早期糖尿病腎病患者血漿D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸的表達(dá)及其臨床意義

王燕南通大學(xué)附屬醫(yī)院分院內(nèi)分泌科，江蘇南通 226001

早期糖尿病腎病患者血漿D-二聚體、
纖維蛋白原、同型半胱氨酸的表達(dá)及其臨床意義

王燕
南通大學(xué)附屬醫(yī)院分院內(nèi)分泌科，江蘇南通 226001

目的探討早期2型糖尿病腎病患者血漿D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平的改變及其臨床意義。方法選取2型糖尿病患者97例，按尿白蛋白排泄率分為兩組：正常蛋白尿組、早期糖尿病腎病組，同時(shí)選擇40名健康體檢者作為對(duì)照組，對(duì)尿白蛋白排泄率、D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平進(jìn)行組間比較，并對(duì)尿白蛋白排泄率與D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸進(jìn)行直線相關(guān)分析。結(jié)果各組D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），早期糖尿病腎病組D-二聚體[（0.23±0.08）mg/L]、纖維蛋白原[（3.37±0.70）g/L]、同型半胱氨酸[（15.68±2.51）μmol/L]高于正常蛋白尿組[（0.19±0.07）mg/L、（2.71±0.71）g/L、（14.41±2.561）μmol/L]（P＜0.05）。正常蛋白尿組與早期糖尿病腎病組D-二聚體+纖維蛋白原+同型半胱氨酸聯(lián)合檢測(cè)陽性率（37.5%、71.4%）明顯高于單個(gè)陽性率（D-二聚體10.4%、20.4%，纖維蛋白原14.6%、24.5%，同型半胱氨酸29.2%、51.0%）（P＜0.01或P＜0.05）。D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸與尿白蛋白排泄率成正相關(guān)（r=0.819、0.851、0.718，均P＜0.01）。 結(jié)論糖尿病腎病患者血漿D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸較正常人群升高，并隨著腎病的加重成上升趨勢(shì)，聯(lián)合檢測(cè)血漿D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平有助于早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎臟損害，從而盡早采取有效干預(yù)措施，防止糖尿病腎病的進(jìn)展。

糖尿病腎病；D-二聚體；纖維蛋白原；同型半胱氨酸

在2013年聯(lián)合國糖尿病日時(shí)，國際糖尿病聯(lián)盟報(bào)道全世界有3.71億糖尿病患者，而中國有接近1億，中國糖尿病患者數(shù)是世界糖尿病患者數(shù)的1/4，目前糖尿病已經(jīng)逐漸從一個(gè)老年人疾病逆轉(zhuǎn)為年輕人高發(fā)的疾病，糖尿病病死率已居腫瘤、心血管疾病之后的第3位，80%死于糖尿病并發(fā)癥。糖尿病腎病是2型糖尿病患者最常見的微血管并發(fā)癥，同時(shí)也是心血管病變的危險(xiǎn)因素之一，在所有糖尿病患者中的發(fā)生率約為35%，在終末期腎衰竭超過30%。該病起病較為隱匿，早期對(duì)腎損傷進(jìn)展緩慢，可無明顯的臨床癥狀，微量白蛋白尿的出現(xiàn)提示糖尿病腎損害進(jìn)展至大量蛋白尿期，是臨床干預(yù)的重要指標(biāo)，通常一旦出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿，腎功能呈進(jìn)行性惡化。早期診斷糖尿病腎病，給予及時(shí)有效的治療對(duì)改善2型糖尿病患者的生活質(zhì)量及預(yù)后具有重要意義。本研究通過聯(lián)合測(cè)定2型糖尿病患者血D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平旨在早期發(fā)現(xiàn)糖尿病微血管病變，及早采取臨床干預(yù)措施，防止糖尿病腎病的發(fā)生及進(jìn)展。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年6月～2014年2月在南通大學(xué)附屬醫(yī)院分院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）住院的2型糖尿病患者97例，均按1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)確診，排除：1型糖尿病、其他特殊類型糖尿病以及妊娠期糖尿病；感染等急性并發(fā)癥；嚴(yán)重心腦血管疾病；肝腎功能、甲狀腺功能異常；近3個(gè)月未用B族維生素及葉酸。按尿微量白蛋白排泄率分為兩組。正常蛋白尿組（尿白蛋白排泄率＜20 μg/min）48例，男26例，女22例；年齡36～73歲，平均（58.92±8.82）歲。早期糖尿病腎病組（尿白蛋白排泄率20～200 μg/min）49例，男28例，女21例；年齡35～73歲，平均（59.02± 9.21）歲。同時(shí)選擇同期我院健康體檢者40名作為對(duì)照組，其中男19名，女21名；年齡37～70歲，平均（58.13± 9.43）歲。各組間性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過，所有研究對(duì)象均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 標(biāo)本收集及檢測(cè)方法

