育齡期婦女宮頸HPV感染自然轉歸的隨訪分析

朱珍珍，鄭 潔，肖蘋妹，徐漾漾，陳海斌

(1.瑞安市中醫院婦產科，浙江 瑞安 325200；2.溫州醫學院附屬第三醫院檢驗科，浙江 瑞安 325200)

育齡期婦女宮頸HPV感染自然轉歸的隨訪分析

朱珍珍1，鄭 潔1，肖蘋妹1，徐漾漾1，陳海斌2

(1.瑞安市中醫院婦產科，浙江 瑞安 325200；2.溫州醫學院附屬第三醫院檢驗科，浙江 瑞安 325200)

目的 研究育齡期婦女宮頸人乳頭瘤病毒(HPV)感染的自然轉歸。方法 選擇20～40歲育齡期婦女宮頸HPV感染者596例進行定期(6、12、24個月)隨訪，失訪4例，入組592例，入組者根據HPV類型分為低危組89例，高危組503例；兩組TCT(-)、(+)分別21例、68例和131例、372例；兩組DNA載量<500pg/mL、500～1 000pg/mL、>1 000pg/mL者分別為52例、21例、16例和296例、129例、78例；觀察兩組HPV感染的自然轉歸情況，并進行統計分析。結果 低危組隨訪6、12、24個月HPV感染自然轉陰率均顯著高于高危組(χ2值分別為12.720、11.578、17.843，均P<0.05)。低危組和高危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(-)者自然轉陰率均顯著高于TCT(+)者(χ2值分別為4.307、17.168、25.740、7.906、44.740、68.204，均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個月，TCT(-)者自然轉陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(-)者(χ2值分別為6.355、8.605、12.663，均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個月，TCT(+)者自然轉陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(+)者(χ2值分別為5.452、6.838、12.981，均P<0.05)。低危組DNA載量中<500pg/mL者隨訪6、12、24個月自然轉陰率均顯著高于高危組DNA載量中<500pg/mL者(χ2值分別為12.999、12.191、21.204，均P<0.05)。結論 育齡期婦女宮頸HPV感染者低危型自然轉陰率高于高危型，TCT陰性者自然轉陰率高于TCT陽性，DNA載量<500pg/mL HR-HPV感染者自然轉陰率高于LR-HPV感染，DNA載量>500pg/mL的HR-HPV、LR-HPV感染者很少出現轉陰現象。

育齡期婦女；宮頸；人乳頭瘤病毒；感染；自然轉歸

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus HPV)感染是引起宮頸癌變的重要因素，大部分HPV感染屬于一過性[1]。現已發現了200多種不同類型HPV，根據HPV致病性的差異，將其分為高危型和低危型兩大類，其中感染生殖道黏膜的有50多種類型[2]，不同亞型HPV感染的致病性和后果不同。HPV感染的自然轉歸與經濟的發展狀況、患者自身的生活習慣和免疫功能、感染的輕重、HPV類型等因素有關[3]，了解HPV感染的流行病學特點，掌握其自然轉歸規律，可為臨床治療提供更多的參考依據，本研究旨在觀察HPV感染的自然轉陰率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月至2013年6月在瑞安市中醫院婦產科門診就診的育齡期婦女宮頸HPV感染者596例進行定期(6、12、24個月)隨訪，患者年齡20～40歲，其中失訪4例，入組592例。入組者根據HPV類型(低危型和高危型)分低危組89例，高危組503例，兩組年齡、液基薄層細胞學檢查(thinprep cytologic test，TCT)和人乳頭狀瘤病毒-脫氧核糖核酸(human papilloma virus-deoxyribonucleic acid，HPV-DNA)載量分布結果比較均無統計學意義(均P>0.05)，具有可比性，見表1。入選者均前置知情同意書，并排除宮頸癌及其它宮頸和其它宮頸惡性疾病，無心血管、肝、腎等重要器官疾病，無內分泌疾病，無精神障礙性疾病。

