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沙梨新品種蘇翠1號組培快繁體系研究

2015-01-15 15:43:38藺經李曉剛李慧楊青松王中華常有
江蘇農業(yè)科學 2014年11期

藺經+李曉剛+李慧+楊青松+王中華+常有宏

摘要:為了加快沙梨新品種蘇翠1號的繁殖過程,本試驗以該品種的嫩梢作為外植體,建立了離體快繁技術體系。研究結果表明:蘇翠1號組培苗的適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L,增值系數可達到5.6;在該培養(yǎng)基上繼代2次后轉入生根培養(yǎng)基(1/2MS+IBA1.5mg/L),誘導生根30d后移栽,植株于溫室生長半年后即可用于嫁接,可極大縮短育苗時間。

關鍵詞:沙梨品種;培養(yǎng)基;激素;組織培養(yǎng);快繁技術;移栽

中圖分類號:S661.204+3文獻標志碼:A文章編號:1002-1302(2014)11-0066-02

梨為薔薇科(Rosacmeae)梨亞科(Romoideae)梨屬(Pyrus)多年生果樹,是中國四大水果之一。中國的梨產量和面積超過世界總量的60%,生產上主要的栽培種有白梨、沙梨、秋子梨、新疆梨和西洋梨[1-3]。長江流域是中國沙梨優(yōu)勢產區(qū),發(fā)展早熟梨的經濟效益顯著,目前主栽品種較少(翠冠、愛甘水、喜水等),迫切需要選育優(yōu)質早熟沙梨品種,豐富生產多樣化的需求。江蘇省農業(yè)科學院園藝研究所以早熟梨華酥為母本、翠冠為父本,選育出成熟早、品質優(yōu)、外觀好的沙梨新品種蘇翠1號,該品種果面光潔,果形端正,肉質細脆,豐產穩(wěn)產,具備良好的發(fā)展前景[4]。為加快品種繁育過程,推進其在生產上的應用,本研究以蘇翠1號嫩梢為材料,探討不同培養(yǎng)基及激素配比對蘇翠1號試管苗生長的影響,并建立其離體快繁體系,旨在為大面積推廣該品種提供種苗。

1材料與方法

1.1試驗材料

蘇翠1號嫩梢取自江蘇省農業(yè)科學院園藝研究所梨種質資源圃。

1.2試驗方法

1.2.1初代培養(yǎng)蘇翠1號嫩梢于實驗室剪去葉片,用洗滌劑輕輕刷洗枝條表面,流水沖洗3h,吸干表面水分后,在超凈工作臺上用75%乙醇消毒30s,再用0.1%氯化汞消毒8min,無菌水漂洗5次,接種到無激素添加的MS培養(yǎng)基上進行初代培養(yǎng)。

1.2.2增殖培養(yǎng)(1)不同激素配比對增殖的影響。初代培養(yǎng)后,以生長一致的芽為增殖材料,MS為基本培養(yǎng)基,分別添加不同濃度的6-BA或NAA,進行激素濃度篩選試驗。(2)基本培養(yǎng)基的篩選。初代培養(yǎng)后,以生長一致的芽為增殖材料,選用MS、1/2MS、AS、WPM等4種基本培養(yǎng)基,添加6-BA1.5mg/L和NAA0.2mg/L,進行適宜培養(yǎng)基篩選試驗。

1.2.3組培苗生根切取長約3cm的莖段為生根材料,轉入以1/2MS為基本培養(yǎng)基、添加不同濃度NAA或IBA的生根培養(yǎng)基中,30d后統(tǒng)計生根情況。

以上各階段的培養(yǎng)溫度均為(24±2)℃,光周期12h/d,光照度約為2500lx[5]。

1.2.4移栽及溫室管理待組培苗生根30d后進行移栽,將瓶蓋揭開煉苗3~5d,于流水下輕輕沖洗去除根部瓊脂,種植于含蛭石+珍珠巖(體積比為1∶1)基質(預先用50%多菌靈可濕性粉劑500倍液殺菌)的穴盤中,每3d澆灌1/4MS大量元素母液。溫室內保持20~26℃,遮陰網遮陰,覆膜保濕,逐漸撤膜,2周后完全揭膜。

