昆明市延安醫院2001—2012年產超廣譜β內酰胺酶大腸埃希菌耐藥性變遷

黃云昆， 朱雯梅， 姚 瑤， 王 佳， 翁媛媛

·論著·

昆明市延安醫院2001—2012年產超廣譜β內酰胺酶大腸埃希菌耐藥性變遷

黃云昆， 朱雯梅， 姚 瑤， 王 佳， 翁媛媛

目的分析昆明市延安醫院大腸埃希菌超廣譜β內酰胺酶（ESBL）的檢出率變遷情況及對常用抗菌藥物的耐藥性，為臨床合理治療和控制該菌感染提供科學依據。方法用WHONET5.6藥敏統計軟件統計分析2001—2012年逐年大腸埃希菌ESBL的檢出率，分析其變遷情況，并就產ESBL大腸埃希菌對常用抗菌藥物的耐藥性進行分析。結果2001—2012年共分離到非重復大腸埃希菌3 177株，其中產ESBL大腸埃希菌1 906株，總陽性率為60.0%（1 906/3 177）。期間2001年ESBL陽性檢出率最低，為36.9%（59/160），以后逐年上升，以2003—2004年上升最為明顯，從48.4%（75/155）上升至63.2% （74/117），2008年產ESBL大腸埃希菌檢出率最高，為72.9%（175/240），從2004—2012年ESBL檢出率呈現出波動狀態，波動在54.2%～72.9%，2008—2012年表現出逐年下降趨勢。在常用抗菌藥物中，產ESBL大腸埃希菌對美羅培南和亞胺培南的敏感率最高，分別為95.5%和95.1%；對阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、呋喃妥因、頭孢西丁、頭孢吡肟和頭孢他啶也有較高的敏感率，分別為91.9%、85.7%、74.1%、85.7%、72.6%、76.3%和61.4%；對環丙沙星、左氧氟沙星的敏感率較低，分別為27.8%和30.3%。結論大腸埃希菌中ESBL檢出率在經歷了一個快速上升期后，目前似已進入一個相對平穩波動期，美羅培南和亞胺培南等碳青霉烯類仍是對產ESBL大腸埃希菌抗菌活性最強的抗菌藥物。該菌對哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因、頭孢西丁、頭孢吡肟及頭孢他啶等也有較高的敏感性，對氟喹諾酮類敏感性偏低，產ESBL大腸埃希菌感染時宜根據藥敏試驗結果選用抗菌藥物治療。

大腸埃希菌； 超廣譜β內酰胺酶； 耐藥性

大腸埃希菌是醫院感染最常見的病原菌之一。據全國耐藥監測網的監測數據顯示，大腸埃希菌為引起醫院感染首位的病原菌［1］，可引起呼吸道、傷口、血流、泌尿道等多種器官和組織的感染，同時也是最常見的醫院感染多重耐藥菌之一。該菌主要的耐藥機制為產質粒介導的超廣譜β內酰胺酶（ESBL），可對所有的青霉素類、頭孢菌素類及單環類等β內酰胺類抗生素耐藥，對臨床有效治療大腸埃希菌引起的感染造成了很大困難。其位于質粒的耐藥基因易于通過基因轉移和基因重組，在同種或不同種菌株間傳播，可引起耐藥性的迅速傳播和醫院感染的暴發流行。分析大腸埃希菌中ESBL檢出率的變遷情況及對該菌有效的治療藥物，對臨床合理治療、有效控制產ESBL大腸埃希菌引起的感染均有重要作用。本課題分析了我院2001—2012年大腸埃希菌ESBL檢出率的變遷及耐藥性情況，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 所有菌株來源于我院2001—2012年住院和門診患者標本，包括痰、肺泡灌洗液等呼吸道分泌物、血液、尿液、傷口分泌物、膿液等，按常規方法培養分離菌株。

1.1.2 儀器和試劑 自動微生物鑒定藥敏系統VITEK-32及革蘭陰性菌鑒定卡GNI+，VITEK2-Compact及革蘭陰性菌鑒定卡GN、藥敏卡ASTGN14由生物梅里埃公司提供，K-B法MH培養基購自杭州天和生物制品有限公司，美羅培南、亞胺培南、頭孢哌酮-舒巴坦藥敏紙片為OXOID產品，其他藥敏紙片由北京天壇藥物生物技術開發公司提供，藥敏質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853，由云南省臨床檢驗中心提供。

