血漿Lp-PLA2及YKL-40濃度與冠狀動脈病變程度的相關性分析

侯衛濤，高東來，彭躍華，周 俐

血漿Lp-PLA2及YKL-40濃度與冠狀動脈病變程度的相關性分析

侯衛濤1，高東來2，彭躍華1，周 俐1

目的 探討血漿脂蛋白相關磷脂酶A2(LP-PLA2)及幾丁質酶-3樣蛋白-1(YKL-40)濃度與冠狀動脈病變嚴重程度的相關性。方法 選取2010年12月—2014年6月因胸痛在焦作煤業集團中央醫院及山西醫科大學第二醫院心內科住院并接受冠狀動脈造影術(CAG)患者230例。將CAG顯示為非冠心病者設為對照組共76例，穩定型心絞痛組68例，急性冠脈綜合征組86例。采用Gensini評分系統評定冠脈病變程度，同時測定3組患者LP-PLA2及血清YKL-40濃度變化，評估冠脈病變嚴重程度與血漿LP-PLA2及YKL-40水平的相關性。結果 穩定型心絞痛組、急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于非冠心病組(P<0.05)，急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于穩定型心絞痛組，差異有統計學意義(P<0.05)。將病變支數相同的患者合并，結果顯示：隨著病變支數增加，LP-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統計學意義(P<0.05)；隨著Gensini積分增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 LP-PLA2及YKL-40的水平與冠脈病變嚴重程度及斑塊不穩定性相關，可以作為預測冠心病危險程度的重要指標。

冠狀動脈病變程度；脂蛋白相關磷脂酶A2；幾丁質酶-3樣蛋白-1

冠心病是當今嚴重危害人類健康、影響人們生活質量的最常見心血管疾病之一。目前許多的證據表明[1]，局部和全身的炎癥在冠心病動脈硬化及其并發癥的發生和發展中起重要作用。脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)及幾丁質酶-3樣蛋白-1(YKL-40)作為新近研究的炎癥介質，具有促進動脈粥樣硬化的作用，與心血管事件的發生有密切相關，可能成為冠心病發病的獨立危險因素。因而控制血漿Lp-PLA2及YKL-40活性及含量可能成為冠心病治療的潛在目標靶點。本研究入選不同類型冠心病及對照組的患者，對其進行選擇性冠狀動脈造影(CAG)，測定不同組別之間血漿中Lp-PLA2及YKL-40的水平，以探討Lp-PLA2及YKL-40與冠狀動脈病變嚴重程度的關系。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2010年12月—2014年6月因胸痛在焦作煤業集團中央醫院及山西醫科大學第二醫院心內科住院并接受冠狀動脈造影術患者230例，其中男129例，女101例，年齡36歲～82歲(60.1歲±10.3歲)。將造影顯示為非冠心病者設為對照組共76例，穩定型心絞痛組68例，急性冠脈綜合征組86例。所有患者均詳細詢問病史、體格檢查、行相關化驗、檢查等。CAG術前均測定血清Lp-PLA2、YKL-40。本研究經焦作煤業集團中央醫院及山西醫科大學第二醫院倫理委員會批準，入選患者均簽署知情同意書。

1.2 排除標準 血液系統疾病，急慢性感染性疾病，甲狀腺疾病，急慢性肝腎功能不全，自身免疫性疾病，惡性腫瘤及心功能不全、心臟瓣膜病等。

1.3 方法

1.3.1 Lp-PLA2水平測定 冠狀動脈造影當天清晨空腹采集肘靜脈血5 mL，肝素抗凝，靜置后以2 500 r/min離心10 min，取上層血漿置于-80 ℃冰凍保存待測。在1個月內測定各項指標。測定當日于37 ℃水浴中迅速復融。所有樣本一次性成批檢測，試劑盒由南京諾爾曼公司提供。操作過程嚴格按照說明書要求。

1.3.2 YKL-40水平測定 冠狀動脈造影當天清晨空腹采集肘靜脈血5 mL，室溫靜置30 min，離心分離血清，并置于-80 ℃冰箱保存，所有樣本一次性成批檢測。YKL-40測定采用酶聯免疫吸附測試法(ELISA)，試劑盒由上海基爾頓生物科技有限公司提供。操作過程嚴格按照說明書要求。

1.3.3 冠狀動脈造影及冠狀動脈狹窄程度的評價 所有入選對象均采用Judkins法進行選擇性冠狀動脈造

影，多角度、多體位投照。由2名經驗豐富的醫生共同判讀造影結果。參照1984年美國心臟病學會/美國心臟病協會(ACC/AHA)冠狀動脈造影指南和Gensini積分評估系統，采用兩種方式評估，①冠脈病變支數：當病變管腔狹窄≥50%時為冠心病，累及左前降支、左回旋支、右冠脈各記為1支，累及左主干記為2支。②Gensini積分法：將冠脈分段，根據病變血管的不同節段和血管病變不同程度制定不同的權重系數，評分方法為冠脈狹窄程度權重系數乘以各病變血管的權重系數，最后評分為各分支評分之和。