1.3數據處理

所得數據用DPS軟件進行差異顯著性分析。

2結果與分析

2.1激素配比對蘇翠1號增殖的影響

選擇MS作為基本培養(yǎng)基,將初代培養(yǎng)獲得的生長一致的蘇翠1號組培苗轉接至9個不同濃度的激素配比培養(yǎng)基中,每處理接種30個芽,重復3次,繼代4周后統(tǒng)計增殖情況。表1結果表明:不同處理對蘇翠1號組培苗的增殖影響很大。在NAA濃度不變的情況下,隨著6-BA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數提高,當6-BA為1.5mg/L時,各處理的增殖系數均在5.6以上。6-BA濃度為0.5mg/L或1.0mg/L時,隨著NAA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數提高;6-BA濃度為1.5mg/L時,隨著NAA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數先上升后下降。雖然添加6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L處理的蘇翠1號組培苗增殖系數最高(達7.8),但是部分組培苗表現出纖細、葉色泛黃的現象。綜合考慮不定芽的質量和增殖系數,認為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L為蘇翠1號組培苗增殖的適宜培養(yǎng)基。

2.2不同基本培養(yǎng)基對蘇翠1號增殖的影響

6-BA1.5mg/L和NAA0.2mg/L的基本培養(yǎng)基中,每處理接種30個芽,重復3次,每4周繼代1次,繼代2次后,統(tǒng)計芽的增殖情況。由表2可知,不同培養(yǎng)基對蘇翠1號增殖情況存在顯著影響。擴繁第1代時,組培苗在1/2MS培養(yǎng)基上增殖率最高(6.5),顯著高于其他3種培養(yǎng)基上的增殖系數(高出12.3%~18.5%),在WPM培養(yǎng)基上增殖率最低(5.3),并且在4種基本培養(yǎng)基上的蘇翠1號組培苗均未出現玻璃化現象。增殖第2代,組培苗在MS培養(yǎng)基上增殖率最高(4.3),顯著高于其他3種培養(yǎng)基上的增殖系數(高出4.7%~16.3%),在1/2MS培養(yǎng)基上增殖率最低(3.6)。此外,組培苗在4種基本培養(yǎng)基上均出現不同程度的玻璃化現象,其中在MS培養(yǎng)基上的玻璃化程度最輕(玻璃化率僅為0.9%)。綜合考慮增殖2代的增殖率和玻璃化程度,將

培養(yǎng)基作為蘇翠1號組培苗擴繁的適宜基本培養(yǎng)基。

2.3不同激素對蘇翠1號生根的影響

比較不同激素處理下蘇翠1號的生根狀況發(fā)現:IBA對其組培苗的生根效果優(yōu)于NAA(表3)。當NAA濃度為0.5~2.0mg/L時,隨著其濃度的升高,誘導生根率也逐步升高,但最高生根率僅為17.2%,平均生根數為3.7條,須根無或很少,并且絕大部分組培苗的基部都有愈傷組織生成,給試管苗的移栽造成一定困難。在IBA誘導培養(yǎng)下,IBA濃度為1.5mg/L時生根率達到最高,為45.3%,平均生根數也最多(4.9條),并且須根較多,雖然有70%的生根組培苗基部同時也形成了愈傷組織,但是與NAA處理條件下相比,所形成的愈傷組織比較緊密且體積很小,對組培苗的移栽幾乎不存在影響。當IBA濃度進一步增加到2.0mg/L時,生根率有所下降,平均生根數只有3.6條,且愈傷組織誘導率達到85%。綜合考慮不同激素處理條件下蘇翠1號組培苗的愈傷組織誘導狀況、生根率、生根數和生根狀態(tài),可以認為1/2MS+IBA1.5mg/L適宜作為蘇翠1號組培苗生根培養(yǎng)基。

2.4移栽

將在1/2MS+IBA1.5mg/L培養(yǎng)基上生根30d后的蘇翠1號組培苗進行移栽,通過煉苗、基質消毒、遮陰和覆膜等方法,能使植株成活率達到80%以上,移栽15d后可見新葉長出,移栽3個月后可常規(guī)管理,半年后可收獲枝條用于嫁接繁苗。

