野木瓜提取液清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成研究

崔霖蕓

摘要：以乙醇、去離子水為提取劑，采用分光光度法和紫外光解法測定不同量的野木瓜（Stauntonia chinensis）醇提物和水提物對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺的阻斷作用。結果表明，加入4.0 mL提取液（相當于從0.8 g的野木瓜粉中提取的量），醇提物和水提物對亞硝酸鹽的清除率分別為86.84%和75.88%，對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%和87.50%，說明野木瓜有良好的抗癌作用，且其醇提物優于水提物。

關鍵詞：野木瓜（Stauntonia chinensis）；亞硝酸鈉；清除；亞硝胺；阻斷

中圖分類號：R730.1 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2014）22-5504-03

N-亞硝基化合物是一類強烈的化學致癌物質，它們能誘發許多動物的多種器官組織惡性腫瘤[1]，它主要是通過誘發DNA互補堿基對之間的交聯而啟動細胞的癌變[2]，至今尚未發現一種動物對N-亞硝基化合物的致癌作用有抵抗力[3]。正常情況下人們直接從食物中攝入的亞硝胺的量微乎其微，但其前身仲胺和亞硝酸鹽卻廣泛存在于食物和水體中。仲胺廣泛存在于魚類、谷類、茶、煙葉等食品飲品中，食物烹調和體內代謝也可能產生仲胺，而亞硝酸鹽則更廣泛地存在于土壤、水體和食物中[1]，亞硝胺很容易由仲胺和亞硝酸鹽反應合成[1]，在人體胃液的環境下尤為容易。因此，清除亞硝酸鹽或阻斷亞硝胺的合成，是防癌抗癌的有效途徑。眾多學者研究證實黃酮類化合物對清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成有顯著作用[4-6]，另外，酚類、還原糖和多糖類、維生素類、氧化還原酶類等物質也有一定的清除和阻斷作用[7]。

野木瓜（Stauntonia chinensis）是木通科野木瓜屬植物。貴州省正安縣于1996被國務院發展研究中心等單位命名為“中國野木瓜之鄉”，其盛產的野木瓜以果大、 皮薄、 肉細、 氣香、 味甘酸等特點著稱[8]。中醫典籍記載其莖葉微苦，其果味甘、平，歸心、腎經[9]，具有舒筋活絡、解渴生津、平肝和胃、祛風止痛等功效?，F代研究表明，野木瓜中含有豐富的皂苷，主要包括去甲五環三萜皂苷類化合物和木脂素苷類化合物，還含有黃酮苷類化合物、酚性成分、糖類化合物[10]，此外，野木瓜果實中含有豐富的有機酸、果膠、胡蘿卜素、黃酮類、氨基酸、多種維生素和多種礦物質等[11]，這些物質對清除亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺合成均有一定的作用。國內外對野木瓜的鎮痛抗炎、放射增敏及肝保護等方面的研究較多[12，13]，但對野木瓜提取物清除亞硝酸鹽和阻斷亞硝胺合成能力的研究卻很少。顯然，在人們日益關注自身保健的今天，若能發現野木瓜有清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的功效，將對開發其在保健、防癌抗癌方面的新用途具有積極的意義。本試驗在體外模擬人體胃液的條件下，研究野木瓜對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成的阻斷作用，以期為野木瓜資源的進一步開發利用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料與試劑 野木瓜，購自貴州正安縣。試劑：石油醚、無水乙醇、碳酸鈉、33%（質量分數）二甲胺均為化學純，α-萘胺、亞硝酸鈉、對氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽均為分析純，pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液（配置方法見文獻[14]），試驗用水均為去離子水。

1.1.2 儀器 752N型紫外可見分光光度計（上海儀電分析儀器有限公司），SHZ-DⅢ型予華牌循環水真空泵（鞏義市予華儀器有限責任公司），BSA223型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司），RE-52A型旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠），ZF-20D型暗箱式紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠），DK-S26 型恒溫水浴鍋（上海森信實驗儀器有限公司），PHS-2F型精密酸度計（上海雷磁儀器廠）。