1.2 方法

1.2.1 菌種鑒定和藥敏試驗 按儀器操作程序用VITEK-32或VITEK2-Compact進行菌種鑒定，藥敏試驗2012年以前為K-B法，2012年為VITEK2-Compact自動儀器法，ESBL檢測按NCCLS/CLSI標準采用雙紙片協同法、表型確證法及儀器法。

1.2.2 數據分析 根據CLSI 2011折點標準，用WHONET5.6藥敏統計軟件進行統計分析，剔出重復菌株，只統計每例患者首次分離株。

2 結果

2.1 大腸埃希菌中ESBL的檢出情況

2001—2012年12年間從各類臨床標本中共分離到非重復大腸埃希菌3 177株，其中住院患者2 904株，門診患者273株，ESBL總陽性率60.0% （1 906/3 177），其中住院患者ESBL陽性率61.2% （1 777/2 904），門診患者為47.3%（129/273）。

2.2 大腸埃希菌中ESBL檢出率的變遷

2001—2012年大腸埃希菌中ESBL檢出率的變遷見表1。

表1 大腸埃希菌ESBL檢出率的變遷Table1 Changing prevalence of ESBLs-producing Escherichia coli during the period from 2001 to 2012

2.3 產ESBL大腸埃希菌對常用抗菌藥物的耐藥性

2001—2012年分離的產ESBL大腸埃希菌對常用抗菌藥物的耐藥性見表2。

表2 產ESBL大腸埃希菌對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table2 Susceptibility of ESBLs-producing Escherichia coli to commonly used antimicrobial agents

3 討論

分析2001—2012年大腸埃希菌ESBL檢出率變遷情況可以看出，ESBL檢出率的變遷大致可分為3個時期，第1個時期為2001—2004年，ESBL的檢出率呈現出明顯上升，和國內其他學者的研究結果一致［2-3］，其檢出率及上升速度均明顯高于國外同期研究結果［4-5］。第2階段為2004—2011年間，ESBL的檢出率呈現波動狀態，與這一時期對ESBL的實驗室檢測及其耐藥機制逐漸有了更多的研究，對產ESBL菌株引起的感染診治引起了足夠的重視，對控制產ESBL菌株的進一步傳播起到了積極作用有關。第3階段為2008—2012年，ESBL的檢出率出現逐年下降的趨勢，原因可能是在這期間，衛生部先后頒布多個加強抗菌藥物管理的制度，對產ESBL菌株起到了有效控制作用。尤其是衛生部2010年開始的合理應用抗菌藥物專項整治工作，提高了臨床對微生物檢驗標本的送檢率，使大腸埃希菌ESBL的檢出率呈現下降趨勢。

雖然近年來國內很多地區不同程度地出現了產碳青霉烯酶（KPC酶）、高產β內酰胺酶和抗生素滲透障礙等耐藥機制的大腸埃希菌和其他腸桿菌科細菌［6］，使大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等腸桿菌科細菌對碳青霉烯類出現了耐藥性，但從我們的統計結果看，亞胺培南和美羅培南仍表現出對產ESBL大腸埃希菌高度的抗菌活性；大腸埃希菌對哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦等酶抑制劑復合制劑、阿米卡星、頭孢西丁等仍保持著較高敏感性。該菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥性很高。本資料顯示，在采用CLSI 2010新折點后，產ESBL大腸埃希菌對頭孢他啶、頭孢吡肟具有較高的敏感率，對頭孢曲松的耐藥率則很高。

總之，目前大腸埃希菌中ESBL的檢出率仍較高，各級醫院應繼續嚴格執行衛生部對合理應用抗菌藥物和多重耐藥菌的各種管理制度，重視包括對產ESBL在內的多重耐藥菌的管理，合理應用抗菌藥物，嚴格進行消毒隔離工作，有效控制產ESBL大腸埃希菌耐藥性的發生發展。美羅培南、亞胺培南仍是對產ESBL大腸埃希菌最強的抗菌藥物；哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因、頭孢西丁、頭孢吡肟及頭孢他啶等也有較高的抗菌活性，可根據具體感染情況選用，氟喹諾酮類藥物不宜用于產ESBL大腸埃希菌感染的經驗治療。

［1］ 薛峰，呂媛.衛生部全國細菌耐藥監測網2011年度非ICU住院感染患者細菌耐藥監測［J］.中國臨床藥理學雜志，2012，28（12）；910-915.