1.2 標本采集

采集方法：①樣本采集前3d內無陰道沖洗、上藥，24h內無性生活；②截石位，擴張陰道，用專用毛刷在宮頸內口順時針旋轉6圈，停留20s采集宮頸脫落細胞；③將毛刷放入專用采集管；④將標本中的黏液、血液、炎癥細胞與上皮細胞分離，放-20℃冰箱保存，24h內檢測。

1.3 人乳頭狀瘤病毒脫氧核糖核酸定量檢測和分型

用Digene公司提供的二代雜交捕獲法(hybrid captureⅡ，HC-Ⅱ)HPV-DNA檢測系統及配套試劑盒檢測，嚴格按照說明書要求操作，實驗室溫度20～25℃，檢測步驟：提取分離液、裂解、雜交、捕獲、沖洗、收集信號、結果判定。用數據操縱語言(data manipulation language，DML) 2000系統判讀，HPV-DNA含量超過lpg/mL即RLU/CO比值大于1為陽性。HPV-DNA定量分3級：<500pg/mL、500～1 000pg/mL、>l 000pg/mL。用配套HPV分型檢測試劑盒，HPV分型基因芯片檢測閱讀系統檢測13種高危人類乳頭狀病毒(high risk human papilloma virus，HR-HPV)(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)和16種低危人類乳頭狀病毒(low risk human papilloma virus，LR-HPV)(6、11、26、40、42、43、44、53、55、57、66、67、69、73、82)，基因芯片相應類型HPV位點出現藍點為陽性。

1.4 液基薄層細胞學檢查

取樣本分離液，制成薄層涂片，用95%酒精固定，巴氏染色，由主治醫師以上專業科醫生診斷，采用TBS診斷系統進行細胞學分類診斷[4]：高度鱗狀上皮內瘤變(high squamous intraepithelial neoplasia，HSIL)、低度鱗狀上皮內瘤變(low grade squamous intraepithelial neoplasia，LSIL)、未能除外高度上皮內瘤變的不典型鱗狀細胞(atypical squamous cell carcinoma of the high intraepithelial neoplasia，ASC-H)、未能明確意義的不典型鱗狀細胞(failed to define the significance of atypical squamous cells，ASC-US)、正常范圍(normal range,WML)、鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。

1.5 隨訪周期和內容

所有入選者均于6、12、24個月行宮頸常規檢查、TCT檢查，HPV及DNA載量檢查，TCT結果為不典型鱗狀上皮細胞(ASC-US)及/或HR-HPV陽性者行陰道鏡下多點活檢。

1.6 統計學方法

2 結果

2.1 宮頸低危型和高危型人乳頭瘤病毒感染自然轉陰率分析

低危組隨訪6、12、24個月HPV感染自然轉陰率均顯著高于高危組(均P<0.05)，見表2。

表2 宮頸低危型和高危型HPV感染自然轉陰率分析[n(%)]

Table 2 Nature negative rate of cervical low-risk and high-risk HPV infection[n(%)]

2.2 人乳頭瘤病毒感染自然轉陰率與宮頸疾病的相關性

低危組和高危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(-)者自然轉陰率均顯著高于TCT(+)者(均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(-)者自然轉陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(-)者(χ2值分別為6.355、8.605、12.663，均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(+)者自然轉陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(+)者(χ2值分別為5.452、6.838、12.981，均P<0.05)，見表3。

2.3 人乳頭瘤病毒感染近期自然轉陰率與DNA載量的相關性

低危組DNA載量中<500 pg/mL者隨訪6、12、24個月自然轉陰率均顯著高于高危組DNA載量中<500 pg/mL者(χ2值分別為12.999、12.191、21.204，均P<0.05)，見表4。

