HPV感染檢測在基層婦女宮頸病變篩查中的應用分析

柯曉娟，虞冬霜，洪翠華

(浙江省永嘉縣人民醫院婦產科，浙江 永嘉 325000)

HPV感染檢測在基層婦女宮頸病變篩查中的應用分析

柯曉娟，虞冬霜，洪翠華

(浙江省永嘉縣人民醫院婦產科，浙江 永嘉 325000)

目的 評價人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染檢測在基層婦女宮頸病變篩查中的應用價值。方法 選擇2012年5月至2014年4月期間在永嘉縣人民醫院婦產科及永嘉縣婦保院進行婦科檢查的630例宮頸疾病婦女為研究對象，同時進行薄層液基細胞學(TCT)及高危型HPV-DNA檢測，并對TCT及HPV-DNA陽性者在陰道鏡下取多點宮頸組織進行活檢，以病理診斷結果作為金標準，比較兩種檢測方法在基層婦女宮頸病變篩查中的應用效果，觀察不同年齡段婦女HPV感染分布情況。結果 在630例患者中，HPV-DNA陽性率為30.32%，TCT陽性率為28.09%，兩種檢測方法陽性率比較差異無統計學意義(χ2=0.752，P>0.05)；但HPV-DNA檢測敏感度及特異度均稍高于TCT檢測方法，兩種方法聯合檢測能夠將敏感度及特異度進一步提高。HPV-DNA陽性者中，≥30歲婦女感染率為64.92%，顯著高于30歲以下者的34.83%(χ2=34.020，P<0.01)。結論 宮頸病變婦女HPV-DNA陽性率較高，在TCT基礎上，聯合HPV感染檢測有助于宮頸病變性質的進一步篩查，對于30歲以上的婦女更具檢測價值。

人乳頭狀瘤病毒感染；基層婦女；宮頸病變篩查；應用價值

宮頸癌是婦科最常見的生殖器官惡性腫瘤之一，宮頸癌的發病要經歷由癌前期病變向癌轉化的緩慢病理過程，故對婦女宮頸癌前病變進行篩查并及時采取治療措施，可以有效阻斷早期宮頸病變的進展，從而降低宮頸癌的發病率[1]。研究發現，宮頸上皮內瘤樣病變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)是一組與宮頸癌的發病有密切關系的前驅病變，而人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)尤其是高危型人乳頭瘤病毒感染是宮頸癌及癌前病變(CIN)的主要致病因子[2]。因而，通過檢測HPV感染情況進行宮頸癌篩查具有十分重要的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2012年5月至2014年4月期間在永嘉縣人民醫院婦產科及永嘉縣婦保院進行婦科檢查的630例宮頸病變患者為研究對象，檢查原因包括白帶增多、陰道不規則出血及性交后出血等，年齡23～65歲，中位年齡41.62歲，排除標準：①有陰道鏡檢查及宮頸活檢禁忌癥者；②既往有宮頸切除病史及手術史；③既往有盆腔放射治療史者；④任一檢測方法陽性但不同意進行陰道鏡檢查者。630例婦女均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 薄層液基細胞學檢測

將薄層液基細胞學(thinPrep cytology test，TCT)專用采樣刷置于宮頸管內并抵住宮頸，旋轉3圈，停留10s，然后將采樣刷置入液基細胞保存液中，專用制片機處理成薄層涂片，巴氏染色后進行鏡檢，細胞學診斷按照2001年TBS分類標準分為：正常細胞、非典型鱗狀細胞及腺細胞、低度鱗狀上皮內病變(即CINⅠ)、高度鱗狀上皮內病變(即CINⅡ、CINⅢ)、鱗狀細胞癌和腺癌，除正常細胞外，其余病變均判斷為結果陽性。

1.2.2 人乳頭狀瘤病毒DNA檢測

采用美國進口的HC-Ⅱ試劑盒，用專用毛刷置宮頸口處旋轉3圈，停留10s，然后將專用毛刷置于專用標本保存管內，行HPV-DNA檢測。HPV-DAN≥1.0pg/mL判斷為結果陽性。

1.2.3 病理學檢查

對630例宮頸病變患者中TCT、HPV-DNA任一檢測方法陽性及雙陽性者進行陰道鏡檢查，若陰道鏡未發現病灶或圖像不清晰者，在宮頸3、6、9、12點處取材活檢，若陰道鏡圖像異常者在病灶最嚴重部位或可疑部位取材活檢，按照2003年WHO《乳腺與女性生殖系統腫瘤病理與遺傳學》診斷標準，結果分為：慢性炎癥、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌。