采集所有受試者清晨空腹12 h靜脈血，搖勻后測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。同時(shí)收集病例組24 h尿液做微量白蛋白測(cè)定。生化指標(biāo)及糖化血紅蛋白 （HbA1c）采用Olympus Au-640全自動(dòng)生化分析儀及波音特生物科技有限公司HbA1c免疫散射比濁法檢測(cè)試劑盒。24 h尿微量白蛋白用美國德普公司化學(xué)發(fā)光儀IMMULITE測(cè)定。D-二聚體采用免疫散射法，使用Axisshield Poc AS公司生產(chǎn)的NycoCard READERⅡ特種蛋白金標(biāo)檢測(cè)儀及其配套的免疫散射色譜法檢測(cè)試劑。纖維蛋白原采用凝固法，使用Sysmex AC-500全自動(dòng)免疫分析儀及配套原裝進(jìn)口試劑盒。同型半胱氨酸采用熒光法，使用OP-162微量熒光檢測(cè)儀及配套同型半胱氨酸熒光法定量測(cè)定試劑。陽性判斷按照說明書的參考范圍：纖維蛋白原＞4 g/L、D-二聚體＞0.3 mg/L、同型半胱氨酸＞15 μmol/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，樣本間計(jì)量資料采用F檢驗(yàn)或t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用直線回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組病程及生化指標(biāo)比較

本研究共有97例患者納入臨床試驗(yàn)。正常蛋白尿組與糖尿病腎病組病程差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各組血壓差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。正常蛋白尿組、早期糖尿病腎病組三酰甘油、膽固醇、血肌酐與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。見表1。

2.2 各組D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平比較

三組D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），早期糖尿病腎病組D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸水平高于正常蛋白尿組（P＜0.05）。見表2。

2.3 糖尿病各組D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸檢測(cè)陽性率及聯(lián)合檢測(cè)陽性率比較

糖尿病各組D-二聚體+纖維蛋白原+同型半胱氨酸三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的陽性率均明顯高于單個(gè)檢測(cè)陽性率（P＜0.01或P＜0.05）。見表3。

2.4 血漿D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸與尿白蛋白排泄率的相關(guān)性分析

D-二聚體、纖維蛋白原、同型半胱氨酸與尿白蛋白排泄率成正相關(guān)（r=0.819、0.851、0.718，P＜0.01）。見表4。

3 討論

根據(jù)世界衛(wèi)生組織最新預(yù)測(cè)，我國2005～2015年用于糖尿病防治的費(fèi)用在5500億左右，其中有80%用于糖尿病各種并發(fā)癥的治療[1]。如何改善糖尿病患者的預(yù)后，提高患者生活質(zhì)量，延長(zhǎng)生命，重點(diǎn)就在于對(duì)其慢性并發(fā)癥的早期防控。糖尿病腎病是糖尿病最常見和最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制涉及高糖導(dǎo)致的代謝紊亂等多個(gè)方面，但單純進(jìn)行血糖控制并不能夠完全阻止其病理學(xué)的進(jìn)展和臨床的發(fā)展，現(xiàn)血栓和凝血功能的異常學(xué)說已經(jīng)成為糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展的重要病理生理機(jī)制之一。

近年研究結(jié)果提示，2型糖尿病患者由于一系列代謝紊亂，使機(jī)體凝血和纖溶系統(tǒng)失衡，繼而使血管內(nèi)皮損傷，血栓或廣泛的微血栓形成，在此基礎(chǔ)上又可發(fā)生凝血和纖溶改變，纖溶系統(tǒng)激活又促進(jìn)了微血管病變的發(fā)展[2]。在糖尿病腎病中，腎臟的微血管病變?cè)缙谑菫V過膜上電荷丟失，孔徑大小和選擇功能的破壞，血管通透性增加，腎小球細(xì)胞外基質(zhì)堆積，繼而系膜體積增大，毛細(xì)血管的表面積減少，腎小球栓塞、纖維化和濾過能力下降，最終發(fā)展至腎功能衰竭。鑒于高凝狀態(tài)在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中所起的關(guān)鍵作用，在病程早期即已啟動(dòng)，提示反映凝血纖溶紊亂的相關(guān)指標(biāo)可以作為糖尿病腎病早期預(yù)測(cè)因子和反映腎損害的指標(biāo)。

本組資料中，早期糖尿病腎病組與正常蛋白尿組比較，糖尿病病程存在顯著差異（P＜0.05），這與流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相一致，隨著糖尿病病程的延長(zhǎng)，糖尿病腎病患病率明顯增加[3]。