注：★為兩組內TCT(-)與TCT(+)比較。

3 討論

3.1 育齡期婦女宮頸低危型和高危型人乳頭瘤病毒感染自然轉陰率

HPV感染與CIN發病有關，并參與了CIN的進展，是預測宮頸癌前病變的因素[5]。HPV感染可引起細胞分化失調，導致重度不典型增生，最后發展為宮頸浸潤癌，約需10～15年時間。大部分婦女一生可有短暫HPV感染，免疫力正常的患者可在2年內清除病毒，僅少數婦女會持續感染乃至最終發展成宮頸癌[6]。國內對宮頸HPV感染自然轉歸研究較少，了解宮頸HPV感染的自然轉歸規律，可為其隨訪、治療提供統計學依據，避免過度治療，取消感染者懼怕心理。本研究結果發現，隨訪6月、12月、24個月，低危型和高危型HPV感染的自然轉陰率分別為6.74%、12.36%、19.10%和0.80%、3.78%、5.57%，宮頸HPV感染隨著時間的推移其自然轉陰率逐漸升高，LR-HPV的自然轉陰率高于HR-HPV(P<0.05)。

3.2 育齡期婦女宮頸人乳頭瘤病毒感染近期自然轉陰率與宮頸疾病的相關性

2012年池銀歸等[3]統計Ⅰ級宮頸上皮內瘤變隨訪6、12、24個月期自然轉陰率分別為1.74%、4.35%、8.70%，CIN可以自然轉陰，Ⅰ級CIN伴HPV感染者其HPV也可自然轉陰；宮頸疾病的病理結果與HPV的自然轉陰率與是否存在差異值得臨床去進一步探討。本研究結果發現，低危組和高危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(-)者自然轉陰率均顯著高于TCT(+)者(均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(-)者自然轉陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(-)者(均P<0.05)，低危組HPV感染隨訪6、12、24個月 TCT(+)者近期自然轉陰率均顯著高于高危組HPV感染TCT(+)者(均P<0.05)，提示宮頸HPV感染的自然轉陰率與宮頸細胞學結果陰性或陽性有關，但各級別細胞學結果其HPV的自然轉陰率是否存在差異有待于進一步探討。

3.3 育齡期婦女宮頸人乳頭瘤病毒感染近期自然轉陰率與DNA載量的相關性

宮頸病變程度與HPV 載量及陽性率存在相關性[6-7]。持續性高危型HPV感染可引發宮頸病變及宮頸癌[8]。HPV-DNA載量與HPV自然轉陰率是否存在相關性相關報道較少，本研究結果發現，低危組DNA載量中<500pg/mL者隨訪6、12、24個月自然轉陰率均顯著高于高危組DNA載量中<500pg/mL者(均P<0.05)，兩組HPV-DNA載量500～1 000pg/mL、>1 000pg/mL者均未出現轉陰現象。因此，宮頸HPV感染者HPV-DNA的載量與其自然轉陰率有明顯相關性。

[1]曾銀英,陳曉榆,田可歌,等.東莞地區白細胞介素-10基因多態性與HPV感染及宮頸病變相關性研究[J].臨床和實驗醫學雜志,2015,14(8)636-639.

[2]蔡為民,闞延靜,耿建祥,等.子宮頸尖銳濕疣組織中HPV感染基因型別分布[J].臨床與實驗病理學雜志,2015,31(4):395-399.

[3]池銀歸,朱珍珍,虞如芬.Ⅰ級宮頸上皮內瘤變近期隨訪結果分析[J].中國現代醫生,2012,50(10):30-31.

[4]傅小一,李娟,張子雯,等.液基細胞學在子宮頸癌機會性篩查中的應用與探討[J].宜春學院學報,2013,35(12):78-79.

