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磁處理對菊花組培苗增殖及生理生化的影響

2015-01-15 15:53:59徐式近徐忠傳蔡平黃溶
江蘇農(nóng)業(yè)科學 2014年11期

徐式近+徐忠傳+蔡平+黃溶

摘要:以切花菊品種優(yōu)香組培苗為試驗材料,用4種磁感應強度(6、12、18、24mT)和4種磁處理時間(2.5、5、10、20h)的組合進行磁處理,測定磁處理后組培苗的繁殖系數(shù)、可溶性糖含量、相對電導率以及POD、SOD、CAT活性等指標。結果發(fā)現(xiàn),12mT/10h處理下組培苗繁殖系數(shù)最高,12mT/5h處理下組培苗可溶性糖含量最高,18mT/20h處理下組培苗相對電導率最低,24mT/2.5h處理下組培苗CAT活性最低,18mT/10h處理下SOD活性最低,12mT/2.5h處理下POD活性最低。以上結果表明,磁處理對菊花組培苗繁殖系數(shù)及生理生化具有不同程度的影響,這為今后將磁處理應用在菊花乃至其他觀賞植物組織培養(yǎng)方面提供理論的參考。

關鍵詞:菊花;組培苗;磁處理;增殖;生理生化

中圖分類號:S682.1+10.4+3文獻標志碼:A文章編號:1002-1302(2014)11-0080-03

生物磁學是近幾十年發(fā)展起來的一門研究磁性、磁場與生物特性和生命活動之間相互聯(lián)系及相互影響的邊緣學科,目前已在醫(yī)療、工業(yè)、農(nóng)業(yè)和環(huán)保等方面得到廣泛的應用[1]。植物組織培養(yǎng)幾乎涉及植物生物技術的所有內容,廣泛應用于細胞、分子生物學等研究領域[2]。然而,生物磁學在植物組織培養(yǎng)中的應用相對較少,到目前為止僅有磁處理黃精[3]、菊花[4]、烏藥[5]、濱梅[6]等組培苗以及擬南芥[7]、變葉木[8]、馬尾松[9]等愈傷組織的報道,已有結果均表明合適的磁處理對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進作用。但這些報道多數(shù)只局限于磁處理對組培苗或愈傷組織外部形態(tài)的影響,而尚未涉及到內部生理生化的影響。本試驗以切花菊品種優(yōu)香(Chrysanthemummorifolium)為材料,用4種磁感應強度(6、12、18、24mT)和4種磁處理時間(2.5、5、10、20h)的組合進行磁處理,探討磁處理對菊花組培苗增殖及生理生化的影響,為磁處理在菊花組織培養(yǎng)方面的應用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

切花菊優(yōu)香原始組培苗由張家港駿馬農(nóng)林科技有限公司提供,在常熟理工學院生物與食品工程學院植物生物技術實驗室擴繁。試驗所用的試劑均為分析純,CAT、SOD、POD試劑盒均購自南京建成科技有限公司。

1.2組培方法

選擇生長健壯且一致的組培苗,在超凈工作臺中剪取長0.5cm左右?guī)?個節(jié)的莖段,剪掉葉片,留一點葉柄以免損傷葉腋,形態(tài)學上端朝上垂直插入分化培養(yǎng)基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂中,每瓶接種4~5個莖段。接種完后先在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d,選取無污染的組培苗進行磁處理。培養(yǎng)溫度為25±2℃,日光燈光源,光照度為21~24μmol/(m2·s),光照周期為12h/d[10]。

1.3磁處理方法

將無污染的菊花組培苗的培養(yǎng)瓶放在4種磁感應強度A(6mT)、B(12mT)、C(18mT)、D(24mT)的磁處理裝置上進行磁處理,設置處理時間為1(2.5h)、2(5h)、3(10h)、4(20h),采用完全隨機區(qū)組試驗設計,共得到16個磁處理組合,無磁處理為對照組CK。每組處理為3瓶,重復3次。處理后均放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),條件同“1、2”節(jié),42d后統(tǒng)計測定各項指標[3-5]。

1.4指標測定方法

1.4.1繁殖系數(shù)統(tǒng)計統(tǒng)計0.5cm以上的生長正常的不定芽個數(shù)(不包括玻璃化芽),再計算繁殖系數(shù):繁殖系數(shù)=分化出的不定芽個數(shù)/分化出不定芽的外植體個數(shù)[10]。