1.2 方法

1.2.1 樣品預處理 將野木瓜鮮果洗凈→去子囊切成2～5 mm薄片→50 ℃烘干→粉碎后過40目篩→石油醚脫色回流至石油醚無色→抽濾，濾渣風干。

1）準確稱取處理后的野木瓜粉5 g，置于250 mL圓底燒瓶中，加入83%乙醇151 mL，在70 ℃回流浸提2 h，抽濾，濾液在60 ℃減壓濃縮，最后定容至25 mL，得野木瓜醇提物。

2）準確稱取處理后的野木瓜粉5 g，置于250 mL圓底燒瓶中，加入去離子水151 mL，在70 ℃回流浸提2 h，抽濾，濾液在60 ℃減壓濃縮，最后定容至25 mL，得野木瓜水提物。

1.2.2 對亞硝酸鹽清除率的測定[15，16] 亞硝酸鹽在弱酸性條件下，與對氨基苯磺酸重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色絡合物，用分光光度計測出該化合物的吸光度，就可知道反應液中亞硝酸鹽含量多少。根據這一原理比較不同試驗條件下亞硝酸鹽含量的多少來反映不同濃度野木瓜提取液清除亞硝酸鹽能力的大小，亞硝酸鹽含量少，野木瓜提取液清除能力就強，反之則弱。

準確吸取pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL于20 mL容量瓶中，分別加入“1.2.1”所得的野木瓜醇提物和水提物樣液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL。再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL，用去離子水定容至刻度，37 ℃恒溫反應1 h取出，分別吸取反應液1 mL置于10 mL容量瓶中，加入0.4%的對氨基苯磺酸2 mL，搖勻，靜置5 min，然后加入0.2%鹽酸萘乙二胺2 mL。搖勻，靜置15 min，在540 nm處測定吸光度，平行做3次求平均值。

清除率=（A0-Ax）/A0×100%

式中，A0為未加提取液（即加入0 mL提取液）時的吸光度；Ax為加入不同量提取液的吸光度。

1.2.3 對亞硝胺合成阻斷率的測定[14] 在體外模擬人體胃液的條件下（pH 3.0，溫度為37 ℃），二甲胺很容易與亞硝酸鈉反應，合成二甲基亞硝胺，其化學反應方程式為：

HCl

（CH3）2NH+NaNO2→（CH3）2N·N0+NaCl+H2O

當往野木瓜醇提物和水提物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時，提取物優先同亞硝酸鈉作用，從而達到阻止亞硝胺生成的目的。據此可以通過比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來反映提取物阻斷能力的強弱，生成亞硝胺量少，提取液的阻斷能力就強，反之則弱[14]。

基于N-亞硝基化合物的光化學反應，在紫外光照射下，亞硝胺光解并轉變成相應的仲胺和亞硝酸根，基反應式為：

紫外光

H2O+（CH3）2N·NO→（CH3）2NH2++NO2-

測定NO2-的含量（方法見“1.2.2”）即可知二甲基亞硝胺的含量，從而即可測出提取液對亞硝胺合成的阻斷率。具體方法為：準確吸取“1.2.1”所得野木瓜醇提取物和水提物樣液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL于20 mL容量瓶中，分別加入pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL，再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL， 加入1 mmol/L的二甲胺溶液1 mL， 用去離子水定容，37 ℃恒溫反應1 h。準確吸取1 mL上述溶液到7 cm2培養皿中，加入0.5% Na2CO3溶液0.5 mL，在紫外分析儀上照射15 min（紫外燈距液面15 cm）。取出加入1%的對氨基苯磺酸和0.1%α-萘胺各1.5 mL，加入去離子水0.5 mL，混勻，靜置15 min，在525 nm處測定吸光度，平行做3次求平均值。計算公式為：