本研究中，D-二聚體在正常蛋白尿組、早期糖尿病腎病組和對(duì)照組兩兩比較中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，正常蛋白尿組的血漿D-二聚體的變化明顯高于對(duì)照組，而早期糖尿病腎病組又高于正常蛋白尿組，且血漿D-二聚體水平與尿白蛋白排泄率之間為顯著正相關(guān)，提示糖尿病患者體內(nèi)存在高凝狀態(tài)，并隨著糖尿病腎病的出現(xiàn)及發(fā)展而進(jìn)一步加重。交聯(lián)的纖維蛋白在纖溶酶作用下產(chǎn)生D-二聚體，它是纖維蛋白特異性的最小片段的降解產(chǎn)物，是末端連接較為穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，纖溶以后其本身不再被降解，在纖維蛋白降解早期即可被檢測(cè)出來，是特異性反映體內(nèi)高凝狀態(tài)及繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)的標(biāo)志物之一，可作為體內(nèi)存在高凝狀態(tài)及血栓形成的重要分子標(biāo)志物[4]。D-二聚體不但是凝血和纖溶功能紊亂的結(jié)果，而且其本身對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞的功能也有一定影響，增高的D-二聚體不僅可促進(jìn)血小板黏附、聚集直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，還可在腎臟毛細(xì)血管壁沉積形成微結(jié)晶，致使腎臟微血管狹窄甚至閉塞，D-二聚體水平在一定程度上反映了腎臟損傷情況，提示D-二聚體可作為預(yù)測(cè)糖尿病腎病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)、輔助早期診斷糖尿病腎病的一項(xiàng)指標(biāo)。

本研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者血漿纖維蛋白原的水平明顯高于對(duì)照組，并隨著尿白蛋白排泄率的增加而進(jìn)一步升高。纖維蛋白原是一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質(zhì)，在凝血酶作用下切除纖維蛋白原中的血纖肽A和B而生成的單體蛋白質(zhì)。纖維蛋白原可引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，釋放出各種血管活性物質(zhì)，導(dǎo)致凝血功能的紊亂。其增高同樣證實(shí)糖尿病患者體內(nèi)存在高凝狀態(tài)，且與疾病嚴(yán)重程度成正相關(guān)[5]。纖維蛋白本身是一種可溶性血漿糖蛋白，除參與凝血外，其升高也可導(dǎo)致血液黏滯性增加，血液流速減慢，易于形成血栓，而纖維蛋白溶酶對(duì)糖化后的纖維蛋白分解的能力下降，加上紅細(xì)胞變形能力下降，血小板易于聚集黏著，進(jìn)而使毛細(xì)血管管腔狹小，甚至閉塞，從而組織缺氧。另有研究表明[6]，糖尿病是一種低度炎癥性疾病，纖維蛋白原也是一種炎癥標(biāo)志物，它反映炎癥過程的出現(xiàn)要優(yōu)于C反應(yīng)蛋白，作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，其增高預(yù)示著血管壁有炎癥現(xiàn)象，可加速腎小球病變。本研究中纖維蛋白原水平在早期糖尿病腎病組明顯高于正常蛋白尿組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，高凝狀態(tài)在早期糖尿病腎病組加重，且隨尿白蛋白排泄率增加而更加明顯，提示檢測(cè)血漿纖維蛋白原對(duì)診斷早期糖尿病腎病具有一定的價(jià)值，且纖維蛋白原水平越高，腎損害風(fēng)險(xiǎn)越大。

本組資料顯示，早期糖尿病腎病組同型半胱氨酸水平＞正常蛋白尿組＞對(duì)照組，早期糖尿病腎病組血漿同型半胱氨酸與正常蛋白尿組比較具有顯著差異，且與尿白蛋白排泄率成正相關(guān)，提示同型半胱氨酸與糖尿病腎病關(guān)系密切，隨糖尿病腎損害加重而水平進(jìn)一步升高，對(duì)協(xié)助糖尿病腎病的早期診斷有重要的意義。同型半胱氨酸是半胱氨酸和蛋氨酸代謝的一個(gè)中間產(chǎn)物，是一種含巰基的非必需氨基酸，目前研究發(fā)現(xiàn)胰島素對(duì)同型半胱氨酸有著重要的調(diào)節(jié)作用，2型糖尿病患者同型半胱氨酸水平明顯升高，高同型半胱氨酸可直接造成腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞損傷以及血管功能出現(xiàn)異常[7]，高同型半胱氨酸還可引起內(nèi)皮細(xì)胞衰老，導(dǎo)致氧化應(yīng)激，自由基產(chǎn)生增多，一氧化氮表達(dá)活性降低，血管性血友病因子等細(xì)胞因子分泌增多，誘發(fā)凝血酶生成及血小板的黏附聚集，從而引起血液凝血和纖溶功能紊亂[8]，促進(jìn)血栓的形成，是血管損害的敏感指標(biāo)[9]，也是糖尿病腎病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素和早期預(yù)測(cè)指標(biāo)。