1.3 觀察指標

觀察TCT細胞學檢測結果、HPV-DNA檢測結果，對任一檢測方法陽性者經陰道鏡宮頸活檢進行病理診斷，比較兩種檢測方法靈敏度、特異度、陽性預測值及陰性預測值，比較不同年齡段患者HPV感染情況。

1.4 統計學方法

所有數據均使用SPSS 16.0統計軟件進行分析，計量資料以均數±標準差表示，組間均數的比較方法采用獨立樣本的t檢驗，計數資料的比較方法采用卡方檢驗，以α=0.05為檢驗水準，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 薄層液基細胞學與人乳頭狀瘤病毒DNA陽性率比較

在630例患者中，TCT結果顯示細胞學陽性177例，陽性率為28.09%；HPV-DNA結果顯示HPV-DNA陽性191例，陽性率為30.32%，其中TCT及HPV-DNA雙陽性者143例。HPV-DNA檢測方法陽性率略高于TCT，但兩種檢測方法陽性率比較差異無統計學意義(χ2=0.752，P>0.05)，見表1。

表1 兩種檢測方法陽性率比較(n)

Table 1 Comparison of positive rate between two detection methods(n)

2.2 人乳頭狀瘤病毒DNA檢測與薄層液基細胞學檢測敏感度、特異度、陽性預測值及陰性預測值比較

TCT及HPV-DNA任一檢測方法陽性及雙陽性者共225例進行陰道鏡檢查并取宮頸活檢，病理學診斷結果：炎癥140例，CINⅠ69例，CINⅡ42例，CINⅢ17例，宮頸癌6例，HPV-DNA檢測敏感度及特異度均稍高于TCT檢測方法，兩種方法聯合檢測能夠將敏感度及特異度進一步提高，見表2。

2.3 不同年齡段婦女人乳頭瘤病毒感染情況比較

在191例HPV-DNA陽性者中，≥30歲者感染率為64.92%，30歲以下者感染率為34.83%，30歲以上HPV感染率顯著高于30歲以下者(χ2=34.020，P<0.01)，見表3。

表2 HPV-DNA檢測與TCT檢測敏感度及特異度比較(%)

Table 2 Comparison of sensitivity and specificity between HPV-DNA and TCT detection(%)

表3 191例HPV-DNA陽性者不同年齡段HPV感染情況比較

Table 3 Comparison of HPV infection situation among 191 cases of HPV-DNA positive at different ages

3 討論

3.1 宮頸癌的篩查方法及優缺點

宮頸癌的病理進程是一個較長的過程，臨床研究表明，從CIN發展到浸潤癌大約需經過8～12年的時間，在未經治療的CINⅡ-CINⅢ患者中，約有5%～30%可發展為浸潤癌，但接近10%～40%的病變可發生逆轉，而HPV感染后大約經過20年左右才可能致癌[3]，宮頸癌是目前可通過早治療而達到治愈的少數惡性腫瘤疾病之一，早期有效篩查是宮頸癌篩查的重要方法，其中“三階梯”方案是目前國際公認的宮頸癌篩查方法，即先通過宮頸細胞學檢查或者細胞學聯合HPV-DNA檢查，對結果陽性者或高度可疑者再進行陰道鏡檢查并行宮頸活檢以作出病理組織學診斷。其中臨床最常用的方法是TCT檢查，通過對宮頸病變細胞學檢查，能夠檢出宮頸病變的異常細胞。本研究中TCT對宮頸癌及癌前病變的敏感度為87.48%，特異度為64.46%，表明TCT對于宮頸病變診斷具有一定的準確率。近年來，TCT的推廣使宮頸癌的發病率大大降低，但因受樣本采集部位、質量等多種因素的制約，TCT檢查的假陰性率高達40%，以致導致誤診或漏診的發生，因此，不能將TCT作為確診宮頸癌的唯一診斷依據，因而HPV感染的檢測就顯得尤其重要。