3結論

為了加快沙梨新品種蘇翠1號的繁殖過程,本試驗建立了其離體快繁技術體系:蘇翠1號經過嫩梢初代培養(yǎng)獲得無菌芽,在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L上繼代2次,轉入生根培養(yǎng)基(1/2MS+IBA1.5mg/L),誘導生根30d后移栽,植株于溫室生長6個月后即可用于嫁接,極大地縮短了其育苗時間。在快速繁殖苗木過程中,組培苗生根數量的多少對苗木移栽馴化的成活率影響很大。有效生根苗的平均生根數≥3條,其成活率較高[6]。本試驗中,蘇翠1號在1/2MS+IBA1.5mg/L生根培養(yǎng)基上的平均生根數為4.9條(表3),根系質量較好,移栽后成活率在80%以上,6個月后可收獲枝條用于嫁接繁苗,可以快速地繁育優(yōu)良品種。

[HS3][HT8.5H]參考文獻:

[1]滕元文,柴明良,李秀根.梨屬植物分類的歷史回顧及新進展[J].果樹學報,2004,21(3):252-257.

[2]高源,田路明,劉鳳之,等.利用SSR熒光標記構建92個梨品種指紋圖譜[J].園藝學報,2012,39(8):1437-1446.

[3]馮立娟,苑兆和,尹燕雷,等.國內外梨研究態(tài)勢分析[J].江蘇農業(yè)科學,2013,41(12):174-177.

[4]藺經,盛寶龍,李曉剛,等.早熟砂梨新品種蘇翠1號[J].園藝學報,2013,40(9):1849-1850.

[5]李曉剛,王宏偉,楊青松,等.豆梨低玻璃化組培快繁技術[J].江蘇農業(yè)科學,2012,40(12):54-56.

[6]陳宗禮,劉建玲,延志蓮,等.植物快繁中有效快繁速度與商品苗總產量的計算與控制[J].西北植物學報,1999,19(3):422-427.

摘要:為了加快沙梨新品種蘇翠1號的繁殖過程,本試驗以該品種的嫩梢作為外植體,建立了離體快繁技術體系。研究結果表明:蘇翠1號組培苗的適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L,增值系數可達到5.6;在該培養(yǎng)基上繼代2次后轉入生根培養(yǎng)基(1/2MS+IBA1.5mg/L),誘導生根30d后移栽,植株于溫室生長半年后即可用于嫁接,可極大縮短育苗時間。

關鍵詞:沙梨品種;培養(yǎng)基;激素;組織培養(yǎng);快繁技術;移栽

中圖分類號:S661.204+3文獻標志碼:A文章編號:1002-1302(2014)11-0066-02

梨為薔薇科(Rosacmeae)梨亞科(Romoideae)梨屬(Pyrus)多年生果樹,是中國四大水果之一。中國的梨產量和面積超過世界總量的60%,生產上主要的栽培種有白梨、沙梨、秋子梨、新疆梨和西洋梨[1-3]。長江流域是中國沙梨優(yōu)勢產區(qū),發(fā)展早熟梨的經濟效益顯著,目前主栽品種較少(翠冠、愛甘水、喜水等),迫切需要選育優(yōu)質早熟沙梨品種,豐富生產多樣化的需求。江蘇省農業(yè)科學院園藝研究所以早熟梨華酥為母本、翠冠為父本,選育出成熟早、品質優(yōu)、外觀好的沙梨新品種蘇翠1號,該品種果面光潔,果形端正,肉質細脆,豐產穩(wěn)產,具備良好的發(fā)展前景[4]。為加快品種繁育過程,推進其在生產上的應用,本研究以蘇翠1號嫩梢為材料,探討不同培養(yǎng)基及激素配比對蘇翠1號試管苗生長的影響,并建立其離體快繁體系,旨在為大面積推廣該品種提供種苗。

1材料與方法

1.1試驗材料

蘇翠1號嫩梢取自江蘇省農業(yè)科學院園藝研究所梨種質資源圃。

1.2試驗方法

1.2.1初代培養(yǎng)蘇翠1號嫩梢于實驗室剪去葉片,用洗滌劑輕輕刷洗枝條表面,流水沖洗3h,吸干表面水分后,在超凈工作臺上用75%乙醇消毒30s,再用0.1%氯化汞消毒8min,無菌水漂洗5次,接種到無激素添加的MS培養(yǎng)基上進行初代培養(yǎng)。