本研究聯(lián)合檢測(cè)D-二聚體、纖維蛋白原及同型半胱氨酸水平，其陽性率明顯高于單項(xiàng)檢測(cè)，提高了糖尿病早期腎損害的檢出率。類似聯(lián)合檢測(cè)也有相應(yīng)報(bào)道，但其聯(lián)合的指標(biāo)不一。李春仙等[10]報(bào)道，聯(lián)合檢測(cè)D-二聚體、纖維蛋白原及C反應(yīng)蛋白，其腎病陽性檢測(cè)率為73%，也有報(bào)道聯(lián)合纖維蛋白原及C反應(yīng)蛋白陽性檢測(cè)率達(dá)77%[11]。本組資料聯(lián)合陽性檢測(cè)率達(dá)到71.4%，與以上聯(lián)合檢測(cè)指標(biāo)具有相近的陽性檢測(cè)率。但作為炎癥反應(yīng)因子的C反應(yīng)蛋白受影響的因素要多于同型半胱氨酸，故有可能檢測(cè)同型半胱氨酸具有更高的穩(wěn)定性，期待相關(guān)研究進(jìn)一步深入探索[12]。同時(shí)通過聯(lián)合檢測(cè)同型半胱氨酸，可以提示臨床針對(duì)高半胱氨酸血癥患者進(jìn)行干預(yù)，從另一病理途徑延緩腎臟損害的發(fā)生。

總之，動(dòng)態(tài)觀察D-二聚體、纖維蛋白原及同型半胱氨酸水平變化并進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，可能對(duì)糖尿病腎病的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后有重要的預(yù)測(cè)和診斷價(jià)值，根據(jù)測(cè)定結(jié)果，提示從高凝狀態(tài)及高半胱氨酸血癥對(duì)腎臟損傷的機(jī)制入手，及早采取有效的針對(duì)性措施，阻斷凝血功能紊亂帶來的惡性循環(huán)，進(jìn)而防止糖尿病腎臟病的發(fā)生和進(jìn)展[13-17]，對(duì)降低糖尿病腎病患者的發(fā)病率、致殘率和病死率有重要的臨床意義，也給臨床治療帶來新的思路。

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Expression and clinical significance of D-dimer,fibrinogen and homocysteine in patients with type 2 diabetes mellitus

WANG Yan
Department of Endocrinology Medicine,the Branch Hospital of Affiliated Hospital of Nantong University,Jiangsu Province,Nantong 226001,China

ObjectiveTo study the changes and clinical application value of plasma D-dimer(DD),fibrinogen(FIB) and homocysteine (Hcy)levels in patients with early type 2 diabetic nephropathy (DN).Methods Totally 97 patients with type 2 diabetes and 40 healthy controls were enrolled.According to urinary albumin excretion rate (UAER),all patients were divided into two groups:normal albuminuria group and early diabetic nephropathy group.Levels of UAER, DD,FIB and Hcy of investigate individuals were compared among the groups and the correlation of UARE with other there items was analyzed.Results The levels of plasma DD,FIB,Hcy in all groups had statistically significant differences(P＜0.05).The levels of DD[(0.23±0.08)mg/L],FIB[(3.37±0.70)g/L],Hcy[(15.68±2.51)μmol/L]in early diabetic nephropathy group were higher than those of normal albuminuria group [(0.19±0.07)mg/L,(2.71±0.71)g/L, (14.41±2.56)μmol/L](P＜0.05).The positive rate(37.5%,71.4%)of combined detection of DD+FIB+Hcy in normal albuminuria group and early diabetic nephropathy group was significantly higher than that of single positive rate(DD 10.4%,20.4%;FIB 14.6%,24.5%;Hcy 29.2%,51.0%)(P＜0.01 vs P＜0.05).The DD,FIB,Hcy and urinary albumin excretion rate was positively correlated (r=0.819,0.851,0.718,all P＜0.01).Conclusion The simultaneous determination of plasma DD,FIB and Hcy is significant in the early diagnosis and development of the diabetic nephropathy, combined test of DD,FIB and Hcy levels may contribute to improve the detection rate of early diabetic nephropathy damage so as to take effective measures to prevent the progress of diabetic nephropathy.

Diabetic nephropathy;D-dimer;Fibrinogen;Homocysteine

R587；R692.3

A

1673-7210（2015）03（c）-0081-04

2014-11-26本文編輯：張瑜杰）