[5]陳秀堂,黃小芳.安吉縣育齡婦女HPV感染及CIN患病情況的調查分析[J].中國婦幼健康研究,2014,25(3):354-356。

[6]Origoni M,Carminati G,Sideri M,etal.“Low-grade positivity” of HPV viral load after atypical squamous cells of undetermined significance(ASC-US) cytology identifies women at low-risk for cervical intraepithelial neoplasia grade 2 and 3[J].Eur J Gynaecol Oncol,2012,33(3):261-264.

[7]De Freitas A C,Coimbra E C,Leitao Mda C.Molecular Targets of HPV Oncoproteins:Potenfia1 Biomarkers for Cervical Carcinogenesis[J].Biochimica et Biophysica Acta(BBA)-Reviews on Cancer,2014,1845(2):91-103.

[8]馬靜,袁世發,關麗云,等.高危型HPV 檢測在宮頸病變漏診中的應用[J].重慶醫學,2015,44(9):1203-1205.

[專業責任編輯：安瑞芳]

Follow-up analysis of natural outcomes of cervical HPV infection in child-bearing women

ZHU Zhen-zhen1, ZHENG Jie1, XIAO Ping-mei1, XU Yang-yang1, CHEN Hai-bin2

(1.DepartmentofGynecologyandObstetrics,RuianHospitalofTraditionalChineseMedicine,ZhejiangRuian325200,China;2.ClinicalLaboratory,ThirdHospitalAffiliatedtoWenzhouMedicalCollege,ZhejiangRuian325200,China)

Objective To study the natural outcomes of cervical HPV infection in child-bearing women. Methods Totally 596 cervical HPV-infected childbearing women aged 20-40 years old were followed up regularly (6, 12, 24 months). Among them, 4 were lost to follow up, and 592 were enrolled. Enrolled patients were classified into two groups, including 89 in low-risk group and 503 in high-risk group. In two groups there were 21 cases, 68 cases, 131 cases and 372 cases of TCT(-) and TCT (+). There were 52 cases, 21 cases, 16 cases, 296 cases, 129 cases and 78 cases with DNA loading<500pg/mL, DNA loading ranged 500-1 000pg/mL and DNA loading >1 000pg/mL in two groups. The natural outcomes of HPV infection in two groups were observed and analyzed. Results After follow-up for 6, 12 and 24 months, the negative rate of HPV infection was significantly higher in low-risk group than in high-risk group (χ2value was 12.720, 11.578 and 17.843, respectively, allP<0.05). The negative rate of patients with TCT(-) was significantly higher than those with TCT(+) in two groups after follow-up for 6, 12 and 24 months (χ2value was 4.307, 17.168, 25.740, 7.906, 44.740 and 68.204, respectively, allP<0.05). In low-risk group the negative rate of patients with TCT(-) was remarkably higher than in high-risk group (χ2value was 6.355, 8.605 and 12.663, respectively, allP<0.05), and the negative rate of patients with TCT(+) was obviously higher in low-risk group (χ2value was 5.452, 6.838 and 12.981, respectively, allP<0.05). Compared with the patients in high-risk group with DNA loading<500pg/mL, the negative rate of patients in low-risk group with DNA loading<500pg/mL was significantly higher (χ2value was 12.999, 12.191 and 21.204, respectively, allP<0.05). Conclusion Natural negative rate in child-bearing women infected with low-risk HPV type is higher than that with high-risk HPV type, and natural negative rate in TCT negative women is higher than that in TCT positive women. Natural negative rate in high-risk HPV infected women with DNA loading<500 pg/mL is higher than that in Low-risk HPV infected women, and negative conversion is rarely observed in high-risk HPV and low-risk HPV infected women with DNA loading >500pg/mL.

child-bearing women; cervix; human papilloma virus (HPV); infection; natural outcomes

2014-08-08

瑞安市科技局資助項目(項目編號20120379)；溫州衛生局科技項目(項目編號：2012B032)

朱珍珍(1976-)，女，主治醫師，主要從事婦產科臨床工作。

肖蘋妹，副主任醫師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.04.038

R711.7

A

1673-5293(2015)04-0769-04