1.4.2相對電導率測定用電導儀測定。稱取0.3g不定芽,剪碎后置于試管中,加入15mL蒸餾水浸提2h,搖勻,用電導儀測定電導率R1,沸水浴15min,靜止冷卻至室溫,測電導率R2,最后計算相對電導率:相對電導率=初電導率/終電導率×100%[11-12]。

1.4.3可溶性糖含量測定

用蒽酮法測定[13]。精確稱取0.1g不定芽,剪碎后置于試管中,加入5mL蒸餾水,加蓋沸水浴30min,提取液過濾入50mL容量瓶中定容備用。每個樣品取1mL加等體積蒸餾水、0.5mL蒽酮乙酸乙酯與5mL濃硫酸于試管中,充分混勻,1min后水浴冷卻,用紫外-可見分光光度計測630nm處的吸光度D630nm,參照蔗糖標準曲線計算可溶性糖含量,蔗糖標準曲線線性回歸方程為:y=0.123x-0.1248,r=0.9998,可溶性糖含量=(標準曲線查得的糖量×提取液總體積)/(植物質量×測量用提取液的體積×106)×100%。

1.4.5POD、SOD、CAT活性測定

提取液制備:稱取1.0g不定芽,剪碎后加入預冷的研缽,加2mL預冷的磷酸緩沖液(0.05mol/L,pH值7.8),研磨后用6mL磷酸緩沖液沖洗于離心管中,6000r/min離心10min,上清液倒入50mL容量瓶定容備用。取上述酶提取液,均按照試劑盒說明書的步驟進行測定。

2結果與分析

磁處理后將組培苗培養(yǎng)42d,統(tǒng)計測定各項生理生化指標,計算平均值,得到的平均值再計算相對指數(shù):相對指數(shù)=(處理組平均值-對照組平均值)/對照組平均值×100%。如果相對指數(shù)為正值,則表示磁處理后該指標比對照組增加;如果為負值,則表示磁處理后該指標比對照組減少。

2.1磁處理對菊花組培苗繁殖系數(shù)的影響

如圖1所示,磁處理對菊花組培苗繁殖系數(shù)有影響。在16個磁處理組合中,有11個處理組合的繁殖系數(shù)比對照組高,表明多數(shù)磁處理條件能促進菊花組培苗不定芽的分化;其中繁殖系數(shù)比對照高20%以上磁處理組合有A2、A3、A4、B1、B3,其中B3最高,達60%,即12mT/10h是最有利于菊花組培苗不定芽的分化。當磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,繁殖系數(shù)基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,繁殖系數(shù)基本呈現(xiàn)先增加后減少或減少的趨勢。

2.2磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量的影響

如圖2所示,磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量有影響。在16個磁處理組合中,有9個處理組合的可溶性糖含量比對照組高,其中B2處理組合比對照組高13%,而A1、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4處理組合比對照組增加幅度在5%以下,表明這些磁處理雖能在不同程度上促進菊花組培苗可溶性糖的合成,但多數(shù)情況下促進效果不明顯。因此,B2處理12mT/5h是最有利于菊花組培苗可溶性糖的合成。磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,可溶性糖含量的變化沒有明顯的規(guī)律;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,可溶性糖含量基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

2.3磁處理對菊花組培苗相對電導率的影響

如圖3所示,所有處理組的相對電導率均比對照組低,表明所有處理組的細胞膜透性均比對照組小,其中相對電導率比對照組低20%以上的磁處理組合有A2、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4、D2,其中最低為C4,達34%,即18mT/20h是最能保護細胞膜不受損害。當磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,相對電導率的變化沒有明顯的規(guī)律;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,相對電導率基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢。

2.4磁處理對菊花組培苗抗氧化酶活性的影響

2.4.1磁處理對菊花組培苗CAT活性的影響如圖4所示,磁處理對菊花組培苗CAT活性有影響。在16個處理組合中有12個處理的CAT活性比對照組低,表明這些磁處理條件能抑制CAT活性,其中CAT活性比對照組低20%以上的組合有A1、A2、B2、C4、D1,最低為D1,達30%,即24mT/2.5h最能抑制CAT活性。磁處理對菊花組培苗CAT活性影響沒有明顯的規(guī)律。