2 結 果

2.1 3組患者一般資料比較(見表1) 3組在年齡、吸煙、飲酒、血脂、體重指數、糖尿病發病率方面差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 3組患者一般資料對比情況

2.2 Lp-PLA2及YKL-40水平與冠脈病變支數關系 穩定型心絞痛組、急性冠脈綜合征組的Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于非冠心病組(P<0.05)，急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于穩定型心絞痛組(P<0.05)。將病變支數相同的3組患者合并后結果顯示：隨著病變支數增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統計學意義(P<0.05)。Lp-PLA2及YKL-40水平與冠脈狹窄程度評估：隨著Gensini積分增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差異有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 LP-PLA2及YKL-40濃度與冠脈病變支數的關系(±s)

2.3 冠心病危險因素Logistic回歸分析 以冠心病(無=0，有=1)為應變量，以性別、年齡、高血壓(無=0，有=1)、糖尿病(無=0，有=1)、抽煙(無=0，有=1)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白(a)[LP(a)]、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、Lp-PLA2為自變量，進行Logistic回歸分析，結果顯示：Lp-PLA2、YKL-40、吸煙與LDL-C與冠心病獨立相關；性別、TC等其他指標與冠心病無明顯相關。詳見表3。

表3 冠脈病變嚴重程度的Logistic逐步回歸分析結果

2.3 冠狀動脈積分(Gensini積分)危險因素的多元逐步回歸分析 以Gensini積分為應變量，以年齡、吸煙、體重指數、TC、TG、HDL-C、LDL-C、血漿Lp-PLA2及YKL-40為自變量進行多元逐步回歸分析，采用逐步篩選法引入方程，最終保留在方程中的變量為LDL-C、Lp-PLA2、YKL-40上述3個變量與Gensini積分獨立相關。詳見表4。

表4 冠心病患者Gensini積分危險因素的多元逐步回歸分析

3 討 論

動脈粥樣硬化是冠心病形成和進展的基礎，炎癥反應尤其是血管內的炎癥反應參與了動脈粥樣硬化的發生、發展和斑塊的破裂以及繼發的心血管事件過程。但是現有的檢測手段不能快速有效地檢測血管內的炎癥反應情況，從而在早期評估發生心血管事件的風險，以便于盡早干預，減少惡性心血管事件的發生。因此，發現能對心血管事件預測的靈敏炎癥標記物成為目前研究的重點。而Lp-PLA2及YKL-40是近年來發現的新型炎癥標志物，國外諸多研究顯示，Lp-PLA2及YKL-40獨立于傳統危險因子及炎癥標志物，可以動態反映血管內的炎癥反應，從而用于預測冠心病患者遠期發生心血管事件的風險[2]。

Fan等[3]及Eva Motyková等[4]研究顯示，Lp-PLA2及YKL-40由局部活化的巨噬細胞和中性粒細胞在炎性環境下分泌、釋放，因此Lp-PLA2及YKL-40多存在于巨噬細胞高聚集區，特別是在病灶深處。因此，較之全身炎癥標志物C反應蛋白等，局部分泌的Lp-PLA2及YKL-40更具特異性。研究顯示[5]，巨噬細胞在薄纖維粥樣斑塊帽和破裂斑塊中更顯著，提示Lp-PLA2及YKL-40在易損斑塊和破裂斑塊的壞死核心區及周圍巨噬細胞中存在強表達，推測Lp-PLA2及YKL-40有潛在的促進斑塊不穩定的作用。動脈粥樣硬化研究顯示，Lp-PLA2及YKL-40是炎癥組織局部巨噬細胞激活的特異性血清學指標[6]。

本研究結果顯示，穩定型心絞痛組、急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于非冠心病組，急性冠脈綜合征組Lp-PLA2及YKL-40水平明顯高于穩定型心絞痛組，且隨著冠脈積分的增加及冠脈病變血管數目的增多，血中Lp-PLA2及YKL-40濃度明顯增加，多因素分析表明，冠心病及冠脈積分與吸煙、LDL-C、Lp-PLA2及YKL-40獨立相關。說明Lp-PLA2及YKL-40活性不僅與冠脈病變的穩定性有關，且與冠脈病變嚴重程度明顯相關。因此，Lp-PLA2及YKL-40不只是冠心病急性階段的炎性標志物，而且直接參與了致動脈粥樣硬化作用。這與Predersen等[7]的研究相一致。