阻斷率=（A0-Ax）/A0×100%

式中，A0為未加提取液（即加入0 mL提取液）時的吸光度；Ax為加入不同量提取液的吸光度

2 結果與分析

2.1 野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用

野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用見圖1。從圖1可以看出，在體外模擬人體胃液的條件下，當加入提取液的量較少時，野木瓜提取液（醇提物和水提物）對亞硝酸鹽的清除作用均較小，并隨著提取液量的增加而緩慢增加，醇提物的清除作用略高于水提物，原因可能是盡管醇提物中黃酮含量高于水提物，但由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸，這些物質對亞硝酸鹽具有一定的清除作用，所以使二者的差距不大。當加入提取液的量由1.0 mL增加到2.0 mL時，對亞硝酸鹽的清除作用迅速增加，超過2.0 mL后，增長放緩，醇提物對亞硝酸鹽的清除作用明顯高于水提物，并且差距越來越大，這可能是醇提物中含有更多的黃酮類化合物，對亞硝酸鹽的清除作用更突顯出來。當加入提取液4.0 mL，醇提物對亞硝酸鹽的清除率可以達到86.84%（水提物為75.88%），說明野木瓜對亞硝酸鹽有較好的清除作用。

2.2 野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用

野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用見圖2。由圖2可知，在體外模擬人體胃液的條件下，隨著野木瓜提取液量的增加，對亞硝胺合成的阻斷能力迅速提高，在0.5～1.0 mL時，野木瓜醇提物對亞硝胺的阻斷率略低于水提物，可能是由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸的原因。當加入提取液量超過1.0 mL后，醇提物對亞硝胺合成的阻斷作用迅速增長，快于水提物，并慢慢超過水提物，這可能是由于醇提物中含有較多的黃酮類化合物，其對亞硝胺合成的阻斷作用逐漸突顯出來。當加入提取液量超過1.5 mL后，水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的增加逐漸放緩，而醇提物在超過1.5 mL后仍快速增加，直到2.0 mL后才放緩，并使其阻斷率顯著高于水提物。在加入提取液量超過3.0 mL時醇提物和水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的變化均趨于平緩。當加入提取液量4.0 mL（相當于0.8 g野木瓜粉的提取液）時，醇提物對亞硝胺合成的阻斷率可達92.91%（水提物也可達87.50%），說明野木瓜對亞硝胺合成有很好的阻斷作用。

3 結論

研究結果表明，在體外模擬人體胃液的條件下（pH 3.0，溫度為37 ℃），用0.8 g野木瓜粉的乙醇提取液對亞硝酸鹽的清除率可達86.84%，而水提取液為75.88%，乙醇提取液對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%，而水提取液為87.50%，說明野木瓜提取液對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成阻斷均有明顯的作用，其中，醇提物對亞硝酸鹽的清除及對亞硝胺合成阻斷作用均高于水提物。因此，野木瓜的抗癌開發利用前景可觀，它可能成為一種經濟有效的天然抗癌生物資源和抗癌保健食品或飲品。

參考文獻：

[1] 胡榮梅.N-亞硝基化合物分析方法[M].北京：科學出版社，1980.

[2] 戴乾圜，逯 萍，彭少華.黃曲霉素和N-亞硝基化合物借誘發DNA互補堿對交聯而啟動癌變[J].自然科學進展，2003，13（7）：693-697.

[3] 曾瑤池，胡敏予.食物中N-亞硝基化合物與腫瘤關系的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志，2008，1（2）：151-155.

[4] 張慶樂，王 浩，李 靜，等.黃酮類化合物在阻斷亞硝胺合成中的應用[J].食品科技，2008（8）：165-167.

[5] 閆向陽，劉建平，夏季紅，等.甘草黃酮提取條件的優化及抑制亞硝化反應的研究[J].河南工業大學學報（自然科學版），2007，28（2）：35-37，50.

[6] 楊轉琴，王 磊，范 娜，等.柚皮黃酮化合物含量及抗氧活性的研究[J].食品科學，2006，27（4）：102-105.

[7] 陳 忻，劉愛文，陳純馨，等.殼聚糖及其衍生物對亞硝化反應的抑制作用[J].精細化工，2005（3）：209-211.

