染的重要因素[5]。

引起尿路感染的主要革蘭陽性球菌是腸球菌屬[6]和葡萄球菌屬，腸球菌屬中糞腸球菌最為常見，可能與大量運用廣譜抗生素或者免疫力低下導致正常菌群紊亂，引起內源性感染有關；屎腸球菌的耐藥率高于糞腸球菌，二者對紅霉素、四環素耐藥率>90%,對萬古霉素、替考拉寧、嗎啉惡酮耐藥率<12%；對頭孢菌素類、氨基糖苷類（除外高水平耐藥篩選）、克林霉素、復方磺胺耐藥率100%，臨床治療無效。屎腸球菌對氨芐西林、高濃度慶大霉素耐藥率高，此種菌株采用慶大霉素聯合氨芐西林無協同作用，建議對此類菌株引起的嚴重感染采用萬古霉素治療；該院雖未發現耐萬古霉素腸球菌，但國內外均有報道，并且有上升的趨勢，因此實驗室應加強監測，及時發現，及時予以控制，合理使用抗生素。葡萄球菌屬凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對青霉素、氨芐西林耐藥率100%；MRCNS（耐甲氧西林的凝固酶陰性葡萄球菌）檢出率77.6%，MRSA（耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌）檢出率17.6%；凝固酶陰性葡萄球菌引起的醫院感染也應引起重視，其中主要是表皮葡萄球菌，它定居在人體皮膚表面，易造成污染，應當綜合臨床和實驗室的資料判定是否為污染，避免不必要地使用抗菌藥物，尤其是萬古霉素；對呋喃妥因、奎奴普丁/達夫普汀、嗎啉惡酮、萬古霉素、替考拉寧敏感性高,雖未發現萬古霉素耐藥株，但耐萬古霉素的腸球菌可以通過質粒將耐藥基因傳遞給葡萄球菌屬，而且國外已經有多例關于耐萬古霉素葡萄球菌的報道；萬古霉素腎臟毒性較大，價格貴，并且是臨床治療革蘭陽性球菌的最后一道防線，不宜作常規用藥；而呋喃妥因在尿液中濃度高及對革蘭陽性球菌的高敏感度，可作為臨床治療革蘭陽性球菌引起尿路感染的首選藥物。

表3 2012—2014年尿培養主要革蘭陽性球菌對19種抗菌藥物的耐藥率（%）

表4 2012—2014年主要革蘭陰性菌對22種抗菌藥物的耐藥率（%）

尿路感染的主要革蘭陰性桿菌大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌易產生超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs），ESBLs不僅能水解青霉素和頭孢菌素，還能水解單酰胺類抗菌藥物，建議臨床選擇含β-內酰胺酶抑制劑的復方抗菌藥物和碳青霉烯類藥物；ESBLs產生率分別是52.8%、42.4%，與該院近年來三代頭孢菌素等β-內酰胺類藥物的廣泛使用有很大關系。大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌對亞胺培南、美洛培南敏感率100%，對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率<10%，但目前已出現耐亞胺培南的大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯菌，應引起重視，而且上述藥物抗菌譜廣，極易導導致菌群失調而造成真菌二重感染，臨床上應謹慎使用；對頭孢唑林、氨芐西林、四環素耐藥率>70%；大腸埃希氏菌對左氧氟沙星、環丙沙星（喹諾酮類）耐藥率>55%,比文獻報道略高，不能選作常規經驗用藥，這可能與幾年前喹諾酮類藥物常用于尿路感染所致，再加上最近幾年很多養殖業把喹諾酮類藥物常用于動物等因素有關；對呋喃妥因、阿米卡星耐藥率<11%,阿米卡星對腎臟和聽神經損害較大，不宜作為尿路感染常規用藥；可首選呋喃妥因作經驗治療；產ESBLs菌株應首選碳青霉烯類藥物。

奇異變形桿菌是尿路感染常見的致病菌之一，對亞胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、氨曲南、頭孢吡肟、阿米卡星耐藥率<20.0%，對其他抗菌藥物耐藥性相對高；銅綠假單胞菌常在治療過程中，通過突變發生耐藥，主要是微孔蛋白的突變,，阻止了抗生素由外膜進入胞質，對頭孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率是30.7%，對其他抗菌藥物耐藥率均較高，所以臨床醫生應重視細菌培養，根據藥敏結果選擇用藥，避免盲目根據經驗治療濫用抗生素。

尿路感染病原菌檢出株數逐年增加，各臨床醫師應掌握本地區尿路感染病原菌分布及耐藥性變遷，提高標本送檢量；微生物室定期總結分析，指導臨床合理使用抗菌藥物，減緩細菌耐藥的發生，對控制醫院感染至關重要。

[1]鄭建瓊，楊年安，黃德斌.老年患者泌尿道感染病原菌分布及耐藥分析[J].中華醫院感染學雜志，2014（24）：6031-6032，6035.

[2]王世瑜，劉曉華，陳錦艷，等.尿培養病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2013，23（22）：5594-5596.

[3]龔德釩.尿路感染的病原菌分布及耐藥性分析[J].中醫臨床研究，2014,6（24）：78-79.

[4]鄧法文.泌尿系統感染病原菌分布及耐藥性調查分析[J].中華醫院感染學雜志，2012，2（17）：3890-3892.

[5]伊慧霞，蘇娜，劉玉梅,等.臨床念珠菌感染分布及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志，2014，35（21）：2997-2998.

[6]崔韶蕊.腸球菌的感染分布及耐藥性分析[J].中國實用醫藥2014，9（26）：166-167.

Monitor and Drug Resistance of Pathogens From Urinary Tract Infection

HOU Su-jun，LI Jian-Xin，YIN Meng-meng,CHENG Mei-jiao
Rizhao city hospital of traditional Chinese medicine，Rizhao，Shandong Province，276800 China

ObjectiveTo investigate the distribution and drug resistance of the commonpathogens for urinary tract infections so as to provide basic evidence for reasonable clinical use of antibiotics.MethodsRetrospectively analyzed the distribution and drug resistance of 1017 pathogens isolated from midstream urine specimens from January 2012 to December 2014.US BD-Phoenix100 automatic bacteria analyzer and the corresponding drug sensitive plates were applied for strain identification and susceptibility testing.Then All datas were analyzed by WHONET5.6 software.ResultsA total of 1017 pathogens isolated from midstream urine included 196(19.27%)strains of gram-positive cocci,722(70.99%),strains of gram-negative bacilli,and 99(9.74%)strains of fungi;And ranked in the top 5 of pathogens isolated were Escherichia coli,Enterococci,Klebsiella pneumonlae,Candida albicans, and coagulase–negative Staphylococcus respectively.Enterococcus faecalis,coagulase–negative Staphylococcu and e.faecium were mainly in the gram-positive cocci and no strains resistant to vancomycin.we found.Escherichia coli were predominant pathogens in the gram-negative bacilli and the sensitivity to Imipenem and meropenem was 100%.ConlusionE.coli and Enterococci are the predominant pathogens of causing urinary tract infection along with a general increase in drug resistance.Therefore, it is of great significance to grasp the distribution and drug resistant of pathogens isolated from urine culture and it will contribute to guide the reasonable clinical use of antibiotics.

Urinary tract；Pathogenic bacteria；Drug resistance；Antibacterials

R378

A

1672-5654（2015）04（b）-0003-04

2015-01-13）

候素君（1974.1-），女，山東平度人，本科，主管檢驗技師，研究方向：臨床微生物檢驗。