［2］ 葉曉光，王若倫，林紅燕，等.產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌耐藥譜動態觀察［J］.中華醫院感染學雜志，2004，14（5）；492-495.

［3］ 陳孝進，彭蘭.3種常見腸桿菌科細菌耐藥性變遷調查［J］.中華醫院感染學雜志，2006，16（1）；112-113.

［4］ Luzzaro F，Mezzatesta M，Muenaiolic C，et al.Trends in production of extended-spectrumβ-lactamases amongEnterobacteriaof medical interest；report of the second Italian Nationwide Survey［J］.J Clin Microbiol，2006，44 （5）；1659-1664.

［5］ Carattdi A，Garcia-Fernandez A，Varesi P，et al.Molecular epidemiology ofEscherichia coliproducing extended-spectrum beta-lactamases isolated in Rome，Italy［J］.J Clin Microbiol，2008，46（1）；103-108.

［6］ 張嶸，蔡加昌，周宏偉，等.腸桿菌科細菌中質粒介導的KPC-2型碳青霉烯酶的檢測［J］.中華檢驗醫學雜志，2008，31（10）；1134-1141.

Changing prevalence and antibiotic resistance profile of extended-spectrum β-lactamases-producing Escherichia coli strains during 2001-2012 in Kunming Yan'an Hospital

HUANG Yunkun，ZHU Wenmei，YAO Yao，WANG Jia，WENG Yuanyuan.（Department of Laboratory Medicine，Kunming Yan'an Hospital，Kunming 650051，China）

；ObjectiveTo investigate the changing pattern of antibiotic resistancein the extended-spectrumβ-lactamases（ESBLs）producingEscherichia colistrains for better supporting clinical treatment and infection control.MethodsWHONET 5.6 software was used to analyze the changing pattern of antibiotic resistance in ESBLs-producingE.coliduring the period from 2001 to 2012.ResultsDuring the period from 2001 to 2012，a total of 3 177 non-duplicateE.colistrains were isolated in our hospital，of which 1 906 were ESBLs-producingE.coli.The overall prevalence of ESBLs was 60.0%（1 906/3 177）.In 2001，the prevalence of ESBLs was the lowest（36.9%），and since then increased gradually.An obvious increase was documented from 2003（48.4%）to 2004（63.2%）.In 2008，the prevalence of ESBLs reached peak of 72.9%.During 2004 and 2012，the prevalence of ESBLs ranged from 54.2%to 72.9%.And from 2008 to 2012，the rate declined yearly.Among the common antibiotics，meropenem（95.5%）and imipenem（95.1%）showed the highest susceptibility rate.About 91.9%，85.7%，74.1%，85.7%，72.6%，76.3%，61.4%of these strains were still sensitive to amikacin，piperacillin-tazobactam，cefoperazone-sulbactam，nitrofurantoin，cefoxitin，cefepime，and ceftazidime，respectively.About 27.8%and 30.3%of these strains were susceptible to ciprofloxacin and levofloxacin，respectively.ConclusionsAfter a period of rapid increase，the prevalence of ESBLs-producingE.coliseems stable now.Carbapenems such as meropenem and imipenem are the most active antibiotics against ESBLs-producingE.coli.Piperacillin-tazobactam，cefoperazone-sulbactam，amikacin，nitrofurantoin，cefoxitin，cefepime，and ceftazidime also provide relatively high antimicrobial activity.Fluoroquinolones are no longer suitable for treatment of the infections caused by ESBLs-producingE.coli.

；Escherichia coli；extended-spectrumβ-lactamases；resistance

R378.21

A

1009-7708（2015）02-0146-03

2014-04-04

2014-07-07

昆明市延安醫院醫學檢驗科，昆明 650051。

黃云昆（1966—），男，學士，副主任技師，主要從事臨床微生物檢驗與細菌耐藥研究。

黃云昆，E-mail；huangyunkun?hotmail.com。