[8] 王文平，郭祀遠，李 琳，等.野木瓜多糖中糖醛酸含量測定[J].食品科技，2007（10）：84-86.

[9] 苗明三.法定中藥藥理與臨床[M].北京：世界圖書出版公司， 1998.

[10] 陳 瑛，李 錦，吳英良.野木瓜化學成分及其藥理和臨床研究進展[J].沈陽藥科大學學報，2008，25（11）：924-928.

[11] 張 毅，王少敏.木瓜高效栽培與利用[M].北京：中國農業出版社，2003.

[12] 陳國棟，楊 磊，陳少丹，等.野木瓜屬植物化學成分和生物活性研究概況[J].中藥材，2008（2）：309-315.

[13] 龐戰軍.自由基醫學研究方法[M].北京：人民衛生出版社，2000.

[14] 袁毅樺，陳 忻，陳純馨，等.柚皮提取物對亞硝化反應抑制作用研究[J].化學世界，2004（1）：26-28，34.

[15] 張 虹，許 鋼，袁建耀.劉寄奴提取液對亞硝化反應的抑制作用[J].鄭州糧食學院學報，2000（1）：50-53.

[16] 謝祥茂，丁小雯，陳俊琴.金櫻子提取液對NO2-清除作用的體外試驗研究[J].食品科學，2001，22（1）：31.

（責任編輯 龍小玲）

HCl

（CH3）2NH+NaNO2→（CH3）2N·N0+NaCl+H2O

當往野木瓜醇提物和水提物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時，提取物優先同亞硝酸鈉作用，從而達到阻止亞硝胺生成的目的。據此可以通過比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來反映提取物阻斷能力的強弱，生成亞硝胺量少，提取液的阻斷能力就強，反之則弱[14]。

基于N-亞硝基化合物的光化學反應，在紫外光照射下，亞硝胺光解并轉變成相應的仲胺和亞硝酸根，基反應式為：

紫外光

H2O+（CH3）2N·NO→（CH3）2NH2++NO2-

測定NO2-的含量（方法見“1.2.2”）即可知二甲基亞硝胺的含量，從而即可測出提取液對亞硝胺合成的阻斷率。具體方法為：準確吸取“1.2.1”所得野木瓜醇提取物和水提物樣液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL于20 mL容量瓶中，分別加入pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL，再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL， 加入1 mmol/L的二甲胺溶液1 mL， 用去離子水定容，37 ℃恒溫反應1 h。準確吸取1 mL上述溶液到7 cm2培養皿中，加入0.5% Na2CO3溶液0.5 mL，在紫外分析儀上照射15 min（紫外燈距液面15 cm）。取出加入1%的對氨基苯磺酸和0.1%α-萘胺各1.5 mL，加入去離子水0.5 mL，混勻，靜置15 min，在525 nm處測定吸光度，平行做3次求平均值。計算公式為：

阻斷率=（A0-Ax）/A0×100%

式中，A0為未加提取液（即加入0 mL提取液）時的吸光度；Ax為加入不同量提取液的吸光度

2 結果與分析

2.1 野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用

野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用見圖1。從圖1可以看出，在體外模擬人體胃液的條件下，當加入提取液的量較少時，野木瓜提取液（醇提物和水提物）對亞硝酸鹽的清除作用均較小，并隨著提取液量的增加而緩慢增加，醇提物的清除作用略高于水提物，原因可能是盡管醇提物中黃酮含量高于水提物，但由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸，這些物質對亞硝酸鹽具有一定的清除作用，所以使二者的差距不大。當加入提取液的量由1.0 mL增加到2.0 mL時，對亞硝酸鹽的清除作用迅速增加，超過2.0 mL后，增長放緩，醇提物對亞硝酸鹽的清除作用明顯高于水提物，并且差距越來越大，這可能是醇提物中含有更多的黃酮類化合物，對亞硝酸鹽的清除作用更突顯出來。當加入提取液4.0 mL，醇提物對亞硝酸鹽的清除率可以達到86.84%（水提物為75.88%），說明野木瓜對亞硝酸鹽有較好的清除作用。