3.2 在薄層液基細胞學基礎上聯合人乳頭狀瘤病毒檢測的臨床價值

絕大多數的流行病學和生物學研究都證明，高危型HPV病毒持續感染甚至多重感染是宮頸癌及癌前病變發病的必要條件及重要原因，并且建議把HPV-DNA作為預測婦女宮頸病變的風險標志物[4]。臨床研究表明，宮頸病變患者隨著病變程度的加重，HPV-DNA感染率逐漸增加，本研究中經宮頸活檢病理診斷為宮頸癌的6例患者均為HPV-DNA陽性，HPV感染率為100%，提示高危型HPV感染與宮頸病變程度密切相關，再次驗證了HPV感染為宮頸癌發病主因的臨床報道[5]。本研究結果顯示，HPV-DNA檢測敏感度及特異度均稍高于TCT檢測，當細胞學結果異常時，無論HPV-DNA是否陽性，病理組織學陽性率明顯高于HPV-DNA陽性而細胞學陰性者，認為單純檢測HPV-DNA用于初篩宮頸癌仍然有待進一步研究，因此，在TCT檢測的基礎上，聯合HPV-DNA檢測非常有必要。本研究表明，兩種方法同時檢測可將敏感度及特異度進一步提高，有助于減少漏診及誤診率。此外，本研究發現，30歲以上宮頸病變婦女HPV感染陽性率高達64.92%，顯著高于30歲以下婦女的HPV感染陽性率(34.83%)，表明宮頸病變婦女HPV感染率與年齡密切相關，而陳躍等[6]研究結果與本研究相反，30歲以下的女性HPV感染率高于30歲以上感染率，但同時也指出，宮頸病變發病高峰期與HPV感染高峰期比較大約滯后10年左右，故30歲以上婦女檢測HPV-DNA更具檢測價值。王美芬等[5]也指出，30歲以上女性HPV病毒感染后，易引起宮頸病變，更應重視該年齡段女性的病毒感染情況，故我們認為，單就HPV感染檢測來說，對于30歲以上婦女的檢測價值更大。

綜上所述，宮頸病變婦女HPV-DNA感染率較高，在TCT基礎上，聯合HPV感染檢測有助于更好地篩查癌前期病變及癌變，對于30歲以上的婦女更具有檢測價值。

[1]Reich O, Ballon M.DNA cytometry as a first-line method for diagnosis of cervical precancer with respect to clinical behavior[J].Eur J Gynaecol Oncol, 2010, 31(4):372-374.

[2]Mocarska A, Staroslawska E, Zelazowska-Cieslinska I,etal.Epidemiology and risk factors of the cervical squamous cell carcinoma [J].Pol Merkur Lekarski, 2012, 33(194):101-106.

[3]Uleberg K E, Munk A C, Skaland I,etal. A protein profile study to discriminate CIN lesions from normal cervical epithelium[J].Cell Oncol (Dordr),2011,34(5): 443-450.

[4]劉娜,王英紅. HPV與宮頸癌的關系及其檢測在臨床應用的進展[J].中國婦幼健康研究,2010, 2l(2):253-255.

[5]王美芬, 陳星, 吳朝陽, 等.高危型HPV檢測在宮頸病變篩查中的臨床價值[J].浙江實用醫學, 2012, 17(5):362-364, 377.

[6]陳躍,劉青云, 陳國群, 等.人乳頭狀瘤病毒DNA檢測在宮頸病變篩查中的應用研究[J].現代生物醫學進展, 2011, 11(12):2328-2330.

[專業責任編輯：安瑞芳]

Application of detecting HPV infection in screening of cervical lesions in grass-root women

KE Xiao-juan, YU Dong-shuang, HONG Cui-hua

(DepartmentofObstetricsandGynecology,People’sHospitalofYongjiaCountyinZhejiangProvince,ZhejiangYongjia325000,China)

Objective To evaluate the application value of detecting human papilloma virus (HPV) infection in screening of cervical lesions of grass-root women. Methods During the period of May 2012 to April 2014, 630 women with cervical diseases examined in obstetrics and gynecology department of People’s Hospital of Yongjia County and Maternity Hospital of Yongjia County were recruited in the research, and they undertook ThinPrep cytology test (TCT) and high risk HPV-DNA testing, and biopsy was done for cases with TCT and HPV-DNA positive results. Pathology results were taken as gold standard. Application effects of two methods were compared and HPV infection was observed among women at different ages. Results Among 630 patients, the positive rate of HPV-DNA was 30.32% and the positive rate of TCT was 28.09%. There was no significant difference in positive rate of two methods (χ2=0.752,P>0.05). But the sensitivity and specificity of HPV-DNA detection method were slightly higher than those of TCT detection method, and the combined detection with two methods could further improve the sensitivity and specificity. Among HPV-DNA positive subjects, infection rate of women≥30 was 64.92%, which was significantly higher than that of women below 30 (34.83%) (χ2=34.020,P<0.01).Conclusion HPV-DNA positive rate is high among women with cervical lesions. Combining TCT with HPV detection is helpful for screening cervical lesions, which is more valuable for women over 30.

HPV infection; grass-root women; cervical lesions screening; application value

2014-06-24

永嘉縣科技計劃資助項目(項目編號：2013404)

柯曉娟(1978-)，女，主治醫師，主要從事婦科工作。

洪翠華，副主任醫師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.04.074

R711.3

A

1673-5293(2015)04-0863-03