低氧上調大鼠PASMCs鈣激活性氯離子通道表達的ERK1/2通路機制*

黃林靜，　趙美平，張聰聰，鄭夢曉，應　磊，王萬鐵(溫州醫科大學病理生理學教研室，浙江溫州325035)

低氧上調大鼠PASMCs鈣激活性氯離子通道表達的ERK1/2通路機制*

黃林靜，趙美平，張聰聰，鄭夢曉，應磊，王萬鐵△
(溫州醫科大學病理生理學教研室，浙江溫州325035)

目的:探討鈣激活性氯離子通道2(calcium-activated chloride channel 2，CLCA2)在大鼠低氧性肺動脈平滑肌細胞(pulmonary artery smooth muscle cells，PASMCs)中mRNA和蛋白表達的變化及其與ERK1/2信號通路的關系。方法:取14只雄性SD大鼠，使用酶消化法進行PASMCs原代培養，應用小鼠抗大鼠SM α-actin免疫熒光細胞化學法進行細胞鑒定;經培養鑒定PASMCs隨機分為常氧組(N組，n =6)、低氧組(H組，n =6)、DMSO對照組(D組，n =6)、U0126干預組(U組，n =6)和staurosporine aglycone干預組(SA組，n =6) ;采用免疫印跡法檢測CLCA2蛋白的表達，選用RT-PCR技術測定CLCA2 mRNA水平的表達。結果:與N組比較，H組PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達量均顯著上調(均P＜0. 01) ;與D組比較，U組CLCA2 mRNA和蛋白的表達均明顯上調(均P＜0. 01)，SA組mRNA的表達顯著下調(P＜0. 01)，蛋白的表達輕微下調(但P＞0. 05)。結論:低氧可上調大鼠PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達; ERK1/2通路抑制劑U0126能上調PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達; ERK1/2通路激活劑staurosporine aglycone可下調PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達。

浙江省溫州市對外科技合作項目(No.HZ0090066)

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