2.2 野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用

野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用見圖2。由圖2可知，在體外模擬人體胃液的條件下，隨著野木瓜提取液量的增加，對亞硝胺合成的阻斷能力迅速提高，在0.5～1.0 mL時，野木瓜醇提物對亞硝胺的阻斷率略低于水提物，可能是由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸的原因。當加入提取液量超過1.0 mL后，醇提物對亞硝胺合成的阻斷作用迅速增長，快于水提物，并慢慢超過水提物，這可能是由于醇提物中含有較多的黃酮類化合物，其對亞硝胺合成的阻斷作用逐漸突顯出來。當加入提取液量超過1.5 mL后，水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的增加逐漸放緩，而醇提物在超過1.5 mL后仍快速增加，直到2.0 mL后才放緩，并使其阻斷率顯著高于水提物。在加入提取液量超過3.0 mL時醇提物和水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的變化均趨于平緩。當加入提取液量4.0 mL（相當于0.8 g野木瓜粉的提取液）時，醇提物對亞硝胺合成的阻斷率可達92.91%（水提物也可達87.50%），說明野木瓜對亞硝胺合成有很好的阻斷作用。

3 結論

研究結果表明，在體外模擬人體胃液的條件下（pH 3.0，溫度為37 ℃），用0.8 g野木瓜粉的乙醇提取液對亞硝酸鹽的清除率可達86.84%，而水提取液為75.88%，乙醇提取液對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%，而水提取液為87.50%，說明野木瓜提取液對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成阻斷均有明顯的作用，其中，醇提物對亞硝酸鹽的清除及對亞硝胺合成阻斷作用均高于水提物。因此，野木瓜的抗癌開發利用前景可觀，它可能成為一種經濟有效的天然抗癌生物資源和抗癌保健食品或飲品。

參考文獻：

[1] 胡榮梅.N-亞硝基化合物分析方法[M].北京：科學出版社，1980.

[2] 戴乾圜，逯 萍，彭少華.黃曲霉素和N-亞硝基化合物借誘發DNA互補堿對交聯而啟動癌變[J].自然科學進展，2003，13（7）：693-697.

[3] 曾瑤池，胡敏予.食物中N-亞硝基化合物與腫瘤關系的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志，2008，1（2）：151-155.

[4] 張慶樂，王 浩，李 靜，等.黃酮類化合物在阻斷亞硝胺合成中的應用[J].食品科技，2008（8）：165-167.

[5] 閆向陽，劉建平，夏季紅，等.甘草黃酮提取條件的優化及抑制亞硝化反應的研究[J].河南工業大學學報（自然科學版），2007，28（2）：35-37，50.

[6] 楊轉琴，王 磊，范 娜，等.柚皮黃酮化合物含量及抗氧活性的研究[J].食品科學，2006，27（4）：102-105.

[7] 陳 忻，劉愛文，陳純馨，等.殼聚糖及其衍生物對亞硝化反應的抑制作用[J].精細化工，2005（3）：209-211.

[8] 王文平，郭祀遠，李 琳，等.野木瓜多糖中糖醛酸含量測定[J].食品科技，2007（10）：84-86.

[9] 苗明三.法定中藥藥理與臨床[M].北京：世界圖書出版公司， 1998.

[10] 陳 瑛，李 錦，吳英良.野木瓜化學成分及其藥理和臨床研究進展[J].沈陽藥科大學學報，2008，25（11）：924-928.

[11] 張 毅，王少敏.木瓜高效栽培與利用[M].北京：中國農業出版社，2003.

[12] 陳國棟，楊 磊，陳少丹，等.野木瓜屬植物化學成分和生物活性研究概況[J].中藥材，2008（2）：309-315.

[13] 龐戰軍.自由基醫學研究方法[M].北京：人民衛生出版社，2000.

