臨床培養1809株細菌的耐藥性研究

秦文敏　季　磊　崔洪泉*

（1 東營市第二人民醫院，山東 東營 257335；2 東營市人民醫院，山東 東營 257091）

臨床培養1809株細菌的耐藥性研究

秦文敏1季磊2崔洪泉2*

（1 東營市第二人民醫院，山東 東營 257335；2 東營市人民醫院，山東 東營 257091）

目的 通過統計分析，了解相同季節、不同年份，致病細菌發病的規律性及其對抗生素耐藥性的差異。方法 采用回顧性調查的方法，對2013年度第三季度所分離的病原菌所做的藥敏實驗結果與2014年度第三季度所分離的病原菌所做的藥敏實驗結果進行對比分析。結果 兩個年度培養的細菌構成比、耐藥性經統計學處理，有差異。結論 兩個年度培養的細菌的耐藥性有差異，對指導臨床合理用藥有指導意義。

細菌培養；致病細菌；耐藥性；臨床研究

通過分析，了解不同地區，不同季節，致病細菌發病的規律性及其對抗生素的耐藥性，嚴格抗生素使用指征，做到因病施治，減少細菌耐藥性的發生、發展及其蔓延［1］。

1　資料與方法

1.1菌株來源：收集2013年第三季與2014年第三季度兩個季度本院送檢的臨床標本中所分離的病原菌，共計1809株。

1.2主要儀器和試劑：ATB-Expression全自動微生物鑒定/藥敏分析系統（法國生物梅里埃公司）及系統配套的細菌鑒定和藥敏卡。

1.3藥敏試驗：藥敏試驗采用K-B法，細菌鑒定及藥敏試驗均嚴格按照儀器操作說明進行，儀器自動分析抗菌藥物最小抑菌濃度（theminimum inhibitory concentration，MIC），藥敏結果試驗判定符合美國臨床和實驗室標準協會（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）2010年版的標準。

1.4細菌鑒定：細菌鑒定為常規方法鑒定系統，包括API系統、VITEK系統、Microscan 系統或手工方法［2-4］。

1.5統計學處理：采用WHONET 5.6統計學軟件進行處理，按試驗方案中常規要求，定量資料進行配對t檢驗，定性資料進行卡方檢驗，采用精確概率法求出P值，0.01＜P≤0.05具有統計學意義，P＜0.01具有顯著統計學意義。

2　結 果

2.1臨床常見菌株分布：2013年第三季度檢驗科微生物實驗室共接收細菌培養+藥敏標本（不含涂片染色檢菌、支原體培養、衣原體檢測及重點科室環境監測）3618份，分離出陽性標本831株，陽性率為22.97%。其中革蘭陰性菌590株（71.00%），革蘭陽性菌183株（22.02%），其他58株（6.97%）。2014年第三季度檢驗科微生物實驗室共接收細菌培養+藥敏標本（不含涂片染色檢菌、支原體培養、衣原體檢測及重點科室環境監測）4992份，分離出陽性標本978份，陽性率為19.60%。與朱德妹等人的研究結果相近。致病菌分離陽性率、構成比選用t檢驗精確概率法對2013、2014兩個年度兩組比較，P＜0.05，具有統計學意義。

不同年份樣本培養致病菌的陽性率為不同，其中革蘭陰性菌、革蘭陽性菌比例也不同，其主要致病菌的構成比差異性也較大。

2.2所分離的居前四位的革蘭陰性菌菌株對主要抗菌藥物敏感度。①大腸埃希菌兩個年度檢出的大腸埃希菌對阿米卡星、厄他培南、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、呋喃妥因等抗生素的敏感性較高，其耐藥性都＜10%，可以可以經驗性選用；兩個年度檢出的腸埃希菌對慶大霉素、妥布霉素、左旋氧氟沙星、環丙沙星等抗生素的耐藥性在20%～50%，可以根據藥敏實驗結果選擇用藥。②肺炎克雷伯菌兩個年度檢出的肺炎克雷伯菌對阿米卡星、哌拉西林他唑巴坦、頭孢吡肟、慶大霉素、妥布霉素、左旋氧氟沙星、環丙沙星、頭孢替坦、復方磺胺甲惡唑等抗生素的敏感性較高，其耐藥性都＜20%以內，可以經過經驗性選用；兩個年度檢出的肺炎克雷伯菌對氨曲南、頭孢唑啉、頭孢他啶、呋喃妥因、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦等抗生素的敏感性也較高，其耐藥性都＜30%以內，可以經過藥敏試驗選用。③銅綠假單胞菌兩個年度檢出的銅綠假單胞菌對阿米卡星、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、慶大霉素、妥布霉素、頭孢他啶、左旋氧氟沙、環丙沙星、等抗生素的敏感性較高，其耐藥性都＜10%，可以經過經驗性選用；兩個年度檢出的銅綠假單胞菌對頭孢替坦、復方磺胺甲惡唑、呋喃妥因、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、氨芐西林等抗生素的耐藥率幾乎都是都100%，應用引起高度重視。④鮑曼不動桿菌兩個年度檢出的鮑曼不動桿菌、左旋氧氟沙星、復方磺胺甲惡、等抗生素的敏感性較高，其耐藥性都＜10%，可以可以經驗性選用；兩個年度檢出的鮑曼不動桿菌對頭孢曲松、頭孢他啶、環丙沙星、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、慶大霉素、妥布霉素、氨芐西林/舒巴坦、氨曲南等抗生素的耐藥性在20%～60%，可以根據藥敏實驗結果選擇用藥；兩個年度檢出的鮑曼不動桿菌頭孢唑啉、氨芐西林頭孢替坦、呋喃妥因等抗生素的耐藥率幾乎都是都100%，應用引起高度重視。