Lp-PLA2及YKL-40促進粥樣斑塊形成及加速斑塊不穩定可能機制：吸煙、糖尿病、高血脂、血壓變異性大等因素可促使巨噬細胞和淋巴細胞合成并分泌Lp-PLA2及YKL-40，Lp-PLA2及YKL-40產生增加和活性增高后，誘導產生、活化炎癥介質，活化的炎性介質促進單核細胞從管腔衍化為巨噬細胞，巨噬細胞吞噬氧化型低密度脂蛋白變成脂質泡沫細胞，泡沫細胞增多誘導或加劇炎性反應，導致產生更多Lp-PLA2及YKL-40，Lp-PLA2及YKL-40表達上調，使局部炎性反應加強，從而加重內皮的損傷，受損的內皮細胞保護性機制破壞，為進一步加強局部炎癥反應及促進新斑塊形成創造了條件；活化的炎性介質可直接刺激Lp-PLA2及YKL-40表達上調，使血管內皮細胞重塑、增殖，促進血管平滑肌的增生和向內膜遷移，促進形成新生小血管，導致血管壁粥樣斑塊不穩定且進展迅速，進而誘發心血管事件發生；同時Lp-PLA2及YKL-40介導的細胞因子可引起斑塊表達基質金屬蛋白酶，基質金屬蛋白酶降解纖維帽的平滑肌細胞和膠原基質，使纖維帽變薄，斑塊變得脆弱，導致斑塊在血流沖刷下破裂，誘發心血管事件。總之，Lp-PLA2及YKL-40之間相互聯系、相互促進，形成了一個由Lp-PLA2介導、YKL-40參與放大的炎癥信號傳導通路，形成促炎物質的持續正調節，從而促進了粥樣斑塊的進展及不穩定型增加，導致斑塊破裂、血栓形成和不良心血管事件的發生。

本研究結果顯示，Lp-PLA2及YKL-40活性不僅與斑塊穩定性有關，并且也與冠心病的嚴重程度相關。Winkler等研究也顯示，Lp-PLA2及YKL-40活性和冠心病的嚴重程度有相關性，且Lp-PLA2及YKL-40活性升高對冠心病危險的預示獨立與其他確定的危險因素之外，尤其獨立于LDL-C，是冠心病新的獨立危險因子[8]。因此檢測血漿中Lp-PLA2及YKL-40水平不僅可以用來識別高危個體，也可以預測冠心病發生的風險。

綜上所述，Lp-PLA2及YKL-40水平在冠心病患者冠脈斑塊的發生、發展中起重要作用，與冠心病密切相關。但因本試驗樣本數量較少，因此，需要更大的樣本量來深入研究兩者與冠心病的關系。Lp-PLA2及YKL-40將為冠心病的預防及治療開辟新的途徑。

[1] 任麗玨，王云枝.脂蛋白相關磷脂酶A2和YKL-40在2型糖尿病及其大血管病變發病中的意義[J].醫學綜述，2014，20(11)：2023-2025.

[2] Abulajiang M，Boulanger M，Husseini DE，et al．Increased expression of LP-PLA2in aortic stenosis is associated with mineralization and tissue remodelling[J].Canadian Journal of Cardiology，2013，29(10)：s270.

[3] Fan JT，Si XH，Liao Y，et al.The diagnostic and prognostic value of serum YKL-40 in endometrial cancer[J].Arch Gynecol Obstet，2013，287(1)：111-115.

[4] Eva Motyková，Luk? Zlatohlávek，Martina Prusíková，et al．LP-PLA2：a new marker of cardiovascular risk[J].European Journal of Internal Medicine，2011，22(1)：S100

[5] Hyun MK，Chang HJ，Bong SC，et al．Association between coronary heart disease and inflammatory biomarker YKL-40 in type 2 diabetes subjects[J].Journal of Cardiac Failure，2012，18(8)：s16-s17.

[6] Du YM，Wei FT，Dong ZQ，et al．Prognostic value of serum LP-PLA2and hs-CRP in unstable atherosclerotic plaques[J].Clinical and Experimental Hypertension，2011，33(2)：113-116.

[7] Pedersen MW，Koenig W，Christensen JH，et al．The effect of marine n-3 fatty acids in different doses on plasma concentrations of Lp-PLA2in healthy adults[J].European Journal of Nutrition，2009，48(1)：1-5.

[8] Juan PC，Ewa Ninio，Andrie Panayiotou，et al．PLA2G7 genotype，lipoprotein- associated phospholipase A2 activity，and coronary heart disease risk in 10 494 cases and 15 624 controls of European ancestry[J].Circulation，2012，121(21)：2284-2293.

(本文編輯 郭懷印)

1.焦作煤業集團中央醫院(河南焦作 454000)；2.山西醫科大學第二醫院

高東來，E-mail：houwthappy@126.com

R541.4 R256.2

B

10．3969/j．issn．1672-1349．2015．16．019

1672-1349(2015)16-1869-04

2015-03-02)