腦血疏口服液對急性腦梗死大鼠的神經保護作用

艾 鑫 ，劉 翠

腦血疏口服液對急性腦梗死大鼠的神經保護作用

艾 鑫 ，劉 翠

目的 研究腦血疏口服液對急性腦梗死大鼠神經保護作用及其機制。方法 90只SD大鼠隨機分為腦梗死對照組、腦梗死干預組、假手術組。灌服10 d后根據改良Longa等方法制作大鼠左側大腦中動脈阻塞模型。依照Longa FZ法對大鼠進行神經功能評分，后于相應時間點斷頭取腦，HE染色觀察大鼠腦組織病理變化，檢測大鼠腦組織超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。結果 動物模型建立后2 h，腦梗死對照組大鼠神經行為學評分與假手術組比較明顯增高，腦梗死干預組較腦梗死對照組明顯降低(P<0．05)。腦梗死對照組可見明顯缺血性形態學改變，腦梗死干預組較同期腦梗死對照組大鼠腦組織病理變化有較明顯改善。大鼠腦組織中SOD含量隨時間推移而逐漸降低，而MDA含量隨時間推移而逐漸增加。且各時間點腦梗死對照組與假手術組、腦梗死干預組比較差異均有統計學意義(P<0．05)。假手術組與腦梗死干預組比較差異無統計學意義(P>0．05)。結論 腦血疏口服液能夠改善大鼠急性腦梗死后神經功能缺損和腦組織結構，提高SOD活性，降低MDA含量，發揮拮抗自由基損傷作用，具有神經保護作用。

腦梗死；腦血疏口服液； 超氧化物歧化酶；丙二醛；神經保護作用；大鼠

腦梗死是嚴重威脅人類健康和生命的常見病、多發病。腦血疏口服液(國藥準字220070059，國家中藥保護品種)是根據“氣為血之帥，血為氣之母”的中醫氣血理論及長期臨床經驗研制的中藥(2 類)新藥，具有益氣、活血、化瘀之功效[1]。本實驗觀察腦血疏口服液對大鼠腦梗死后腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及動物蘇醒后神經行為學評分、腦組織病理變化的影響，探討腦血疏口服液對腦梗死后腦損傷的保護作用，為腦血疏口服液防治中樞神經系統缺血性損傷提供理論依據。

1 材料與方法

1．1 動物分組與給藥方法 清潔級Sprague-Dawley(SD)大鼠90只，雄性，體重200 g～250 g，由西安交通大學動物中心提供，動物合格證號：SCXK(陜)2007-001。隨機分為腦梗死對照組、腦梗死干預組、假手術組，每組30只大鼠。各組按動物模型建立后不同時間點分為3個亞組：6 h、12 h和24 h，每亞組10只大鼠。動物模型建立前10 d開始，每8 h灌服腦血疏口服液1 mL/kg，腦梗死對照組及假手術組只灌服等體積生理鹽水。

1．2 動物模型的建立 根據改良Longa等[2]方法制作大鼠左側大腦中動脈阻塞(MCAO)模型。頸部正中切開，暴露左側頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)、頸內動脈(ICA)。 腦梗死對照組和腦梗死干預組采用線栓阻塞大腦中動脈24 h，模擬急性腦梗死。假手術組大鼠切開頸正中皮膚，分理出頸內動脈、頸外動脈，但不進行動脈夾閉及結扎。

1．3 大鼠神經行為學評分 依照Longa FZ五級評分法，動物模型建立后2 h對大鼠進行神經功能評分。

2 結 果

2．1 大鼠神經行為學評分 動物模型建立后2 h，腦梗死對照組大鼠神經行為學評分與假手術組比較明顯增高，腦梗死干預組較腦梗死對照組明顯降低(P<0．05)。詳見表1。

組別n神經行為學評分假手術組100腦梗死對照組102.35±0.84腦梗死干預組101.74±0.971) 與腦梗死對照組比較,1)P<0.05。

2．2 大鼠腦組織病理變化 采用HE染色，光鏡下觀察，假手術組大鼠腦神經元細胞層次較多，結構排列致密，神經細胞形態完整，結構清晰，數目多，細胞無腫脹，核深染，核仁明顯。腦梗死對照組大鼠腦組織皮層組織結構疏松呈篩網狀，神經細胞數目減少，排列無規則，細胞腫脹明顯，神經元脫失嚴重。且隨時間推移，損傷程度較前加重。腦梗死干預組各時間點與腦梗死對照組比較，皮層組織結構相對致密，神經元脫失減少，神經細胞腫脹現象減輕，損傷均有不同程度的減輕。