1.2.2增殖培養(yǎng)(1)不同激素配比對增殖的影響。初代培養(yǎng)后,以生長一致的芽為增殖材料,MS為基本培養(yǎng)基,分別添加不同濃度的6-BA或NAA,進行激素濃度篩選試驗。(2)基本培養(yǎng)基的篩選。初代培養(yǎng)后,以生長一致的芽為增殖材料,選用MS、1/2MS、AS、WPM等4種基本培養(yǎng)基,添加6-BA1.5mg/L和NAA0.2mg/L,進行適宜培養(yǎng)基篩選試驗。

1.2.3組培苗生根切取長約3cm的莖段為生根材料,轉入以1/2MS為基本培養(yǎng)基、添加不同濃度NAA或IBA的生根培養(yǎng)基中,30d后統(tǒng)計生根情況。

以上各階段的培養(yǎng)溫度均為(24±2)℃,光周期12h/d,光照度約為2500lx[5]。

1.2.4移栽及溫室管理待組培苗生根30d后進行移栽,將瓶蓋揭開煉苗3~5d,于流水下輕輕沖洗去除根部瓊脂,種植于含蛭石+珍珠巖(體積比為1∶1)基質(預先用50%多菌靈可濕性粉劑500倍液殺菌)的穴盤中,每3d澆灌1/4MS大量元素母液。溫室內保持20~26℃,遮陰網遮陰,覆膜保濕,逐漸撤膜,2周后完全揭膜。

1.3數據處理

所得數據用DPS軟件進行差異顯著性分析。

2結果與分析

2.1激素配比對蘇翠1號增殖的影響

選擇MS作為基本培養(yǎng)基,將初代培養(yǎng)獲得的生長一致的蘇翠1號組培苗轉接至9個不同濃度的激素配比培養(yǎng)基中,每處理接種30個芽,重復3次,繼代4周后統(tǒng)計增殖情況。表1結果表明:不同處理對蘇翠1號組培苗的增殖影響很大。在NAA濃度不變的情況下,隨著6-BA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數提高,當6-BA為1.5mg/L時,各處理的增殖系數均在5.6以上。6-BA濃度為0.5mg/L或1.0mg/L時,隨著NAA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數提高;6-BA濃度為1.5mg/L時,隨著NAA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數先上升后下降。雖然添加6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L處理的蘇翠1號組培苗增殖系數最高(達7.8),但是部分組培苗表現出纖細、葉色泛黃的現象。綜合考慮不定芽的質量和增殖系數,認為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L為蘇翠1號組培苗增殖的適宜培養(yǎng)基。

2.2不同基本培養(yǎng)基對蘇翠1號增殖的影響

6-BA1.5mg/L和NAA0.2mg/L的基本培養(yǎng)基中,每處理接種30個芽,重復3次,每4周繼代1次,繼代2次后,統(tǒng)計芽的增殖情況。由表2可知,不同培養(yǎng)基對蘇翠1號增殖情況存在顯著影響。擴繁第1代時,組培苗在1/2MS培養(yǎng)基上增殖率最高(6.5),顯著高于其他3種培養(yǎng)基上的增殖系數(高出12.3%~18.5%),在WPM培養(yǎng)基上增殖率最低(5.3),并且在4種基本培養(yǎng)基上的蘇翠1號組培苗均未出現玻璃化現象。增殖第2代,組培苗在MS培養(yǎng)基上增殖率最高(4.3),顯著高于其他3種培養(yǎng)基上的增殖系數(高出4.7%~16.3%),在1/2MS培養(yǎng)基上增殖率最低(3.6)。此外,組培苗在4種基本培養(yǎng)基上均出現不同程度的玻璃化現象,其中在MS培養(yǎng)基上的玻璃化程度最輕(玻璃化率僅為0.9%)。綜合考慮增殖2代的增殖率和玻璃化程度,將