2.4.2磁處理對菊花組培苗SOD活性的影響如圖5所示,磁處理對菊花組培苗SOD活性有影響。在16個處理組合中有15個處理組合的SOD活性比對照組低,表明這些磁處理條件抑制SOD活性,其中SOD活性比對照組低20%以上組合有B4、C3、C4、D2、D3,最低為C3,達30%,即18mT/10h是最能抑制SOD活性。磁感應強度介于6~12mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當磁感應強度介于18~24mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;然而當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,SOD活性變化沒有明顯的規(guī)律。

2.4.3磁處理對菊花組培苗POD活性的影響如圖6所示,磁處理對菊花組培苗POD活性有影響。在16個處理組

合中有11個處理組合的POD活性均比對照組低,表明這些磁處理條件抑制POD活性,其中POD活性比對照組低20%以上的只有B1,即12mT/2.5h最能抑制POD活性。當磁感應強度介于6~24mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先減少后增加再減少的趨勢;當磁感應強度介于12~18mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢;當磁處理時間介于2.5~10h時,隨著磁感應強度的增加,POD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;當磁處理時間介于5~20h時,隨著磁感應強度的增加,POD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

3討論

一些研究表明,磁處理能在不同程度上對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進作用,如徐忠傳等發(fā)現(xiàn)合適的磁處理條件能夠促進菊花和烏藥不定芽的產(chǎn)生[4-5],閆道良等研究表明[6]合適的磁處理條件能夠促進濱梅不定芽的增殖,梁華等研究表明,磁處理能夠促進黃精根莖的增殖[3]。本試驗研究表明,合適的磁處理條件能夠促進菊花不定芽的產(chǎn)生,與上述研究結果一致。可溶性糖含量的高低與新陳代謝的快慢有密切的關系。梁華等研究表明,磁場處理后黃精組培苗的可溶性糖和蛋白質的含量都有增加的趨勢,只是增加的趨勢各不相同[3]。本試驗中,合適的磁處理條件能增加菊花組培苗可溶性糖的含量,與梁華的研究結果一致,表明合適的磁處理條件能促進菊花組培苗的新陳代謝。

磁場作為一種脅迫因子,對細胞膜會產(chǎn)生一定程度的損傷,導致相對電導率增加[9]。本試驗中,磁處理菊花組培苗后相對電導率均下降,原因可能是磁處理后經(jīng)過42d的培養(yǎng),細胞膜的損傷已經(jīng)恢復,而且細胞膜的穩(wěn)定性比對照組更好。磁處理可影響含有重要金屬的酶,從而改變這些酶的活性、結構和功能,進一步影響到這些酶所參與的一系列生理生化反應,使植物表現(xiàn)出磁效應[14]。許多研究表明,合適的磁處理能夠提高抗氧化酶活性,從而減緩脂質過氧化,延緩植物衰老、提高植物抗性等[1,3,9]。在本試驗中大部分磁處理組合抑制了抗氧化酶活性,與很多研究結果[1,3,9]相反。原因可能是磁處理后組培苗經(jīng)過42d的培養(yǎng),磁處理對抗氧化酶活性的影響已經(jīng)恢復,組培苗的生理狀態(tài)相對穩(wěn)定,各方面代謝調整到較好狀態(tài),因此植物體內的氧自由基含量較少且穩(wěn)定,自由基及其衍生物對植物體構不成傷害或傷害很小,此時保護酶活性較小[15]。

綜上所述,合適的磁處理條件對多種植物組培苗的生長有促進作用,在此基礎上,可進一步研究磁處理對組培苗抗性的影響。作為一種物理技術,磁處理具有綠色、環(huán)保、方便、廉價等特點,因此在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應用前景廣闊。然而合適的磁處理條件因植物種類、植物生理狀態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等因素的不同而不同,因此需要根據(jù)實際情況進行試驗。

參考文獻:

[1]曹宏,趙國林,張承烈.生物磁學在農(nóng)作物生產(chǎn)中的應用[J].植物生理學通訊,1999,35(2):163-168.

[2]呂毅,商澎.不同磁場環(huán)境和培養(yǎng)基對擬南芥種子誘導愈傷組織的影響[J].核農(nóng)學報,2012,26(5):723-728.