[14] 袁毅樺，陳 忻，陳純馨，等.柚皮提取物對亞硝化反應抑制作用研究[J].化學世界，2004（1）：26-28，34.

[15] 張 虹，許 鋼，袁建耀.劉寄奴提取液對亞硝化反應的抑制作用[J].鄭州糧食學院學報，2000（1）：50-53.

[16] 謝祥茂，丁小雯，陳俊琴.金櫻子提取液對NO2-清除作用的體外試驗研究[J].食品科學，2001，22（1）：31.

（責任編輯 龍小玲）

HCl

（CH3）2NH+NaNO2→（CH3）2N·N0+NaCl+H2O

當往野木瓜醇提物和水提物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時，提取物優先同亞硝酸鈉作用，從而達到阻止亞硝胺生成的目的。據此可以通過比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來反映提取物阻斷能力的強弱，生成亞硝胺量少，提取液的阻斷能力就強，反之則弱[14]。

基于N-亞硝基化合物的光化學反應，在紫外光照射下，亞硝胺光解并轉變成相應的仲胺和亞硝酸根，基反應式為：

紫外光

H2O+（CH3）2N·NO→（CH3）2NH2++NO2-

測定NO2-的含量（方法見“1.2.2”）即可知二甲基亞硝胺的含量，從而即可測出提取液對亞硝胺合成的阻斷率。具體方法為：準確吸取“1.2.1”所得野木瓜醇提取物和水提物樣液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mL于20 mL容量瓶中，分別加入pH 3.0的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液10 mL，再加入0.1 g/L的亞硝酸鈉溶液2 mL， 加入1 mmol/L的二甲胺溶液1 mL， 用去離子水定容，37 ℃恒溫反應1 h。準確吸取1 mL上述溶液到7 cm2培養皿中，加入0.5% Na2CO3溶液0.5 mL，在紫外分析儀上照射15 min（紫外燈距液面15 cm）。取出加入1%的對氨基苯磺酸和0.1%α-萘胺各1.5 mL，加入去離子水0.5 mL，混勻，靜置15 min，在525 nm處測定吸光度，平行做3次求平均值。計算公式為：

阻斷率=（A0-Ax）/A0×100%

式中，A0為未加提取液（即加入0 mL提取液）時的吸光度；Ax為加入不同量提取液的吸光度

2 結果與分析

2.1 野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用

野木瓜提取液對亞硝酸鹽清除作用見圖1。從圖1可以看出，在體外模擬人體胃液的條件下，當加入提取液的量較少時，野木瓜提取液（醇提物和水提物）對亞硝酸鹽的清除作用均較小，并隨著提取液量的增加而緩慢增加，醇提物的清除作用略高于水提物，原因可能是盡管醇提物中黃酮含量高于水提物，但由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸，這些物質對亞硝酸鹽具有一定的清除作用，所以使二者的差距不大。當加入提取液的量由1.0 mL增加到2.0 mL時，對亞硝酸鹽的清除作用迅速增加，超過2.0 mL后，增長放緩，醇提物對亞硝酸鹽的清除作用明顯高于水提物，并且差距越來越大，這可能是醇提物中含有更多的黃酮類化合物，對亞硝酸鹽的清除作用更突顯出來。當加入提取液4.0 mL，醇提物對亞硝酸鹽的清除率可以達到86.84%（水提物為75.88%），說明野木瓜對亞硝酸鹽有較好的清除作用。