培養(yǎng)基作為蘇翠1號組培苗擴繁的適宜基本培養(yǎng)基。

2.3不同激素對蘇翠1號生根的影響

比較不同激素處理下蘇翠1號的生根狀況發(fā)現:IBA對其組培苗的生根效果優(yōu)于NAA(表3)。當NAA濃度為0.5~2.0mg/L時,隨著其濃度的升高,誘導生根率也逐步升高,但最高生根率僅為17.2%,平均生根數為3.7條,須根無或很少,并且絕大部分組培苗的基部都有愈傷組織生成,給試管苗的移栽造成一定困難。在IBA誘導培養(yǎng)下,IBA濃度為1.5mg/L時生根率達到最高,為45.3%,平均生根數也最多(4.9條),并且須根較多,雖然有70%的生根組培苗基部同時也形成了愈傷組織,但是與NAA處理條件下相比,所形成的愈傷組織比較緊密且體積很小,對組培苗的移栽幾乎不存在影響。當IBA濃度進一步增加到2.0mg/L時,生根率有所下降,平均生根數只有3.6條,且愈傷組織誘導率達到85%。綜合考慮不同激素處理條件下蘇翠1號組培苗的愈傷組織誘導狀況、生根率、生根數和生根狀態(tài),可以認為1/2MS+IBA1.5mg/L適宜作為蘇翠1號組培苗生根培養(yǎng)基。

2.4移栽

將在1/2MS+IBA1.5mg/L培養(yǎng)基上生根30d后的蘇翠1號組培苗進行移栽,通過煉苗、基質消毒、遮陰和覆膜等方法,能使植株成活率達到80%以上,移栽15d后可見新葉長出,移栽3個月后可常規(guī)管理,半年后可收獲枝條用于嫁接繁苗。

3結論

為了加快沙梨新品種蘇翠1號的繁殖過程,本試驗建立了其離體快繁技術體系:蘇翠1號經過嫩梢初代培養(yǎng)獲得無菌芽,在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L上繼代2次,轉入生根培養(yǎng)基(1/2MS+IBA1.5mg/L),誘導生根30d后移栽,植株于溫室生長6個月后即可用于嫁接,極大地縮短了其育苗時間。在快速繁殖苗木過程中,組培苗生根數量的多少對苗木移栽馴化的成活率影響很大。有效生根苗的平均生根數≥3條,其成活率較高[6]。本試驗中,蘇翠1號在1/2MS+IBA1.5mg/L生根培養(yǎng)基上的平均生根數為4.9條(表3),根系質量較好,移栽后成活率在80%以上,6個月后可收獲枝條用于嫁接繁苗,可以快速地繁育優(yōu)良品種。

[HS3][HT8.5H]參考文獻:

[1]滕元文,柴明良,李秀根.梨屬植物分類的歷史回顧及新進展[J].果樹學報,2004,21(3):252-257.

[2]高源,田路明,劉鳳之,等.利用SSR熒光標記構建92個梨品種指紋圖譜[J].園藝學報,2012,39(8):1437-1446.

[3]馮立娟,苑兆和,尹燕雷,等.國內外梨研究態(tài)勢分析[J].江蘇農業(yè)科學,2013,41(12):174-177.

[4]藺經,盛寶龍,李曉剛,等.早熟砂梨新品種蘇翠1號[J].園藝學報,2013,40(9):1849-1850.

[5]李曉剛,王宏偉,楊青松,等.豆梨低玻璃化組培快繁技術[J].江蘇農業(yè)科學,2012,40(12):54-56.

[6]陳宗禮,劉建玲,延志蓮,等.植物快繁中有效快繁速度與商品苗總產量的計算與控制[J].西北植物學報,1999,19(3):422-427.

摘要:為了加快沙梨新品種蘇翠1號的繁殖過程,本試驗以該品種的嫩梢作為外植體,建立了離體快繁技術體系。研究結果表明:蘇翠1號組培苗的適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L,增值系數可達到5.6;在該培養(yǎng)基上繼代2次后轉入生根培養(yǎng)基(1/2MS+IBA1.5mg/L),誘導生根30d后移栽,植株于溫室生長半年后即可用于嫁接,可極大縮短育苗時間。