[3]梁華.磁場處理對黃精組培苗影響的研究[D].合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學,2007.

[4]徐忠傳,施佳宏,金波,等.磁處理對菊花組培苗生長的影響研究[C].第三屆全國植物組培,2007:55-58.

[5]徐忠傳,周靜亞.磁場對烏藥試管苗生長的生物學效應研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2008,36(23):10013-10015.

[6]閆道良,欽佩,吳衛(wèi)國,等.磁處理對濱梅組培苗增殖及再生的影響[J].南京林業(yè)大學學報:自然科學版,2007,31(3):99-102.

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[8]吳玉荷.磁場對變葉木愈傷組織培養(yǎng)的效應[J].深圳大學學報:理工版,2002,19(1):67-71.

[9]梁軍,寧少華,王振朝,等.脈沖磁場對馬尾松愈傷組織生長和生理生化特性的影響[J].林業(yè)科學研究,2008,21(6):818-824.

[10]徐式近,徐忠傳.不同菊花品種高效直接再生體系的構建[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學,2013,41(11):52-54,100.

[11]侯福林.植物生理學實驗教程[M].北京:科學出版社,2004.

[12]陳愛葵,韓瑞宏,李東洋,等.植物葉片相對電導率測定方法比較研究[J].廣東教育學院學報,2010,30(5):88-91.

[13]王學奎.植物生理生化實驗原理和技術[M].2版.北京:高等教育出版社,2006.

[14]王紅梅.磁場對綠豆芽長及超氧化物歧化酶的實驗研究[J].實驗技術與管理,2011,28(3):63-65,72.

[15]王成霞,董曉穎,李培環(huán),等.桃葉片POD、SOD、CAT活性與樹體矮化和生長的關系[J].中國農(nóng)學通報,2007,23(6):353-357.

2.2磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量的影響

如圖2所示,磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量有影響。在16個磁處理組合中,有9個處理組合的可溶性糖含量比對照組高,其中B2處理組合比對照組高13%,而A1、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4處理組合比對照組增加幅度在5%以下,表明這些磁處理雖能在不同程度上促進菊花組培苗可溶性糖的合成,但多數(shù)情況下促進效果不明顯。因此,B2處理12mT/5h是最有利于菊花組培苗可溶性糖的合成。磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,可溶性糖含量的變化沒有明顯的規(guī)律;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,可溶性糖含量基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

2.3磁處理對菊花組培苗相對電導率的影響

如圖3所示,所有處理組的相對電導率均比對照組低,表明所有處理組的細胞膜透性均比對照組小,其中相對電導率比對照組低20%以上的磁處理組合有A2、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4、D2,其中最低為C4,達34%,即18mT/20h是最能保護細胞膜不受損害。當磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,相對電導率的變化沒有明顯的規(guī)律;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,相對電導率基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢。

2.4磁處理對菊花組培苗抗氧化酶活性的影響

2.4.1磁處理對菊花組培苗CAT活性的影響如圖4所示,磁處理對菊花組培苗CAT活性有影響。在16個處理組合中有12個處理的CAT活性比對照組低,表明這些磁處理條件能抑制CAT活性,其中CAT活性比對照組低20%以上的組合有A1、A2、B2、C4、D1,最低為D1,達30%,即24mT/2.5h最能抑制CAT活性。磁處理對菊花組培苗CAT活性影響沒有明顯的規(guī)律。

2.4.2磁處理對菊花組培苗SOD活性的影響如圖5所示,磁處理對菊花組培苗SOD活性有影響。在16個處理組合中有15個處理組合的SOD活性比對照組低,表明這些磁處理條件抑制SOD活性,其中SOD活性比對照組低20%以上組合有B4、C3、C4、D2、D3,最低為C3,達30%,即18mT/10h是最能抑制SOD活性。磁感應強度介于6~12mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當磁感應強度介于18~24mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;然而當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,SOD活性變化沒有明顯的規(guī)律。

2.4.3磁處理對菊花組培苗POD活性的影響如圖6所示,磁處理對菊花組培苗POD活性有影響。在16個處理組

合中有11個處理組合的POD活性均比對照組低,表明這些磁處理條件抑制POD活性,其中POD活性比對照組低20%以上的只有B1,即12mT/2.5h最能抑制POD活性。當磁感應強度介于6~24mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先減少后增加再減少的趨勢;當磁感應強度介于12~18mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢;當磁處理時間介于2.5~10h時,隨著磁感應強度的增加,POD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;當磁處理時間介于5~20h時,隨著磁感應強度的增加,POD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