2.2 野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用

野木瓜提取液對亞硝胺合成的阻斷作用見圖2。由圖2可知，在體外模擬人體胃液的條件下，隨著野木瓜提取液量的增加，對亞硝胺合成的阻斷能力迅速提高，在0.5～1.0 mL時，野木瓜醇提物對亞硝胺的阻斷率略低于水提物，可能是由于水提物中溶解了更多的糖類化合物和有機酸的原因。當加入提取液量超過1.0 mL后，醇提物對亞硝胺合成的阻斷作用迅速增長，快于水提物，并慢慢超過水提物，這可能是由于醇提物中含有較多的黃酮類化合物，其對亞硝胺合成的阻斷作用逐漸突顯出來。當加入提取液量超過1.5 mL后，水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的增加逐漸放緩，而醇提物在超過1.5 mL后仍快速增加，直到2.0 mL后才放緩，并使其阻斷率顯著高于水提物。在加入提取液量超過3.0 mL時醇提物和水提物對亞硝胺合成的阻斷作用的變化均趨于平緩。當加入提取液量4.0 mL（相當于0.8 g野木瓜粉的提取液）時，醇提物對亞硝胺合成的阻斷率可達92.91%（水提物也可達87.50%），說明野木瓜對亞硝胺合成有很好的阻斷作用。

3 結論

研究結果表明，在體外模擬人體胃液的條件下（pH 3.0，溫度為37 ℃），用0.8 g野木瓜粉的乙醇提取液對亞硝酸鹽的清除率可達86.84%，而水提取液為75.88%，乙醇提取液對亞硝胺合成阻斷率可達92.91%，而水提取液為87.50%，說明野木瓜提取液對亞硝酸鹽的清除和亞硝胺合成阻斷均有明顯的作用，其中，醇提物對亞硝酸鹽的清除及對亞硝胺合成阻斷作用均高于水提物。因此，野木瓜的抗癌開發利用前景可觀，它可能成為一種經濟有效的天然抗癌生物資源和抗癌保健食品或飲品。

參考文獻：

[1] 胡榮梅.N-亞硝基化合物分析方法[M].北京：科學出版社，1980.

[2] 戴乾圜，逯 萍，彭少華.黃曲霉素和N-亞硝基化合物借誘發DNA互補堿對交聯而啟動癌變[J].自然科學進展，2003，13（7）：693-697.

[3] 曾瑤池，胡敏予.食物中N-亞硝基化合物與腫瘤關系的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志，2008，1（2）：151-155.

[4] 張慶樂，王 浩，李 靜，等.黃酮類化合物在阻斷亞硝胺合成中的應用[J].食品科技，2008（8）：165-167.

[5] 閆向陽，劉建平，夏季紅，等.甘草黃酮提取條件的優化及抑制亞硝化反應的研究[J].河南工業大學學報（自然科學版），2007，28（2）：35-37，50.

[6] 楊轉琴，王 磊，范 娜，等.柚皮黃酮化合物含量及抗氧活性的研究[J].食品科學，2006，27（4）：102-105.

[7] 陳 忻，劉愛文，陳純馨，等.殼聚糖及其衍生物對亞硝化反應的抑制作用[J].精細化工，2005（3）：209-211.

[8] 王文平，郭祀遠，李 琳，等.野木瓜多糖中糖醛酸含量測定[J].食品科技，2007（10）：84-86.

[9] 苗明三.法定中藥藥理與臨床[M].北京：世界圖書出版公司， 1998.

[10] 陳 瑛，李 錦，吳英良.野木瓜化學成分及其藥理和臨床研究進展[J].沈陽藥科大學學報，2008，25（11）：924-928.

[11] 張 毅，王少敏.木瓜高效栽培與利用[M].北京：中國農業出版社，2003.

[12] 陳國棟，楊 磊，陳少丹，等.野木瓜屬植物化學成分和生物活性研究概況[J].中藥材，2008（2）：309-315.

[13] 龐戰軍.自由基醫學研究方法[M].北京：人民衛生出版社，2000.

[14] 袁毅樺，陳 忻，陳純馨，等.柚皮提取物對亞硝化反應抑制作用研究[J].化學世界，2004（1）：26-28，34.

[15] 張 虹，許 鋼，袁建耀.劉寄奴提取液對亞硝化反應的抑制作用[J].鄭州糧食學院學報，2000（1）：50-53.

[16] 謝祥茂，丁小雯，陳俊琴.金櫻子提取液對NO2-清除作用的體外試驗研究[J].食品科學，2001，22（1）：31.

（責任編輯 龍小玲）