3　討 論

2014年第三季度檢出前十位細菌與2013第三季度相比有變化，其中大腸埃希菌由2013年的28.90%下降到2014年的14.42%；克雷伯菌屬由2013年的19.800%下降到2014年的13.48%；銅綠假單胞菌由2013年的18.00%下降到2014年的8.08%；說明標本送檢趨于規范，有可能樣本數的增多導致細菌的檢出率有所下降。

2014年第三季度檢出的革蘭陰性細菌與2013第三季度相比有變化，2013年的59.20%上升到2014年的71.0%；革蘭陽性菌由2013年的32.21%下降到2014年的22.02%；說明兩個年度的致病菌導致的疾病的發病率不同有所不同。

其中左旋氧氟沙星的耐藥性由2013年第三季度的47.8%，上升到2014年第三季度的57.66%，環丙沙星的耐藥性由2013年第三季度的49.8%，上升到2014年第三季度的60.28%，應當引起高度注意；兩個年度檢出的腸埃希菌對氨曲南、頭孢他啶、頭孢吡肟、復方磺胺甲惡唑、頭孢曲松、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、氨芐西林、等抗生素的耐藥性＞60%，其中頭孢吡肟的耐藥性由2013年第三季度的66.58%下降到2014年第三季度的23.4%，頭孢他啶的耐藥性由2013年第三季度的66.50%下降到2014年第三季度的32.12%，氨曲南的耐藥性由2013年第三季度的66.50%下降到2014年第三季度的46.72%，有可能是因為規范抗生素應用所致。臨床應用這些抗生素必須進行藥敏試驗，而且嚴格適應證［6］。

本季度該菌對碳青霉烯類抗菌藥物亞胺培南的耐藥率為23.8%，高于2013年第三季度季度；對頭孢吡肟、頭孢他定、哌拉西林/他唑巴坦、氟喹諾酮類、氨基糖苷類耐藥率均＜20%。

本季度G+菌居首位的依然是金黃色葡萄球菌，排名列第四位，但是總株數比例低于2013年第三季度季度。總的耐藥情況變化不大，對青霉素、紅霉素和克林霉素的耐藥率仍在70%以上，對左旋氧氟沙星、慶大霉素、復方新諾明的耐藥率比上季度增高。MRSA除對甲氧西林耐藥外，對其他所有與甲氧西林相同結構的β-內酰胺類和頭孢類抗生素均耐藥，MRSA還可通過改變抗生素作用靶位，產生修飾酶，降低膜通透性產生大量PABA等不同機制，對氨基糖苷類、大環內酯類、四環素類、氟喹喏酮類、磺胺類、利福平均產生不同程度的耐藥，唯對萬古霉素敏感［5］，所以應加強醫院感染的控制，減少接觸感染機會。MRSA本季度共檢出7株（未剔除重復菌株），占金黃色葡萄球菌總株數的13.7%，低于全省監測情況平均水平；本季度凝固酶陰性的表皮葡萄球菌分離出24株，對苯唑西林的耐藥率為62.5%，低于上季度。

綜上所述，應制定全院統一的標本采集、送檢流程與標準，提高標本陽性檢出率，及時控制細菌感染，合理選擇抗生素，減少細菌耐藥發生。

［1］ 崔洪泉，寧金堂，李振卿，等.泛黃河三角洲地區常見致病菌耐藥性的臨床研究［J］.中華實驗和臨床感染病雜志：電子版，2012，6（5）：430-434.

［2］ 蘇揚.2009年我院臨床常見病原菌分布及耐藥性分析［J］.臨床和實驗醫學雜志，2011，10（2）：117-120.

［3］ 朱德妹，汪復，胡付品，等.2010年中國CHINET細菌耐藥性監測［J］.中國感染與化療雜志，2011，11（5）：321-329.

［4］ 王曉娟，易有峰.420株銅綠假單胞菌肺部感染的耐藥性分析［J］.中華實驗和臨床感染病雜志（電子版），2011，5（1）：76-78.

［5］ 王浩平，賴燕燕，趙善富.ICU病房銅綠假單胞菌肺部感染247例分析［J］.廣東醫學，2007，5（28）：219-220.

R969.3

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