3討論

一些研究表明,磁處理能在不同程度上對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進作用,如徐忠傳等發(fā)現(xiàn)合適的磁處理條件能夠促進菊花和烏藥不定芽的產(chǎn)生[4-5],閆道良等研究表明[6]合適的磁處理條件能夠促進濱梅不定芽的增殖,梁華等研究表明,磁處理能夠促進黃精根莖的增殖[3]。本試驗研究表明,合適的磁處理條件能夠促進菊花不定芽的產(chǎn)生,與上述研究結果一致。可溶性糖含量的高低與新陳代謝的快慢有密切的關系。梁華等研究表明,磁場處理后黃精組培苗的可溶性糖和蛋白質的含量都有增加的趨勢,只是增加的趨勢各不相同[3]。本試驗中,合適的磁處理條件能增加菊花組培苗可溶性糖的含量,與梁華的研究結果一致,表明合適的磁處理條件能促進菊花組培苗的新陳代謝。

磁場作為一種脅迫因子,對細胞膜會產(chǎn)生一定程度的損傷,導致相對電導率增加[9]。本試驗中,磁處理菊花組培苗后相對電導率均下降,原因可能是磁處理后經(jīng)過42d的培養(yǎng),細胞膜的損傷已經(jīng)恢復,而且細胞膜的穩(wěn)定性比對照組更好。磁處理可影響含有重要金屬的酶,從而改變這些酶的活性、結構和功能,進一步影響到這些酶所參與的一系列生理生化反應,使植物表現(xiàn)出磁效應[14]。許多研究表明,合適的磁處理能夠提高抗氧化酶活性,從而減緩脂質過氧化,延緩植物衰老、提高植物抗性等[1,3,9]。在本試驗中大部分磁處理組合抑制了抗氧化酶活性,與很多研究結果[1,3,9]相反。原因可能是磁處理后組培苗經(jīng)過42d的培養(yǎng),磁處理對抗氧化酶活性的影響已經(jīng)恢復,組培苗的生理狀態(tài)相對穩(wěn)定,各方面代謝調整到較好狀態(tài),因此植物體內的氧自由基含量較少且穩(wěn)定,自由基及其衍生物對植物體構不成傷害或傷害很小,此時保護酶活性較小[15]。

綜上所述,合適的磁處理條件對多種植物組培苗的生長有促進作用,在此基礎上,可進一步研究磁處理對組培苗抗性的影響。作為一種物理技術,磁處理具有綠色、環(huán)保、方便、廉價等特點,因此在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應用前景廣闊。然而合適的磁處理條件因植物種類、植物生理狀態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等因素的不同而不同,因此需要根據(jù)實際情況進行試驗。

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[13]王學奎.植物生理生化實驗原理和技術[M].2版.北京:高等教育出版社,2006.

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2.2磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量的影響

如圖2所示,磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量有影響。在16個磁處理組合中,有9個處理組合的可溶性糖含量比對照組高,其中B2處理組合比對照組高13%,而A1、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4處理組合比對照組增加幅度在5%以下,表明這些磁處理雖能在不同程度上促進菊花組培苗可溶性糖的合成,但多數(shù)情況下促進效果不明顯。因此,B2處理12mT/5h是最有利于菊花組培苗可溶性糖的合成。磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,可溶性糖含量的變化沒有明顯的規(guī)律;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,可溶性糖含量基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

2.3磁處理對菊花組培苗相對電導率的影響

如圖3所示,所有處理組的相對電導率均比對照組低,表明所有處理組的細胞膜透性均比對照組小,其中相對電導率比對照組低20%以上的磁處理組合有A2、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4、D2,其中最低為C4,達34%,即18mT/20h是最能保護細胞膜不受損害。當磁感應強度一定時,隨著磁處理時間的增加,相對電導率的變化沒有明顯的規(guī)律;當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,相對電導率基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢。