關鍵詞:沙梨品種;培養(yǎng)基;激素;組織培養(yǎng);快繁技術;移栽

中圖分類號:S661.204+3文獻標志碼:A文章編號:1002-1302(2014)11-0066-02

梨為薔薇科(Rosacmeae)梨亞科(Romoideae)梨屬(Pyrus)多年生果樹,是中國四大水果之一。中國的梨產量和面積超過世界總量的60%,生產上主要的栽培種有白梨、沙梨、秋子梨、新疆梨和西洋梨[1-3]。長江流域是中國沙梨優(yōu)勢產區(qū),發(fā)展早熟梨的經濟效益顯著,目前主栽品種較少(翠冠、愛甘水、喜水等),迫切需要選育優(yōu)質早熟沙梨品種,豐富生產多樣化的需求。江蘇省農業(yè)科學院園藝研究所以早熟梨華酥為母本、翠冠為父本,選育出成熟早、品質優(yōu)、外觀好的沙梨新品種蘇翠1號,該品種果面光潔,果形端正,肉質細脆,豐產穩(wěn)產,具備良好的發(fā)展前景[4]。為加快品種繁育過程,推進其在生產上的應用,本研究以蘇翠1號嫩梢為材料,探討不同培養(yǎng)基及激素配比對蘇翠1號試管苗生長的影響,并建立其離體快繁體系,旨在為大面積推廣該品種提供種苗。

1材料與方法

1.1試驗材料

蘇翠1號嫩梢取自江蘇省農業(yè)科學院園藝研究所梨種質資源圃。

1.2試驗方法

1.2.1初代培養(yǎng)蘇翠1號嫩梢于實驗室剪去葉片,用洗滌劑輕輕刷洗枝條表面,流水沖洗3h,吸干表面水分后,在超凈工作臺上用75%乙醇消毒30s,再用0.1%氯化汞消毒8min,無菌水漂洗5次,接種到無激素添加的MS培養(yǎng)基上進行初代培養(yǎng)。

1.2.2增殖培養(yǎng)(1)不同激素配比對增殖的影響。初代培養(yǎng)后,以生長一致的芽為增殖材料,MS為基本培養(yǎng)基,分別添加不同濃度的6-BA或NAA,進行激素濃度篩選試驗。(2)基本培養(yǎng)基的篩選。初代培養(yǎng)后,以生長一致的芽為增殖材料,選用MS、1/2MS、AS、WPM等4種基本培養(yǎng)基,添加6-BA1.5mg/L和NAA0.2mg/L,進行適宜培養(yǎng)基篩選試驗。

1.2.3組培苗生根切取長約3cm的莖段為生根材料,轉入以1/2MS為基本培養(yǎng)基、添加不同濃度NAA或IBA的生根培養(yǎng)基中,30d后統(tǒng)計生根情況。

以上各階段的培養(yǎng)溫度均為(24±2)℃,光周期12h/d,光照度約為2500lx[5]。

1.2.4移栽及溫室管理待組培苗生根30d后進行移栽,將瓶蓋揭開煉苗3~5d,于流水下輕輕沖洗去除根部瓊脂,種植于含蛭石+珍珠巖(體積比為1∶1)基質(預先用50%多菌靈可濕性粉劑500倍液殺菌)的穴盤中,每3d澆灌1/4MS大量元素母液。溫室內保持20~26℃,遮陰網遮陰,覆膜保濕,逐漸撤膜,2周后完全揭膜。

1.3數據處理

所得數據用DPS軟件進行差異顯著性分析。

2結果與分析

2.1激素配比對蘇翠1號增殖的影響

選擇MS作為基本培養(yǎng)基,將初代培養(yǎng)獲得的生長一致的蘇翠1號組培苗轉接至9個不同濃度的激素配比培養(yǎng)基中,每處理接種30個芽,重復3次,繼代4周后統(tǒng)計增殖情況。表1結果表明:不同處理對蘇翠1號組培苗的增殖影響很大。在NAA濃度不變的情況下,隨著6-BA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數提高,當6-BA為1.5mg/L時,各處理的增殖系數均在5.6以上。6-BA濃度為0.5mg/L或1.0mg/L時,隨著NAA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數提高;6-BA濃度為1.5mg/L時,隨著NAA濃度增大,蘇翠1號組培苗增殖系數先上升后下降。雖然添加6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L處理的蘇翠1號組培苗增殖系數最高(達7.8),但是部分組培苗表現出纖細、葉色泛黃的現象。綜合考慮不定芽的質量和增殖系數,認為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L為蘇翠1號組培苗增殖的適宜培養(yǎng)基。

