β1-腎上腺素受體自身抗體誘導(dǎo)的自噬和凋亡之間關(guān)系的研究

李　楊，王　麗，劉慧榮(山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系，山西太原03000;首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病生教研室，北京00069)

β1-腎上腺素受體自身抗體誘導(dǎo)的自噬和凋亡之間關(guān)系的研究

李楊1，王麗1，劉慧榮2△
(1山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系，山西太原030001;2首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病生教研室，北京100069)

目的:通過(guò)使用自噬激動(dòng)劑、自噬抑制劑、凋亡抑制劑以及蛋白阻滯劑處理或預(yù)處理已由β1-腎上腺素受體自身抗體(β1-AA)造模的H9c2細(xì)胞，探討能否通過(guò)人為因素調(diào)控細(xì)胞自噬從而下調(diào)心肌細(xì)胞凋亡，改善心功能受損。方法:采用不含EDTA的0. 25%胰蛋白酶消化傳代H9c2心肌細(xì)胞，用含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，主動(dòng)免疫Wistar大鼠獲得的β1-AA對(duì)細(xì)胞進(jìn)行24 h造模處理，或用自噬激動(dòng)劑雷帕霉素、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、自噬抑制劑氯喹、凋亡抑制劑、蛋白阻滯劑分別單獨(dú)給予或者聯(lián)合處理細(xì)胞，采用Western blot以及RT-PCR對(duì)自噬的變化進(jìn)行檢測(cè);對(duì)自噬變化組采用流式細(xì)胞術(shù)以及線粒體跨膜電位檢測(cè)法對(duì)凋亡進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果: H9c2細(xì)胞約90%滿時(shí)可傳代并每隔約2天傳代一次;β1-AA可誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞發(fā)生自噬和凋亡;自噬和凋亡在一定范圍內(nèi)彼此影響，協(xié)同決定細(xì)胞死亡的發(fā)生。結(jié)論:β1-腎上腺素受體自身抗體誘導(dǎo)的自噬和凋亡在一定范圍內(nèi)彼此之間相互調(diào)節(jié)。

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