2.4磁處理對菊花組培苗抗氧化酶活性的影響

2.4.1磁處理對菊花組培苗CAT活性的影響如圖4所示,磁處理對菊花組培苗CAT活性有影響。在16個處理組合中有12個處理的CAT活性比對照組低,表明這些磁處理條件能抑制CAT活性,其中CAT活性比對照組低20%以上的組合有A1、A2、B2、C4、D1,最低為D1,達30%,即24mT/2.5h最能抑制CAT活性。磁處理對菊花組培苗CAT活性影響沒有明顯的規(guī)律。

2.4.2磁處理對菊花組培苗SOD活性的影響如圖5所示,磁處理對菊花組培苗SOD活性有影響。在16個處理組合中有15個處理組合的SOD活性比對照組低,表明這些磁處理條件抑制SOD活性,其中SOD活性比對照組低20%以上組合有B4、C3、C4、D2、D3,最低為C3,達30%,即18mT/10h是最能抑制SOD活性。磁感應強度介于6~12mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當磁感應強度介于18~24mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;然而當磁處理時間一定時,隨著磁感應強度的增加,SOD活性變化沒有明顯的規(guī)律。

2.4.3磁處理對菊花組培苗POD活性的影響如圖6所示,磁處理對菊花組培苗POD活性有影響。在16個處理組

合中有11個處理組合的POD活性均比對照組低,表明這些磁處理條件抑制POD活性,其中POD活性比對照組低20%以上的只有B1,即12mT/2.5h最能抑制POD活性。當磁感應強度介于6~24mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先減少后增加再減少的趨勢;當磁感應強度介于12~18mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢;當磁處理時間介于2.5~10h時,隨著磁感應強度的增加,POD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;當磁處理時間介于5~20h時,隨著磁感應強度的增加,POD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

3討論

一些研究表明,磁處理能在不同程度上對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進作用,如徐忠傳等發(fā)現(xiàn)合適的磁處理條件能夠促進菊花和烏藥不定芽的產(chǎn)生[4-5],閆道良等研究表明[6]合適的磁處理條件能夠促進濱梅不定芽的增殖,梁華等研究表明,磁處理能夠促進黃精根莖的增殖[3]。本試驗研究表明,合適的磁處理條件能夠促進菊花不定芽的產(chǎn)生,與上述研究結果一致。可溶性糖含量的高低與新陳代謝的快慢有密切的關系。梁華等研究表明,磁場處理后黃精組培苗的可溶性糖和蛋白質的含量都有增加的趨勢,只是增加的趨勢各不相同[3]。本試驗中,合適的磁處理條件能增加菊花組培苗可溶性糖的含量,與梁華的研究結果一致,表明合適的磁處理條件能促進菊花組培苗的新陳代謝。

磁場作為一種脅迫因子,對細胞膜會產(chǎn)生一定程度的損傷,導致相對電導率增加[9]。本試驗中,磁處理菊花組培苗后相對電導率均下降,原因可能是磁處理后經(jīng)過42d的培養(yǎng),細胞膜的損傷已經(jīng)恢復,而且細胞膜的穩(wěn)定性比對照組更好。磁處理可影響含有重要金屬的酶,從而改變這些酶的活性、結構和功能,進一步影響到這些酶所參與的一系列生理生化反應,使植物表現(xiàn)出磁效應[14]。許多研究表明,合適的磁處理能夠提高抗氧化酶活性,從而減緩脂質過氧化,延緩植物衰老、提高植物抗性等[1,3,9]。在本試驗中大部分磁處理組合抑制了抗氧化酶活性,與很多研究結果[1,3,9]相反。原因可能是磁處理后組培苗經(jīng)過42d的培養(yǎng),磁處理對抗氧化酶活性的影響已經(jīng)恢復,組培苗的生理狀態(tài)相對穩(wěn)定,各方面代謝調整到較好狀態(tài),因此植物體內的氧自由基含量較少且穩(wěn)定,自由基及其衍生物對植物體構不成傷害或傷害很小,此時保護酶活性較小[15]。

綜上所述,合適的磁處理條件對多種植物組培苗的生長有促進作用,在此基礎上,可進一步研究磁處理對組培苗抗性的影響。作為一種物理技術,磁處理具有綠色、環(huán)保、方便、廉價等特點,因此在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應用前景廣闊。然而合適的磁處理條件因植物種類、植物生理狀態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等因素的不同而不同,因此需要根據(jù)實際情況進行試驗。

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