2．3 大鼠腦組織SOD、MDA含量 動物模型建立后6 h，腦梗死對照組大鼠腦組織中SOD含量明顯低于假手術組及腦梗死干預組。隨時間推移，腦梗死對照組及腦梗死干預組大鼠腦組織中SOD含量進一步降低，且各時間點腦梗死對照組與假手術組、腦梗死干預組比較差異均有統計學意義(P<0．05)。假手術組與腦梗死干預組比較差異無統計學意義(P>0．05)。

各組大鼠腦組織中MDA含量變化趨勢基本相同：隨時間推移而逐漸增加。其中以腦梗死對照組增加最為明顯。各時間點腦梗死對照組大鼠腦組織中MDA含量均高于假手術組及腦梗死干預組(P<0．05)，假手術組與腦梗死干預組比較差異無統計學意義(P>0．05)。詳見表2。

組別 SOD(U/mg) 6h12h24h MDA(nmol/mg) 6h12h24h假手術組 311.61±23.171)320.84±19.241)299.55±26.821)11.98±4.031)12.59±1.571)12.03±3.981)腦梗死對照組223.79±21.56 201.34±18.52 178.13±14.37 15.25±2.92 18.13±3.86 21.45±3.50 腦梗死干預組289.52±31.731)279.12±25.791)265.49±20.451)12.86±3.201)13.89±2.271)14.85±3.411) 與腦梗死對照組比較,1)P<0.05。

3 討 論

腦梗死患者多有動脈粥樣硬化性基礎病變，加之循環血液中纖維蛋白原、脂蛋白等含量增多，引起血液黏稠度增加，易導致血管內血栓形成。腦梗死是一個復雜的缺血性級聯反應過程，嚴重缺血造成腦組織能量很快耗竭，細胞內鈣超載，受鈣離子調節的多種酶類被激活，引起磷脂分解和細胞骨架破壞，生成大量的自由基，導致細胞產生不可逆損傷，還包括轉錄因子的合成及炎性反應介質的產生等參與，腦梗死具體發病機制尚未完全闡明[3-5]。

目前國內外研究已證實，急性腦梗死與自由基的大量產生、自由基清除酶功能降低，以及脂質過氧化反應密切相關[6，7]。MDA是脂質過氧化反應的最終產物，SOD是體內重要的抗氧化酶，保護細胞免受損傷。乳酸含量和乳酸脫氫酶活力反映了細胞酸中毒水平，可間接反映細胞損傷程度。腦缺血時由于組織氧和能量代謝的物質供應不足，ATP生成減少，離子泵失效，Na+-K+-ATP酶活性的降低，使大量Na+內流、K+外流，Cl-和H2O被動進入細胞內，引起神經細胞急性滲透性腫脹死亡。

腦血疏口服液的成分主要包括黃芪、水蛭、石菖蒲、牛膝、牡丹皮、大黃、川芎等，近年針對腦血疏口服液方劑中主要成分黃芪、水蛭、川芎等有較多的研究。黃芪含有黃芪皂苷、黃酮、多種氨基酸和微量元素，具有益氣活血，抗脂質過氧化和消除氧自由基，擴張冠狀動脈血管，增加血流量，防止血栓形成，增強纖維蛋白溶解活性[8]，組方重用黃芪旨在補氣升陽，達到氣行則血行之功效。上述研究從藥理學角度為腦血疏口服液治療腦出血提供了理論依據。

水蛭主要含蛋白質、多種氨基酸、微量元素和水蛭素。其中水蛭素是目前最有效的凝血酶特異抑制劑，其含有的多種生物活性成分，具有抗凝、抗血栓、抗炎、抗腫瘤、抗纖維化、腦保護等多種藥理藥效作用[9]。抗凝是水蛭活性組分的主要作用，有研究通過體內外抗凝血指標測定，證實水蛭中的抗凝血活性組分及作用[10，11]。認為其提取物所含的游離氨基酸可能是其抗凝血作用的有效成分[12]。活性組分作用于凝血過程，抑制凝血酶及纖維蛋白溶酶，阻斷凝血反應的進行，達到抗凝作用。川芎可以透過血腦屏障，解除腎上腺素引起的血管平滑肌痙攣，擴張血管，改善微循環，增加血流速度，降低血液黏度，改善血液微循環和供血不足[13]。

本研究結果表明，腦血疏口服液能明顯降低MDA含量，提高SOD活性，發揮拮抗自由基損傷作用，這可能是腦血疏口服液抗腦缺血損傷的作用機制之一。

使用腦血疏口服液可以通過抗凝、溶栓和腦保護多個方面治療腦梗死，具有良好效果，是治療腦梗死較理想的藥物。

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(本文編輯 王雅潔)

延安大學附屬醫院(陜西延安 716000)，E-mail：puxjtuns@126．com

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．11．011

1672-1349(2015)11-1278-03

2015-06-14)