2.2不同基本培養(yǎng)基對蘇翠1號增殖的影響

6-BA1.5mg/L和NAA0.2mg/L的基本培養(yǎng)基中,每處理接種30個芽,重復3次,每4周繼代1次,繼代2次后,統(tǒng)計芽的增殖情況。由表2可知,不同培養(yǎng)基對蘇翠1號增殖情況存在顯著影響。擴繁第1代時,組培苗在1/2MS培養(yǎng)基上增殖率最高(6.5),顯著高于其他3種培養(yǎng)基上的增殖系數(高出12.3%~18.5%),在WPM培養(yǎng)基上增殖率最低(5.3),并且在4種基本培養(yǎng)基上的蘇翠1號組培苗均未出現玻璃化現象。增殖第2代,組培苗在MS培養(yǎng)基上增殖率最高(4.3),顯著高于其他3種培養(yǎng)基上的增殖系數(高出4.7%~16.3%),在1/2MS培養(yǎng)基上增殖率最低(3.6)。此外,組培苗在4種基本培養(yǎng)基上均出現不同程度的玻璃化現象,其中在MS培養(yǎng)基上的玻璃化程度最輕(玻璃化率僅為0.9%)。綜合考慮增殖2代的增殖率和玻璃化程度,將

培養(yǎng)基作為蘇翠1號組培苗擴繁的適宜基本培養(yǎng)基。

2.3不同激素對蘇翠1號生根的影響

比較不同激素處理下蘇翠1號的生根狀況發(fā)現:IBA對其組培苗的生根效果優(yōu)于NAA(表3)。當NAA濃度為0.5~2.0mg/L時,隨著其濃度的升高,誘導生根率也逐步升高,但最高生根率僅為17.2%,平均生根數為3.7條,須根無或很少,并且絕大部分組培苗的基部都有愈傷組織生成,給試管苗的移栽造成一定困難。在IBA誘導培養(yǎng)下,IBA濃度為1.5mg/L時生根率達到最高,為45.3%,平均生根數也最多(4.9條),并且須根較多,雖然有70%的生根組培苗基部同時也形成了愈傷組織,但是與NAA處理條件下相比,所形成的愈傷組織比較緊密且體積很小,對組培苗的移栽幾乎不存在影響。當IBA濃度進一步增加到2.0mg/L時,生根率有所下降,平均生根數只有3.6條,且愈傷組織誘導率達到85%。綜合考慮不同激素處理條件下蘇翠1號組培苗的愈傷組織誘導狀況、生根率、生根數和生根狀態(tài),可以認為1/2MS+IBA1.5mg/L適宜作為蘇翠1號組培苗生根培養(yǎng)基。

2.4移栽

將在1/2MS+IBA1.5mg/L培養(yǎng)基上生根30d后的蘇翠1號組培苗進行移栽,通過煉苗、基質消毒、遮陰和覆膜等方法,能使植株成活率達到80%以上,移栽15d后可見新葉長出,移栽3個月后可常規(guī)管理,半年后可收獲枝條用于嫁接繁苗。

3結論

為了加快沙梨新品種蘇翠1號的繁殖過程,本試驗建立了其離體快繁技術體系:蘇翠1號經過嫩梢初代培養(yǎng)獲得無菌芽,在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L上繼代2次,轉入生根培養(yǎng)基(1/2MS+IBA1.5mg/L),誘導生根30d后移栽,植株于溫室生長6個月后即可用于嫁接,極大地縮短了其育苗時間。在快速繁殖苗木過程中,組培苗生根數量的多少對苗木移栽馴化的成活率影響很大。有效生根苗的平均生根數≥3條,其成活率較高[6]。本試驗中,蘇翠1號在1/2MS+IBA1.5mg/L生根培養(yǎng)基上的平均生根數為4.9條(表3),根系質量較好,移栽后成活率在80%以上,6個月后可收獲枝條用于嫁接繁苗,可以快速地繁育優(yōu)良品種。

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